Изучение химического состава и антимикробной активности сухого экстракта из цветков бархатцев распростертых (Tagetes patula L.)

Сергеева Елена Олеговна, кандидат фармацевтических наук, старший преподаватель кафедры биохимии сырье, контроль качества, микробиологическая среди молодого населения земного шара. Люди за последнее столетие допустили слишком большое увеличение производства и распространение отходов, субпродуктов и химикалий. Загрязнение сильно вредит жизни на нашей планете.

Актуальность защиты человека от вредных факторов загрязнений окружающей среды очевидна, потому что по оценкам медиков вклад влияния окружающей среды в заболеваемость неуклонно растёт, а в крупных городах, по некоторым мнениям, достигает 40%. Сложившаяся ситуация требует незамедлительных мер. Со стороны медицины должны приниматься меры, разрабатываться препараты, придающие и усиливающие сопротивляемость организма человека в техногенном мире. Одним из перспективных путей при разработке новых лекарственных средств является поиск новых биологически активных соединений среди природных объектов. Применяемые в настоящее время синтетические лекарственные средства способны подавлять развитие заболевания, но их применение нередко приводит к развитию целого ряда побочных эффектов. В связи с этим для лечения ряда заболеваний предпочтительно использование лекарственных растений и препаратов, полученных на их основе.

В условиях роста антибиотикорезистент-ности среди различных патогенов, остро стоит вопрос поиска новых эффективных антимикробных средств. Фитотерапии с ее более мягким физиологичным безопасным действием на организм в некоторых случаях может быть отдано предпочтение перед химиотерапией. поэтому изыскание новых антибактериальных средств растительного происхождения является одной из актуальных задач фармации. В литературе имеются сведения о многогранном действии бархатцев распростертых (мочегонном, желчегонном, потогонном, противоглистном, противовоспалительном, сосудоукрепляющем, тонизирующем, ранозаживляющем, улучшающем обмен веществ, сахароснижающем, гипотензивном, успокаивающем). В народной медицине цветки бархатцев применяют при рожистых воспалениях кожи, настой бархатцев используют в качестве диуретических, потогонных, антигельминтных средств. Флавоноиды из Tagetes patula снижают проницаемость капилляров и оказывают специфическое действие на сетчатку глаза [1, 5]. В литературе имеются данные о наличии у T. patula (бархатцы распростёртые) гепатопротективных свойств [4]. Для некоторых препаратов из бархатцев выявлена противовирусная, антистафи-лококковая, противогрибковая активность.

Цель работы: изучение химического состава бархатцев распростертых цветков сухого экстракта и антибактериальной активности этого экстракта.

Материалы и методика . Сухой экстракт из Tagetes patula L. высушенных цветков получали путем экстракции спиртом этиловым 70% при трехкратном кипении в течение 1 часа и соотношении сырьё-экстрагент 1:5. Выделение целевого продукта осуществляли последующим удалением растворителя в вакууме и сушкой образовавшегося порошка [2]. Для более детального изучения фенольного состава полученного экстракта использовали метод ВЭЖХ. Согласно методике исследования готовили раствор сухого экстракта в спирте этиловом 70% и далее подвергали детектированию. Количественное соотношение полифенольных соединений проводили методом внутреннего нормирования пиков по сопоставлению площади пика и времени удерживания со стандартными растворами.

Антибактериальное действие сухого экстракта определяли методом серийных разведений [3] в питательном агаре. Антибактериальное действие изучали по отношению к 12 тест-культурам путем посева 100-миллионных взвесей суточных культур на сектора чашек Петри с питательным агаром, содержащим экстракт в концентрациях от 5000 до 312 мкг в 1 мл питательного агара. Контролями служили посевы тех же тест-культур на сектора чашки Петри с питательным агаром (КГ1А) и чашки с питательным агаром, содержащим максимальную концентрацию растворителя (КР). В качестве тест-культур использованы штаммы стафилококков (№ 1, 2, 3, 4), энтеробактерий (№ 5, 6, 7, 8, 9) и бацилл (№ 10, 11, 12): 1 – Staphylococcus aureus 209-Р; 2 – Staphylococcus aureus (Макаров); 3 -

Staphylococus aureus «Туре»; 4 – Staphylococcus epidermidis Wood-46; 5 – Escherichia coll 675; 6 – Escherichia coli 0-55; 7 – Salmonella typhimurium; 8 - Shigella flexneri 266; 9 - Shigella sonnei 639; 10 – Bacillus suhtilis L 7 ; 11 – Bacillus anthracoides 96; 12 – Bacillus anthracoides-1.

Результаты и обсуждение. Фитохимиче-ское изучение сухого экстракта цветков бархатцев выявило 17 веществ, из которых идентифицировано 12 соединений фенольной природы. Они представлены главным образом флавоноидами, кумаринами и фенолкарбоновыми кислотами. Результаты анализа представлены в таблице 1.

Таблица 1. Фенольные соединения сухого экстракта Tagetes patula L.

Установлено, что из фенольных веществ в наибольшем количестве содержатся фенолкарбоновые кислоты – галловая, хлорогеновая и феруловая; из флавоноидных соединений – рутин, робинин, дигидрокверцетин и гиперозид. Также установлено наличие одного вещества кумариновой природы – дигидрокумарина. В то же время хроматографическими исследованиями установлено достаточно высокое содержание патулетина и патулитрина. Данные по антибактериальному действию цветков бархатцев распростертых сухого экстракта представлены в таблице 2.

Результаты исследования свидетельствуют о наличии антибактериальной активности у сухого экстракта. Он оказывает выраженное бактерицидное действие на кокковую флору, спорообразующую, Salmonella gallinarum и Pseudomonas aeruginosa, а также бактеростатическое действие в отношении Escherichia coli. Минимальная ингибирующая концентрация экстракта для стафилококков составила 625-1250 мкг/мл; для возбудителей бактериальной дизентерии-625-1250 мкг/мл и для бацилл – 1250 мкг/мл.

Выявленная антимикробная активность объясняется наличием в экстракте фенолкарбоновых кислот и, прежде всего, галловой, которая считается природным антибиотиком.

Таблица 2. Антибактериальное действие сухого экстракта из цветков бархатцев распростёртых

Условные обозначения: + - рост тест-культуры (нет антимикробного действия); -— нет роста (бактерицидное действие); ± - торможение роста (бактериостатическое действие)

Выводы: проведенные исследования выявили высокое содержание флавоноидов, выраженную антибактериальную активность цветков бархатцев распростертых. Вероятно, высокое содержание флавоноидов и определяет выраженные антибактериальные свойства цветков Tagetes patula L. Результаты эксперимента позволяют сделать вывод о перспективности данного сырья для получения эффективных средств, обладающих высокой противомикробной активностью.