Физиологические особенности тромбоцитов у помесных новорожденных телят в условиях Курской магнитной аномалии

помеси черно-пестрой и голштинской породы, магнитной аномалии. В связи с тем, что наиболее ранней и важной для процессов роста является фаза новорожденности, особо большое значение для науки и практики имеет выяснение особенностей тромбоцитарных характеристик именно на ее протяжении у помесных телят в условиях Курской магнитной аномалии [8].

Цель проведенного исследования – установить особенности физиологических характеристик тромбоцитов у здоровых новорожденных поместных телят, полученных от черно-пестрых коров, покрытых быком голштинской породы в условиях Курской магнитной аномалии.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Работа выполнена на 33 помесных телятах, полученных от здоровых черно-пестрых коров, покрытых голштинским быком, после нормально протекавшей стельности, которых осматривали и обследовали в течение фазы новорожденности 5 раз: на 1-2-е, 3-4-е, 5-6-е, 7-8-е и 9-10-е сутки. Стельные коровы и телята содержались в Курской области в зоне непосредственного влияния на них Курской магнитной аномалии.

Непрямая оценка обмена в тромбоцитах арахидоновой кислоты (АА) с определением в них активности циклооксигеназы и тромбок-сансинтетазы проведена с помощью трех проб переноса в результате определения агрегации тромбоцитов на фотоэлектроколориметре. Количественное содержание в тромбоцитах АТФ и АДФ, уровень их секреции в ответ на коллаген и особенности белкового состава цитоскелета кровяных пластинок (актин и миозин) в ходе активации и агрегации тромбоцитов выясняли под влиянием АДФ и тромбина.

Состояние агрегации тромбоцитов (АТ ) регистрировали визуальным микрометодом с применением в качестве индукторов АДФ (0,5 х 10-4 М), коллагена (разведение 1:2 основной суспензии), тромбина (0,125 ед/мл), адреналина (5,0x10-6 М), ристомицина (0,8 мг/мл), а также комбинаций АДФ и коллагена, АДФ и адреналина, коллагена и адреналина в тех же концентрациях со стандартизированным числом тромбоцитов в исследуемой плазме 200x109 тр. Внутрисосудистую активность тромбоцитов определяли с использованием фазово- контрастного микроскопа [11]. Результаты исследования обработаны критерием Стьюдента.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ОБСУЖДЕНИЕ

Найденные особенности тромбоцитарной активности у содержащихся в условиях Курской магнитной аномалии здоровых помесных телят в фазу новорожденности заключались в тенденции к понижению функциональных характеристик кровяных пластинок при стабильно нормальном их количестве в крови животных. Так, у наблюдаемых помесных телят на 1-2-е сутки жизни АТ наступала в ответ на коллаген за 36,0±0,12с, а к 9-10-м суткам жизни за 37,0±0,11с. Сходная тенденция к замедлению АТ выявлена для АДФ и ристомицина, наступавшей к концу наблюдения за 46,1±0,09с и 53,5±0,24с, соответственно. Выявлена склонность к торможению тромбиновой (до 58,3±0,21с) и адреналиновой (до 106,6±0,35с) АТ. Аналогичная тенденция к увеличению времени развития АТ отмечена и на фоне сочетаний индукторов: для АДФ и адреналина до 43,6±0,22с, для АДФ и коллагена до 32,5±0,06с, для адреналина и коллагена до 36,6±0,13с.

Количество дискоцитов в крови помесных телят в течение всей фазы новорожденности испытывало тенденцию к увеличению. При этом в крови животных число диско-эхиноцитов, сфероцитов, сферо-эхиноцитов и биполярных форм кровяных пластинок имело склонность к снижению в течение первых 10 суток жизни. Вследствие этого сумма всех активных форм тромбоцитов у наблюдаемых телят уменьшилась за новорожденность на 7,9%. Число свободно перемещающихся по крови малых и больших агрегатов тромбоцитов и количество тромбоцитов, вовлеченных в процесс агрегатообразования, также статистически незначимо понижались в течение всей первой фазы онтогенеза.

Одном из важных механизмов, обеспечивающих выявленную у обследованных телят тенденцию к ослаблению АТ у помесных телят в течение фазы новорожденности, можно считать наклонность к ослаблению у них обмена АА в тромбоцитах с понижением тромбоксанообразования. Об этом косвенно можно было судить по снижению

АТ в простой пробе переноса (на 9-10-е сутки жизни 26,3±0,12%). Тенденция к ослаблению метаболизма АА в тромбоцитах у наблюдаемых животных была связана со склонностью к снижению у них активности обоих ферментов ее превращения в кровяных пластинках – циклооксигеназы и тромбоксансинтетазы. Величина восстановления АТ в коллаген-аспириновой пробе, косвенно характеризующая активность циклооксигеназы в тромбоцитах, достигала к концу наблюдения 74,3±0,11%. При этом, восстановление АТ в коллаген-имидазольной пробе, дающее возможность косвенно оценить активность тромбоксансинтета-зы в кровяных пластинках, у наблюдаемых телят также снижалось в течение первых 10 суток жизни, составляя к 9-10-м суткам 36,0±0,06%.

Исходно невысокое количество в тромбоцитах наблюдаемых животных АТФ и АДФ в течение наблюдения имело склонность к легкому понижению, достигая 5,32±0,010 и 3,13±0,009 мкмоль/109 тромбоцитов к концу фазы новорожденности. При этом уровень их секреции из тромбоцитов имел тенденцию к ослаблению за время наблюдения на 3,7% и 2,4%, соответственно, составляя на 9-10-е сутки жизни 24,5±0,09% и 33,0±0,12%.

Содержание актина и миозина на 1-2-е сутки в тромбоцитах помесных телят в условиях Курской магнитной аномалии составляло 21,8±0,14 и 10,9±0,17% общего белка в тромбоците, а к концу фазы новорожденности 21,0±0,12 и 10,2±0,12% общего белка в тромбоците. Выраженность дополнительного образования актина на фоне активации сильным или слабым индуктором и в ходе последующей агрегации под их влиянием у помесных телят также испытывало тенденцию к понижению в течение всей фазы новорожденности.

Выявленная наклонность к ослаблению активности кровяных пластинок у здоровых новорожденных помесных телят в условиях Курской магнитной аномалии обеспечивается тенденцией к ослаблению оцененных их отдельных функциональных механизмов, активность которых во многом определяется функциональным состоянием организма их матерей [5,14] особенно в начале онтогенеза [3]. В связи с этим анализ уровня активности тромбоцитарного гемостаза и тонких механизмов его реализации у здоровых помесных телят в фазе молозивного питания имеет большую практическую значимость.

Активность АТ у наблюдаемых помесных телят в течение первых 10 суток жизни в отношении испытанных индукторов характеризовалась наклонностью к ее снижению за счет сокращения количества рецепторов к ним на мембранах кровяных пластинок [9,10]. Регистрация АТ одновременно с двумя индукторами агрегации у наблюдаемых новорожденных животных выявила степень их взаимопотенциирующего влияния в физиологических условиях. Регистрация агрегации тромбоцитов при сочетании ее индукторов моделирует реальные условия кровотока у растущих телят, позволяя оценить АТ при ее стимуляции по различным путям, что свойственно для обычных условий кровотока [5]. Уровень дискоцитов в крови помесных животных был на момент рождения достаточно высок и имел дополнительную тенденцию к росту на протяжении фазы молозивного питания. Это сочеталось у помесных телят со склонностью к снижению суммы активных форм тромбоцитов и уровня агрегатов тромбоцитов в их крови. Это обусловило легкое ослабление гемостатической активности тромбоцитов при невыраженном понижении адгезии и агрегации in vivo, связанном с некоторым уменьшением экспрессии на их мембранах фибриногеновых рецепторов (GP IIв - IIIа) и ослаблением каталитических свойств фосфолипидов плазматической мембраны [12,13].

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Найденные особенности тромбоцитарной активности у содержащихся в условиях Курской магнитной аномалии здоровых новорожденных помесных телят обусловливают оптимальный уровень адаптации их внутрисосудистой активности тромбоцитов и микроциркуляции в тканях, необходимый для потребностей их организма Их динамика во многом связана с реализацией их генетической программы приспособительных реакцией в начале внеутробного существования и в незначительной степени подвержена влиянию Курской магнитной аномалии.