Экспериментальное обоснование гепатопротекторного средства из травы кориандра посевного

Бесплатный доступ

Изучено гепатопротекторное действие водного извлечения из травы кориандра посевного в опытах на крысах с четыреххлористым гепатозом и алкогольным поражением печени. В качестве объекта сравнения использовано аналогичное извлечение из кукурузных столбиков с рыльцами. Проведено сравнительное изучение влияния курсового введения извлечений в дозе 150 мг/кг на микроморфологическую картину печени и биохимические показатели функционального состояния печени у крыс с четыреххлористым и алкогольным гепатозом. Установлена способность водного извлечения из травы кориандра посевного существенно задерживать развитие цитолиза, холестаза, нарушений жирового и белкового обменов при поражении печени, а также антиоксидантная и анаболическая активность водного извлечения.

Еще

Кориандр посевной, кукурузные столбики с рыльцами, водное извлечение, гепатоз

Короткий адрес: https://sciup.org/148101900

IDR: 148101900

Текст научной статьи Экспериментальное обоснование гепатопротекторного средства из травы кориандра посевного

Использование гепатопротекторов растительного происхождения обусловлено их сравнительно высокой биологической активностью и относительной безвредностью [2]. Лечебный эффект этих средств преимущественно связан с содержащимися в них фенольными соединениями, обладающими разносторонней биологической активностью, в том числе антиоксидантным, мембраностабилизирующим, антитоксическим и репаративным действием. Наличие в траве кориандра посевного флавоноидов, кумаринов, фенолкарбоновых кислот, микроэлементов и других биологически активных веществ [5] позволяет считать перспективным создание на основе извлечений из травы этого растения нового эффективного гепатопротекторного препарата.

Цель исследования: экспериментально обосновать применение при токсическом гепато-зе извлечений из травы кориандра посевного.

Материал и методы исследования. Водные извлечения из травы кориандра посевного получены согласно фармакопее ХI. В состав веществ извлечения входят флавоноидные соединения (апигенин, лютеолин, кверцетин и др.), кумарины, фенолкарбоновые кислоты, органические кислоты, витамины и другие биологически активные вещества [5].В качестве препарата

сравнения использовались водные экстракты из кукурузных столбиков с рыльцами.

Суммарный комплекс веществ извлечений вводили животным в течение двух недель перорально с помощью металлического зонда в объеме 1 мл водного раствора на 100 г массы тела, что соответствовало 150 мг/кг в пересчете на сухой остаток. Эта доза экстрактов была выбрана на основе результатов анализа его токсических свойств путем определения на интактных крысах острой токсичности по Керберу [1] и гепатотоксичности по В.В. Гацура [3] с учетом рекомендаций фармакологического комитета по изучению общетоксического действия фармакологических средств [6]. Токсическая гепатопатия воспроизводилась с помощью четыреххлористого углерода [7] или спирта этилового [8]. В первом случае с этой целью на второй неделе применения извлечений (в контрольных опытах дистиллированной воды) троекратно через день перорально металлическим зондом крысе вводили 50% раствор четыреххлористого углерода (СCl 4 ) в вазелиновом масле по 0,3 мл на 100 г массы животного. С целью развития алкогольной гепатопатии животным с конца первой недели опытов в течение 7 дней внутрибрюшинно вводили 33% раствор этанола из расчета 0,75 мл на 100 г массы тела [8]. По завершению введения извлечений животных декапитировали под легким эфирным наркозом и забирали для исследования кровь и печень. Часть печени помещали в 5% раствор формалина. Срезы ткани печени готовили обще-

Известия Самарского научного центра Российской академии наук, том 16, №5(2), 2014

принятым методом заливки в парафиновые блоки, окраску проводили гематоксилин-эозином. Изучение гистологических срезов проводили с использованием светового микроскопа ЛОМО при увеличениях х160 в проходящем свете. Снимки срезов производили на компьютеризированном микроскопе. Для морфометрических измерений использовали компьютерную программу для анализа изображений Image J 1.4. В сыворотке крови определяли содержание альбуминов, общего холестерина, общего билирубина, общего белка, триглицеридов с помощью автоматического биохимического анализатора ВS-

120 (Minzey, Китай) со стандартным набором реактивов (Diasis, Германия). Кроме того, в сыворотке крови определяли активность аланинаминотрансферазы (АлТ), щелочной фосфатазы (ЩФ), содержание ТБК-активных продуктов общепринятыми методами. В печени определяли содержание гликогена по реакции с фенолом после щелочного гидролиза гликогена, содержащегося в определенной навеске печени, и выражали в г/кг. Полученные результаты обрабатывались методом вариационной статистики по t-критерию Стьюдента.

Таблица 1. Влияние курсового ведения извлечений из травы кориандра посевного на биохимические показатели функционального состояния печени крыс с четыреххлористым гепатозом

Гру ппы живот ных

Альбумины крови, г/л

Общий белок крови, г/л

Общий билирубин крови, мкмоль/ л

Общий холестерин, ммоль/л

Триглицериды крови, ммоль/л

АлТ

крови, мккат/л

ЩФ крови, Ед/л

ТБК-

активные продукты плазмы крови, мкмоль/л

Гликоген, г/кг

1 n=9

33,6±1,00

91,5±1,95

5,3±0,22

1,9±0,20

0,8±0,08

0,48±0,15

226,3±22

2,85±0,54

2,94±0,242

2

32,8±0,70

66,6±5,10

34,6±1,26

2,7±0,35

2,0±0,40

0,99±0,035

409,6±60,5

7,84±0,486

1,53±0,069

n=7

Р 1 >0,05

Р 1 <0,01

Р1>0,05

Р 1 <0,05

Р 1 <0,05

Р1<0,02

Р 1 <0,05

Р 1 <0,001

Р1<0,001

3

38,8±1,20

80,8±1,48

23,5±2,53

1,6±0,20

0,5±0,06

0,63±0,06

233,0±28,1

5,83±0,14

5,36±0,580

n=8

Р 1 <0,05

Р 1 <0,01

Р1<0,001

Р 1 >0,05

Р 1 <0,05

Р1>0,05

Р1>0,05

Р 1 <0,001

Р 1 <0,01

Р 2 <0,01

Р 2 <0,05

Р2<0,02

Р 2 <0,05

Р 2 <0,01

Р2<0,01

Р 2 <0,05

Р 2 <0,01

Р 2 <0,001

4

34,0±1,50

84,0±3,07

25,2±2,30

2,3±0,50

0,5±0,10

0,53±0,128

242,5±29,

3,16±0,418

3,34±0,173

n=6

Р 1 >0,05

Р 1 >0,05

Р1<0,001

Р 1 >0,05

Р 1 >0,05

Р 1 >0,05

Р 1 >0,05

Р 1 >0,05

Р 1 >0,05

Р 2 >0,05

Р 2 <0,05

Р2<0,02

Р 2 >0,05

Р 2 <0,02

Р 2 <0,02

Р 2 <0,05

Р 2 <0,001

Р 2 <0,001

Р 3 >0,05

Р 3 >0,05

Р 3 >0,05

Р 3 >0,05

Р 3 <0,05

Р 3 >0,05

Р 3 >0,05

Р 3 <0,001

Р 3 <0,02

Примечание: Здесь и далее – 1 группа – интактные животные; 2 – контрольная (гепатоз + дист. вода); 3 – получавшие водное извлечение кориандра; 4 – получавшие водное извлечение кукурузных столбиков с рыльцами. n – количество опытов; Р1 – вероятность различия к группе интактных животных; Р2 – вероятность различия к контрольной группе животных; Р3 – вероятность различия по отношению к группе животных, получавших водное извлечение из кориандра посевного

Таблица 2. Влияние водного извлечения из травы кориандра посевного на биохимические показатели функционального состояния печени крыс при алкогольном поражении печени

Гру ппы живот ных

Альбумины крови, г/л

Общий белок крови, г/л

Общий билирубин крови, мкмоль/ л

Общий холестерин, ммоль/л

Триглицериды крови, ммоль/л

АлТ

крови, мккат/л

ЩФ крови, Ед/л

ТБК-

активные продукты плазмы крови, мкмоль/л

Гликоген, г/кг

1 n=9

33,6±1,00

91,5±1,95

5,3±0,22

1,9±0,020

0,80±0,08

0,48±0,05

226,3±22,

2,85±0,540

2,94±0,024

2

30,9±0,20

65,7±1,91

14,7±0,46

2,1±0,05

1,01±0,037

0,66±0,015

314,0±12,1

5,44±0,220

2,62±0,0509

n=7

Р 1 <0,05

Р 1 <0,001

Р 1 <0,001

Р 1 <0,05

Р 1 <0,05

Р 1 <0,05

Р 1 <0,05

Р 1 <0,01

Р 1 <0,05

3

31,3±0,06

68,0±1,06

10,5±0,18

1,88±0,04

0,73±0,04

0,59±0,023

264,6±10,6

3,46±0,115

3,45±0,264

n=8

Р 1 <0,05

Р 1 <0,001

Р 1 <0,001

Р 1 >0,05

Р 1 >0,05

Р 1 <0,05

Р 1 >0,05

Р 1 >0,05

Р 1 <0,05

Р 2 >0,05

Р 2 >0,05

Р 2 <0,001

Р 2 <0,05

Р 2 <0,05

Р 2 <0,05

Р 2 <0,05

Р 2 <0,001

Р 2 <0,05

4

33,7±0,50

71,4±0,93

12,0±0,31

1,85±0,08

0,70±0,07

0,65±0,019

270,4±16,2

3,55±0,127

3,15±0,154

n=6

Р 1 >0,05

Р 1 <0,001

Р 1 <0,001

Р 1 >0,05

Р 1 >0,05

Р 1 <0,05

Р 1 >0,05

Р 1 >0,05

Р 1 >0,05

Р 2 <0,001

Р 2 <0,05

Р 2 <0,01

Р 2 <0,05

Р 2 <0,05

Р 2 >0,05

Р 2 >0,05

Р 2 <0,001

Р 2 <0,05

Р 3 <0,001

Р 3 >0,05

Р 3 <0,01

Р 3 >0,05

Р 3 >0,05

Р 3 <0,05

Р 3 >0,05

Р 3 >0,05

Р 3 >0,05

Результаты и их обсуждение. Исследования показали, что изменения биохимических показателей в крови и печени соответствовали динамике микроморфологической картины печени. Уровень гликогена в печени, содержание в крови триглицеридов, холестерина, ТБК-активных продуктов, альбуминов, активность АлТ, ЩФ у животных, получавших извлечение из кориандра, проявили тенденцию к нормализации (табл. 1 и 2). У животных, получавших извлечение из кориандра посевного в эксперименте с четыреххлористым гепатозом, содержание триглицеридов по сравнению с контролем понизилось на 75% (p<0,01), общего билирубина на 32,1% (p<0,02), общего холестерина на 40,8% (p<0,05), ТБК-активных продуктов на 25,7% (p<0,01), снизилась активность АлТ на 36,4% (p<0,01), ЩФ – на 43,2% (p<0,05), тогда как содержание альбуминов увеличилось на 18,3% (p<0,01), общего белка на 21,3% (p<0,05), а в печени повысилось содержание гликогена на 250,3% (p<0,001).

Изменения показателей у животных, получавших водное извлечение из кукурузных столбиков с рыльцами, приближались к таковым у животных, получавших извлечение из кориандра. Однако изменения в содержании гликогена в печени и активность ЩФ характеризовались меньшей степенью нормализации, чем в опытах с извлечением из кориандра. Введение животным при курсовой алкоголизации водного извлечения кориандра посевного способствовало по сравнению с контролем понижению содержания триглицеридов на 27,7% (p<0,05), общего билирубина на 28,6% (p<0,001), общего холестерина на 10,5% (p<0,05), ТБК-активных продуктов на 36,4% (p<0,01), снижению активности АлТ на 10,6% (p<0,05), ЩФ на 15,7% (p<0,05), а также повышению содержания гликогена в печени на 31,6% (p<0,05). Снижение содержания ТБК-активных продуктов под влиянием водного извлечения из кориандра свидетельствует об уменьшении интенсивности процессов свободнорадикального окисления, что может быть связано с антиоксидантным действием фенольных соединений, содержащихся в извлечении [4].

Выводы: динамика гистоморфологиче-ской картины печени и биохимических показателей свидетельствует, что суммарный комплекс веществ водного извлечения из травы кориандра посевного снижает глубину поражения печени при ее токсическом повреждении. Этот эффект по некоторым показателям превышает аналогичное влияние извлечений из кукурузных столбиков с рыльцами. Полученные результаты экспериментальных исследований свидетельствуют о целесообразности использования извлечений из травы кориандра посевного в качестве гепато-протекторного средства.

Список литературы Экспериментальное обоснование гепатопротекторного средства из травы кориандра посевного

  • Беленький, Л.М. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. -Л.: Гос. изд. мед. литературы, 1963. 324 с.
  • Белоусов, Ю.Б. Фитопрепараты и печень/Ю.Б. Белоусов, К.Г. Гуревич//Фарматека. 2006. №1. С. 85-88.
  • Гацура, В.В. Методы первичного фармакологического исследования биологически активных веществ. -М.: Медицина, 1974. С. 125-126.
  • Ильина, И.Г. Антиоксиданты: фармацевтические и биохимические аспекты применения/И.Г. Ильина, И.П. Рудакова, И.А. Самылина//Фармация. 2013. №8. С. 3-6.
  • Оганесян, Э.Т. Изучение химического состава травы кориандра посевного/Э.Т. Оганесян, З.М. Нерсесян, А.Ю. Пархоменко//Хим-фармац. журнал. 2007. Т. 41, №3. С. 30-34.
  • Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. -М.; 2000. 398 с.
  • Саркисов, Д.С. Воспроизведение болезней человека в эксперименте/Д.С. Саркисов, П.И. Ремизов. -М., 1960. 780 с.
  • Спрыгин, В.Г. Влияние комплексного полифенольного препарата «Калифен» на процессы восстановления биохимических показателей печени после поражения этиловым спиртом/В.Г. Спрыгин, Н.Ф. Кушнерова//Вопр. биол. мед. и фармац. химии. 2002. №4. С. 22-26.
Статья научная