Исследование по созданию иммуномодулирующего лекарственного средства - таблеток с экстрактом эхинацеи

Желонкин Николай Николаевич, кандидат фармацевтических наук, доцент кафедры фармацевтической технологии

Бер Ольга Владимировна, кандидат фармацевтических наук, старший преподаватель кафедры фармацевтической технологии

Сохина Анна Аркадьевна, кандидат фармацевтических наук, старший преподаватель кафедры фармацевтической технологии среди растительных лекарственных средств, как в России, так и за рубежом [1, 2]. Проведенный нами маркетинговый анализ свидетельствует о том, что на фармацевтическом рынке РФ, в том числе Самарской области, преобладают дорогостоящие зарубежные препараты и биологически активные добавки на основе эхинацеи пурпурной. Ранее нами были разработаны оригинальный способ получения настойки эхинацеи и состав сиропа с настойкой эхинацеи [3, 4].

Цель работы: дальнейшее расширение ассортимента препаратов.

Нами проведены исследования по разработке на основе эхинацеи пурпурной таблеток с сухим экстрактом. Задача является актуальной, поскольку ее решение не только повлияет на укрепление позиций отечественных лекарственных средств на фармацевтическом рынке нашей страны, но и позволит расширить круг потенциальных потребителей, способствуя оздоровлению населения.

Объекты и методы исследования. За основу для определения дозы сухого экстракта эхинацеи в составе таблеток были приняты результаты количественного определения суммы фенилпропаноидов в сухом экстракте и в настойке эхинацеи. Для настойки рекомендуемая суточная терапевтическая доза составляет 20 капель [5]. Мы определили, что содержание действующих веществ в суточной дозе настойки соответствует 0,01 г сухого экстракта эхинацеи пурпурной. В этом количестве сухого экстракта содержится 0,6% (0,0012) суммы фенил-пропаноидов в пересчете на цикориевую кислоту. Таким образом, нами была обоснована доза сухого экстракта эхинацеи в таблетках – 0,01 г.

Для получения таблеток предпочтительным является метод прямого прессования, который имеет ряд преимуществ перед другими технологиями таблетирования, а именно: уменьшение числа технологических операций, исключение воздействия влаги на лекарственные и вспомогательные вещества, меньшая микробная загрязненность, экономия производственных площадей и расходов на оборудование, энергию и др. [6, 11]. Технология прямого прессования считается наиболее приемлемой для чувствительных к влаге материалов, в том числе растительных экстрактов, однако сухой экстракт эхинацеи непригоден для прямого прессования при рассчитанном содержании в одной таблетке и не обладает требуемыми технологическими свойствами. Получение таблеток выбранным методом предполагает поиск вспомогательных веществ для формирования таблеточной массы. Выбранные вещества долж-ны иметь подходящие для прямого прессования технологические характеристики (сыпучесть, прессуемость, насыпная плотность, гранулометрический состав). По данным научной литературы [6, 7, 9-11] на сегодняшний день наиболее распространенными и доступными вспомогательными веществами для производства таблеток прямым прессованием являются лактоза безводная, моногидрат лактозы, производные крахмала, микрокристаллическая целлюлоза, кальция карбонат, сорбит. Сорбит характеризуется хорошей прессуемостью, текучестью, растворим в воде в соотношении 1:1, имеет сладкий вкус, поэтому его с успехом применяют в качестве наполнителя и корригента вкуса в технологии таблеток прямым прессованием [6, 8, 11]. Благодаря легкой растворимости сорбита в воде можно прогнозировать его благоприятное воздействие на процесс высвобождения действующих веществ из таблеток, однако следует отметить, что таблетки с сорбитом восприимчивы к влаге, что следует учитывать при выборе материала упаковки.

Результаты и их обсуждение. Нами был исследован в качестве наполнителя в таблетках сорбит пищевой, ранее использованный нами в составе сиропа с настойкой эхинацеи [8]. Результаты проведенных экспериментов (табл. 1) показали, что основные технологические характеристики сорбита пищевого (гранулометрический состав, насыпная плотность, сыпучесть, прессуемость) имеют значения, приемлемые для прямого прессования [7].

Таблица 1. Технологические характеристики сорбита

Показатель	Результаты определения	Значения показателей, приемлемые для прямого прессования
гранулометрический состав	фракции, с размером частиц 0,5-2 мм - 98,7%; фракции с размером частиц до 0,2 мм - 0,6%.	фракции, с размером частиц 0,5-2 мм - более 60%; фракции с размером частиц до 0,2 мм - менее 20%.
насыпная плотность (г/см 3 )	0,65±0,02	0,6-0,7
сыпучесть (г/с)	15,2±1,2	6-10
прессуемость (Н)	78,0±6,0	70-100

Для однородного распределения малого количества сухого экстракта эхинацеи в таблетируемой массе и предупреждения расслаивания экстракта и сорбита по плотности нами предложено вводить экстракт в спиртовом растворе. Раствор экстракта 1:50 в 40% этиловом спирте разбрызгивали из пульверизатора на сорбит при перемешивании, затем проводили сушку таблеточной массы на воздухе также при перемешивании. Был получен однородный порошок, который подвергали таблетированию на кривошипной таблеточной машине. Состав на одну таблетку: экстракта эхинацеи сухого - 0,01 г, сорбита - до получения таблетки массой 0,2 г.

Определяли качество полученных таблеток с экстрактом эхинацеи пурпурной по показателям: внешний вид, отклонение от средней массы, однородность дозирования, прочность на истирание, распадаемость и растворимость

[12]. Выявлено, что качество полученных таблеток по данным показателям соответствует требованиям ГФ СССР XI издания (табл. 2).

В условиях промышленного производства таблеток для нанесения спиртового раствора сухого экстракта на частицы сорбита предлагаем использовать установки для нанесения пленочных покрытий на основе органических раство-ригелей в дражировочном котле, например УПТ-25, УЗЦ-25 [6, 11]. Это устройства замкнутого цикла, способные улавливать пары растворителей, регенерировать их и снова пускать в производство (рис. 1). Технологическими параметрами процесса являются: температура, количество, влажность входящего и выходящего воздуха, скорость и давление напыления из форсунки, длительность распыления раствора, расход раствора [11].

Таблица 2. Показатели качества лекарственного препарата «Эхинацеи экстракта таблетки по 0,01 г»

Показатель качества	Результаты определения	Нормируемые значения
внешний вид	таблетки имеют правильную форму, края цельные без выщербленных мест, поверхность гладкая, однородная, светло-бежевого цвета	таблетки должны иметь правильную форму, цельные края без выщербленных мест, гладкую однородную поверхность
отклонение от средней массы, (±, %)	6,89;   2,39;   2,35;   2,99;   5,65; 0,81;   0,86;   3,98;   1,74;   0,67; 0,019;  2,63;   0,77;   3,33;   3,97; 1,55;  1,11;   4,80;  0,22;   4,07	±7,5
однородность дозирования (±, %)	3,31;   1,64;   2,03;   2,23;   3,39; 0,73;  0,04;  6,45;  1,44;   1,10.	отклонение от среднего содержания в одной таблетке не более ±15
прочность на истирание (%)	99,67	не менее 97
распадаемость	2 мин 20 сек	не более 15 мин
растворимость (%)	100	не менее 75

Рис. 1. Устройство установки типа УЗЦ-25 (схема) [11]:

1 – водоохлаждающая установка; 2 – конденсатор растворителя; 3 – система трубопроводов; 4 – привод дражировочного котла; 5 – местный отсос; 6 – дражировочный котел; 7 – блок приготовления раствора экстракта; 8 – пульт управления; 9 – кожух дражировочного котла; 10 – сорбит; 11 – распылитель; 12 – калорифер; 13 – вентилятор; 14 – сборник растворителя

При разработке методик качественного и количественного анализа лекарственного препарата «Эхинацеи экстракта таблетки» нами учтены как свойства биологически активных соединений, так и физико-химические свойства сорбита, его растворимость в воде и других растворителях [8, 13]. Для проведения качественного анализа таблеток нами предложен метод ТСХ (рис. 2). После проведенной серии экспериментов на этапе пробоподготовки нами было предложено для растворения таблеток использовать 40% этиловый спирт..

Методика качественного анализа лекарственного препарата «Эхинацеи экстракта таблетки». Около 0,2 г препарата растворяют в 5 мл 40% этилового спирта. На линию старта пластинки «Силуфол УФ-254» или «Сорбфил-ПТСХ-АФ-А-УФ» микропипеткой наносят 0,02

мл раствора. Пластинку с нанесенной пробой помещают в хроматографическую камеру, которую предварительно насыщают не менее 24 ч смесью растворителей: хлороформ-этиловый спирт-вода (26:14:3), и хроматографируют восходящим способом. После того, как фронт растворителей пройдет около 13 см («Силуфол УФ-254») или 9 см («Сорбфил-ПТСХ-АФ-А-УФ»), пластинку вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 5 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 366 нм.

Рис. 2. ТСХ лекарственного препарата «Эхинацеи экстракта таблетки» (просмотр в УФ-свете): 1 – настойка эхинацеи пурпурной; 2 – сухой экстракт эхинацеи пурпурной; 3 – «Эхинацеи экстракта таблетки»

На хроматограмме должно обнаруживаться доминирующее пятно сине-фиолетового цвета на уровне пятна образца сравнения с R f около 0,5 (цикориевая кислота); допускается наличие других пятен. Пластинки «Силуфол УФ-254» 15х15 см или «Сорбфил-ПТСХ-АФ-А-УФ» 10х10 см (ТУ 26-11-17-89) разрезают поперек линий накатки соответственно на 3 части размером 15х5 см или на 2 части 10х5 см и перед использованием активируют в сушильном шкафу при 110 ºС в течение 1 ч.

Содержание действующих веществ (гид-роксикоричных кислот в пересчете на цикорие-вую кислоту) определяли методом УФ-спектрофотометрии (рис. 3). Методика была апробирована с использованием нескольких растворителей (вода очищенная, спирто-водные смеси в различных соотношениях) и при различных условиях. В качестве оптимального растворителя среди прочих нами была выбрана вода очищенная. Разработанная методика проста и не требует особых условий проведения, описана ниже.

Методика количественного определения суммы фенилпропаноидов в лекарственном препарате «Эхинацеи экстракта таблетки». Таблетки в количестве 20 штук измельчают в ступке. 0,2 г полученного порошка (точная навеска) растворяют в 20 мл воды очищенной, помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, объем раствора доводят водой очищенной до метки. Измерение оптической плотности полученного раствора проводят на спектрофотометре при длине волны 328 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют воду очищенную. Содержание суммы фенилпропа-ноидов в пересчете на цикориевую кислоту Х (%) вычисляют по формуле:

v Dх50 mх782’ где D – оптическая плотность исследуемого раствора; m – масса навески, г; 782 – удельный показатель поглощения цикориевой кислоты при 328 нм.

Результаты определения содержания гид-роксикоричных кислот в пересчете на цикорие-вую кислоту в таблетках эхинацеи пурпурной и метрологические характеристики методики представлены в табл. 3.

Рис. 3. УФ-спектр раствора лекарственного препарата «Эхинацеи экстракта таблетки»

Таблица 3. Метрологические характеристики спектрофотометрической методики количественного определения суммы фенилпропаноидов в лекарственном препарате «Эхинацеи экстракта таблетки»

f	X	S	P, %	t (P,f	NX	E, %
10	0,6108	0,0079	95	2,23	0,0177	±2,90

Выводы: в результате проведенных фито-химических и технологических исследований предложены состав и способ получения лекарственного средства «Эхинацеи экстракта таблетки» по 0,01. Разработаны методики качественного и количественного анализа таблеток, основанные на определении суммы фенилпропанои-дов в пересчете на цикориевую кислоту с применением методов тонкослойной хроматографии и УФ-спектрометрии. Определены показатели качества полученных таблеток на соответствие требованиям Государственной фармакопеи СССР XI издания.