Влияние энрофлоксацина на показатели красной крови цыплят при экспериментальном сальмонеллезе

Нарушения в технологии содержания, ветеринарно-санитарном контроле, а также стрессы, являются непосредственными причинами подавления резистентности организма кур, что, как следствие, приводит к вспышкам бактериальных инфекций [3]. Одним из наиболее часто возникающих заболеваний в условиях птицеводческих фабрик является сальмонеллез, который вызывает значительные экономические потери в связи с большим падежом птиц, в том числе и в раннем возрасте, снижением продуктивности, а также затратами на диагностические, лечебные и профилактические мероприятия [12]. Болезнь вызывают различные сероварианты микроорганизмов рода Salmonella, среди которых наиболее часто обнаруживаемыми у птиц являются Salmonella typhimurium и Salmonella enteritidis [9]. Зачастую своевременное выявление больной птицы затруднено, это обуславливается тем, что инфицирование некоторыми серотипами, например, S. enteritidis, может не вызывать проявления каких-либо клинических симптомов [7]. Среди птиц могут быть скрытые носители бактерии, но выделяемый ими помет является фактором быстрого распространения болезни, а полученная продукция от таких кур является контаминированной [5, 9]. Изучая статистические данные эпидемического процесса, Мезенцев С.В. (2010) отмечает, что сальмонеллезы, вызванные серовариантом S. enteritidis больше поражают именно людей, нежели птиц. Основным звеном во вспышках за- болевания, вызванных этой бактерией, является непосредственно человек [6].

Для борьбы с данным патогенным микроорганизмом в лечебных и профилактических целях применяют большой арсенал противомикробных средств. Одними из используемых современных препаратов являются фторхинолоны (ФХ), проявляющие выраженную активность против гра-мотрицательных и грамположительных бактерий, а также отличающиеся хорошей эффективностью в терапии экспериментальных инфекций [11, 13]. ФХ характеризуются общим уникальным механизмом воздействия на бактерий, при этом имеют оптимальные фармакокинетические свойства и высокую степень биодоступности. Необходимо также отметить их эффект в монотерапии, что обуславливает отсутствие потребности в комбинированных схемах лечения [10]. Энрофлоксацин – препарат группы ФХ, который был создан для лечения болезней микробной этиологии у птиц. Средство широко применяется в птицеводческих хозяйствах, что определяется его хорошим антибактериальным действием. Тем не менее, несмотря на частое использование и отличные фармакологические свойства, информация о его влиянии на физиологический статус птиц при лечении инфекционных заболеваний недостаточна и часто противоречива. В связи с этим, целью нашей работы является исследование влияния энрофлоксацина на показатели красной крови цыплят в условиях экспериментального сальмонел- леза.

Материал и методы исследований. Проведены два опыта («a» и «b») на суточных петушках кросса Хайсекс Браун. Группы Ia и Ib (контрольные) в ходе эксперимента получали рацион, сбалансированный по основным питательным и биологически активным веществам, и чистую воду. Группы IIa и IIb за сутки до экспериментального заражения и в течение четырех суток после получали с водой энро-флоксацин в дозе 200 мг/л. На вторые сутки опыта внутрибрюшинно осуществлено инфицирование цыплят групп IIa и IIIa культурой Salmonella typhimurium, а групп IIb и IIIb – культурой Salmonella enteritidis,

Hb

ЦП= RBC · где ЦП – цветной показатель, Hb – содержание (1012·л-1)

в концентрациии 30 млн. КОЕ/0,5 мл. Отбор крови у всех подопытных петушков осуществляли в первые, третьи, пятые, седьмые и девятые сутки после заражения. Полученную кровь стабилизировали 3,8 % цитратом натрия.

Проведены исследования показателей красной крови: скорость оседания эритроцитов (СОЭ) методом Панченкова, количество эритроцитов методом прямого подсчета в камере Горяева, содержание гемоглобина колориметрически гематиновым методом Сали, гематокрит расчетным способом по С.А. Акулову с соавт. [1]. Расчет цветного показателя производен по формуле [2]:

( ^г )·6

дл

2/100000, гемоглобина, RBC – количество эритроцитов

Статистическая обработка цифрового материала осуществлена с использованием программы SPSS Statistic 17.0, достоверность полученных результатов оценивали при помощи непараметрического критерия Манна-Уитни.

Результаты исследований. Исследования по применению фторхинолонов демонстрируют, что препараты этой фармакологической группы оказывают мало-выраженное негативное влияние на систему крови, которое чаще всего проявляется в виде анемических явлений, однако эти данные касаются только млекопитающих, так как у птиц этот вопрос мало изучен [8]. В представленных исследованиях у цыплят кросса Хайсекс Браун на протяжении всего опыта регистрировали достоверные изменения гематологических показателей, косвенно указывающие на развитие анемического процесса, который, вероятно, вызван воздействием экспериментальной инфекции. Так, в опыте «a», в крови цыплят зараженных групп произошел сдвиг показателя количества эритроцитов. В первые сутки исследования, отмечается достоверное увеличение содержания этих клеток на 20 % относительно контроля в группе IIIа, а уже на третьи сутки повышение на 33 % происходит в группе IIa. Затем количество эритроцитов в крови цыплят этих групп достоверно снижается: в группе IIa изменение в сравнении с контрольными данными составило 10 %, а в группе IIIа – 24 %, но уже в последний день исследований достоверных различий не выявлено (Таблица 1).

Подобное смещение показателя в сторону увеличения, возможно, находится в связи с воздействием бактерий S. typhi-murium, так как известно, что повышение количества эритроцитов может происходить в начальной стадии формирования ряда заболеваний микробной этиологии [4]. Кроме того, предполагается, что птичьи эритроцитарные клетки способны осуществлять иммунноподобную функцию [14]. Изменение количества эритроцитов в крови цыплят опыта «b» проявилось достоверным снижением показателей на третьи, пятые и седьмые сутки в группе IIIb в среднем на 20 %, а также уменьшением на 16 % и 23 % в группе IIb на пятые и седьмые сутки соответственно. В связи с тем, что в группах, получавших энрофлоксацин в обоих опытах, в целом, изменения отно- сительно контрольных результатов менее      чиной проявившегося эритроцитоза явля- выражены, можно предположить, что при-      ется экспериментальное заражение.

Таблица 1 – Динамика показателей красной крови цыплят при заражении культурой

Salmonella typhimurium

в и	cd в в	СОЭ, -1 мм·ч-	Гемоглобин, г·л-1	Эритроциты, 1012·л-1	Цветной показатель, у.е.	Гематокрит, %
1	Ia	2,83±0,31	107,0±6,46	1,44±0,08	2,31±0,27	32,2±1,95
	IIa	3,0±0,36	82,7±2,76*	1,52±0,09	1,65±0,08*	24,9±0,83*
	IIIa	3,33±0,61	85,3±2,67*	1,73±0,04**	1,48±0,07**	25,7±0,81*
3	Ia	2,67±0,21	99,0±2,91	1,59±0,11	1,89±0,09	29,8±0,88
	IIa	2,33±0,33	98,0±4,71	2,12±0,12*	1,41±0,09**	29,5±1,42
	IIIa	3,17±0,79	80,3±3,16**	1,78±0,09	1,37±0,05**	24,2±0,95**
5	Ia	3,00±0,26	97,3±3,29	1,79±0,04	1,64±0,07	29,3±0,99
	IIa	3,00±0,45	79,0±3,57*	1,49±0,06**	1,61±0,11	23,8±1,07**
	IIIa	3,00±0,36	80,3±2,27**	1,74±0,07	1,39±0,03**	24,2±0,68**
7	Ia	2,50±0,34	110,0±2,68	1,83±0,02	1,81±0,04	33,1±0,81
	IIa	2,50±0,22	100,3±3,56	1,66±0,02**	1,82±0,06	30,2±1,07
	IIIa	2,50±0,34	89,3±6,19*	1,47±0,03**	1,82±0,09	26,9±1,86*
9	Ia	2,83±0,31	122,3±4,24	1,75±0,03	2,09±0,08	36,8±1,28
	IIa	2,83±0,31	108,3±2,71**	1,79±0,06	1,82±0,06*	32,6±0,81**
	IIIa	2,0±0,00	105,7±2,98**	1,77±0,08	1,80±0,08*	31,8±0,89**

** – статистически достоверные различия между значениями в контрольной и группах опыта по U-критерию Манна-Уитни при p<0,01; * – статистически достоверные различия между значениями в контрольной и группах опыта по U-критерию Манна-Уитни при p<0,05

Таблица 2 – Динамика показателей красной крови цыплят при заражении культурой

Salmonella enteritidis

в и	cd в в	СОЭ, -1 мм·ч-	Гемоглобин, г·л-1	Эритроциты, 1012·л-1	Цветной показатель, у.е.	Гематокрит, %
1	Ib	2,50±0,34	96,7±4,05	1,72±0,09	1,72±0,14	29,1±1,22
	IIb	4,83±2,06	102,3±6,54*	1,81±0,16	1,77±0,19	30,8±1,97
	IIIb	3,00±0,26	88,7±4,15	1,68±0,05	1,59±0,12	26,7±1,25
3	Ib	1,83±0,31	106,3±6,56	1,72±0,07	1,86±0,11	32,1±1,98
	IIb	2,50±0,43	88,3±2,61*	1,64±0,04	1,62±0,06	26,6±0,78*
	IIIb	2,67±0,21	81,3±2,29**	1,49±0,03*	1,63±0,06	24,5±0,69**
5	Ib	2,33±0,21	124,0±4,53	1,76±0,04	2,12±0,08	37,3±1,36
	IIb	2,50±0,22	90,7±3,68**	1,51±0,11*	1,85±0,15	27,3±1,11**
	IIIb	1,83±0,31	81,0±2,91**	1,55±0,08*	1,59±0,11**	24,4±0,88**
7	Ib	2,67±0,49	104,0±1,26	1,88±0,07	1,67±0,06	31,3±0,38
	IIb	2,33±0,21	94,0±2,31*	1,52±0,02**	1,85±0,05*	28,3±0,69*
	IIIb	1,67±0,21	88,7±3,68*	1,54±0,04**	1,74±0,11*	26,7±1,11*
9	Ib	2,50±0,34	124,3±3,56	1,66±0,03	2,25±0,05	37,4±1,07
	IIb	2,83±0,17	101,7±2,75**	1,75±0,05	1,75±0,08**	30,6±0,83**
	IIIb	2,33±0,33	108,7±1,43*	1,82±0,09	1,82±0,11**	32,7±0,43**

** – статистически достоверные различия между значениями в контрольной и группах опыта по U-критерию Манна-Уитни при p<0,01; * – статистически достоверные различия между значениями в контрольной и группах опыта по U-критерию Манна-Уитни при p<0,05

Показатели СОЭ в данном исследовании не были информативными, так как достоверные изменения в эксперименте не зафиксированы.

На развитие анемических явлений указывает снижение содержания гемоглобина, происходившее в обоих опытах. В опыте «b» достоверные изменения не выявлены только в первые сутки после заражения (Таблица 2).

Показатели группы IIb были меньше контрольных значений на 20 %, 36 %, 10 % и 22 % на третьи, пятые, седьмые и девятые сутки соответственно. Снижение содержания гемоглобина в группе IIIb на 30 %, 53 %, 17 % и 14 % произошло в аналогичные периоды исследования.

Похожие результаты получены и в опыте «a», но достоверные изменения здесь регистрируются сразу после заражения, что, вероятно, вызвано особенностями серотипа S. typhimurium, который оказывает более негативное воздействие на организм. Это подтверждается тем, что в группе IIIа достоверное снижение концентрации гемоглобина на 25 %, 23 %, 21 %, 23 % и 15 % фиксировали на протяжении всего опыта. Регистрируемые в этой группе изменения происходили чаще, чем в группе IIa.

О наличии эритроцитов со сниженной концентрацией гемоглобина также свидетельствует уменьшение цветного показателя в обоих исследованиях. Тем не менее, изменения в группе IIb установлены только на седьмые и девятые сутки, а также на первые, третьи и девятые сутки в группе IIа, что является менее выраженным достоверным сдвигом, в сравнении с данными полученными в группах IIIa и IIIb.

На протяжении всего исследования во всех исследуемых опытных группах зафиксировано уменьшение показателя гематокрита, что является признаком нарушения дыхательной функции крови. Так, в группе IIb и IIIb достоверные отличия отсутствуют только сразу после заражения. Наиболее выражено изменение в группе IIIa, где снижение гематокрита регистрировали на протяжении всего исследования. В группе IIa достоверные отличия на 29 %,

23 % и 12 % относительно контрольных результатов выявлены при анализе крови в первые, пятые и девятые сутки соответственно.

Несмотря на то, что в крови цыплят, получавших энрофлоксацин, установлены менее выраженные изменения, что связано с воздействием препарата на развитие инфекционного процесса, необходимо отметить достоверные отличия изучаемых показателей по сравнению с контролем до последних суток эксперимента включительно.

Заключение. В результате проведенных исследований было выявлено, что наиболее достоверные изменения в группе, получавшей энрофлоксацин, были зафиксированы при экспериментальном заражении культурой S. typhimurium, оказавшей более существенное воздействие на показатели красной крови по сравнению с S. enteritidis. Сдвиги изученных показателей были достоверными и более выраженными в группах, не получавших энрофлоксацин. Тем не менее, стабилизацию количества эритроцитов в последние сутки исследований в двух опытах нельзя связать с воздействием фторхинолона, так как аналогичную картину наблюдали в группах IIIa и IIIb, в крови цыплят которых также отсутствовали достоверные отличия в сравнении с контрольными данными. Сравнивая результаты, полученные в группах IIa, IIb и IIIa, IIIb, можно предположить, что применение энрофлоксацина не вызывает серьезного негативного влияния на показатели красной крови подопытных цыплят, а происходящие достоверные изменения являются следствием развития экспериментальной инфекции.

Резюме

В представленной работе изучены изменения показателей системы красной крови цыплят в результате применения химиотерапевтического препарата энрофлоксацин при экспериментальном сальмонеллезе. В ходе исследований осуществляли экспериментальное заражение цыплят культурами Salmonella typhimurium и Salmonella enteritidis. Цыплята одной из инфицированных групп в каждом опыте за сутки до и в течение четырех суток после заражения получали с водой энрофлоксацин в дозе 200 мг/л. В результате проведенных исследований выявлены достоверные изменения в группе, получавшей энрофлоксацин, при экспериментальном заражении культурой S. typhimurium, оказавшей более существенное воздействие на показатели красной крови по сравнению с S. enteritidis.