Морфофункциональное и гормональное состояние организма коров при развитии кистозной патологии яичников

Для увеличения продуктивности крупного рогатого скота в молочном животноводстве необходимо уделять особое внимание воспроизводству стада. Одной из значимых проблем остается бесплодие коров, причиной которого нередко становятся кистозные образования яичников [3, 4]. По данным некоторых авторов, кистозные образования яичников может достигать у 15-19% коров в послеотельный период. При этом наиболее подвержены этому заболеванию животные в возрасте 2-5 лактации [5, 6, 7].

В Пермском крае, как и в целом по России, проблема кистозной патологии яичников остается актуальной. Однако, в нашем регионе данных об уровне половых гормонов у коров с нормальным половым циклом и при возникновении кист яичников недостаточно.

Учитывая обозначенные выше проблемы, целью данного исследования стало изучение морфофункциональных и гормональных изменений в организме коров при формировании кистозной патологии яичников на примере одного из сельскохозяйственных предприятий Пермского края.

Условия, материалы и методы. В рамках работы был проведен опыт на коровах чернопестрой породы с средней массой тела 550 кг 1-3 лактации в условиях хозяйства Пермского края. Среднегодовой удой животных составлял порядка 6500 кг. Все коровы содержались в хозяйстве с применением стойловой системы, действующей на протяжении всего года. Рацион животных включал злаковое сено, кукурузный силос, сенаж из смеси злаковых и бобовых культур, концентраты (пшеница и ячмень), подсолнечниковый жмых.

Было проведено обследование 120 голов крупного рогатого скота с проявлением ацик-лии на 45-55 день после отела, а также 20 голов с физиологическим половым циклом. Применяли метод трансректальной пальпации и ультразвукового исследования яичников при помощи аппарата Acuvista VT880b, оснащенного линейным ректальным датчиком с частотой 7,5 МГц. Из этих коров сформировали две группы. В контрольную группу (n=10) вошли клинически здоровые особи с нормальной половой цикличностью, а в опытную – коровы с кистозной патологией яичников и временным бесплодием (n=10).

Забор проб крови осуществляли утром до кормления из хвостовой вены. Гематологические показатели определяли на автоматическом анализаторе VetScan HM5, а биохимические параметры – с помощью прибора StatFax. Уровень прогестерона, эстрадиола-17р, лютеинизирующего (ЛГ) и фолликулостимулирующего (ФСГ) гормонов в сыворотке крови оценивали посредством иммунохемилюминес-центного анализа (ИХЛА) с использованием наборов ООО «Хема».

Полученные данные подвергались обработке с использованием программных пакетов Microsoft OfficeExcel 2003. Данные представлены в виде среднего и стандартной ошибки среднего (M±m). Достоверность определяли с помощью коэффициента Стьюдента. Данные считались достоверными при p<0,005.

Результаты и обсуждение. Проведённый анализ кормового рациона крупного рогатого скота выявил нарушение баланса питательных веществ. Установлено, что содержание крахмала превышает норму в среднем на 12,3%, сырого жира — на 7,2%, фосфора — на 12,1%, магния — на 9,3%, а калия — на 8,4%. Наряду с этим обнаружен дефицит сахара (на 11,9%), поваренной соли (на 15,2%), кальция (на 9,3%), каротина (на 12,7%), а также выражен-но низкий уровень витаминов D и E — на 76,7% и 23,1% соответственно. Нехватка этих компонентов может привести к снижению иммунитета, ухудшению состояния здоровья, репродуктивной функции и продуктивности.

Проведённый анализ гематологических показателей крови у коров из контрольной и опытной групп продемонстрировал, что значения параметров в целом соответствовали физиологическим нормам (табл. 1).

В то же время, у животных опытной группы наблюдался умеренно низкий уровень гемоглобина в среднем на 6%, гематокритного значения — на 5%, а также показателей среднего объёма эритроцита (MCV) и среднего содержания гемоглобина в эритроците (MCH) — на 3%, по сравнению с аналогичными показателями у коров контрольной группы. Отмечено, что у обеих групп среднее содержание гемоглобина в эритроците оказалось ниже референсных значений на 8–9%, что, вероятно, указывает на возможный дефицит витаминов и микроэлементов в рационе животных. В то же время, лейкоцитарная формула у всех обследованных животных соответствовала референтным значениям и не имела статистически значимых отличий у коров обеих групп.

Таблица 1 – Гематологические показатели крови коров

Показатель	Контрольная группа	Опытная группа	Референтные значения
Эритроциты, х 1012/л	6,4±0,2	6,1±0,2	5,0-10,0
Гемоглобин, г/л	91,2±2,6	85,7±2,2	80,0-150,0
Гематокрит, %	34,2±0,9	32,4±0,1	24,0-46,0
MCV, fl	53,7±1,1	53,0±0,9	40-60
MCH, pg	14,2±0,3	14,1±0,2	11,0-17,0
MCHC, г/л	265,2±1,1	264,3±1,1	290,0-360,0
RDWc, %	19,2±0,5	19,3±0,3
RDWs, fl	40,4±1,3	39,9±0,6
Лейкоциты, х 109/л	6,7±0,6	6,2±0,3	4,0-12,0
Базофилы, %	1,0±0,2	0,1±0,1*	0,0-2,0
Эозинофилы, %	3,4±0,7	4,3±0,5*	1,0-8,0
Нейтрофилы, %	30,1±3,7	28,8±2,1	15,0-45,0
Моноциты, %	4,0±0,5	4,5±0,4	2,0-9,0
Лимфоциты, %	61,6±3,2	61,4±1,9	45,0-75,0
Тромбоциты, х 109/л	284,2±59,2	228,7±33,3	100,0-800,0
MPV, fl	7,1±0,2	7,4±0,2	6,0-9,0
PCT, %	0,2±0,0	0,2±0,1	0,1-0,4
PDWc, %	32,4±1,0	31,9±0,6
PDWs, fl	9,4±0,7	9,1±0,4

Примечание: * - p<0,05

При анализе биохимических показателей крови у коров контрольной группы установлено, что все исследованные параметры находились в пределах физиологической нормы (табл. 2). В отличие от них, у животных опытной группы наблюдалось снижение концентрации общего белка в сыворотке крови в среднем на 9%, уровня креатинина — на 18%, мочевины — на 7%, а общего кальция — на 16% по сравнению с нормативными значениями. Одновременно было зафиксировано увеличение содержания глюкозы на 25% и неорганического фосфора — на 6% по отношению к физиологическим показателям.

Выявленные отклонения от референтных значений указывают на нарушение белкового, углеводного и минерального обмена, что, вероятно, связано с несбалансированным рационом кормления у лактирующих коров исследуемой группы.

В ходе трансректального и ультразвукового исследований у коров опытной группы были выявлены два морфотипа кистозной патологии яичников: фолликулярные и лютеиновые кисты, отличающиеся по своим характеристикам. При проведении ультразвукового исследования средний диаметр фолликулярных кист составил 30,7±3,04 мм, а толщина стенки не превышала 3,0±0,5 мм, лютеиновых кист – 35,08±2,21 мм и 5,07±0,48 мм соответственно.

Таблица 2 – Биохимические показатели сыворотки крови коров

Показатель	Контрольная группа	Опытная группа	Референтные значения
Общий белок, г/л	70,74±1,04	65,75±1,44*	72,00-86,00
Альбумин, г/л	32,05±1,11	31,52±1,04	29,00-38,00
Глобулин, г/л	34,69±1,02	34,23±1,37	25,00-41,00
Глюкоза, ммоль/л	3,37±1,01	4,15±0,09	2,22-3,33
АЛТ, Ед/л	24,22±1,02	27,99±0,81**	1,30-60,00
АСТ, Ед/л	51,72±0,97	56,68±1,39**	11,00-160,00
Билирубин общий, мкмоль/л	3,33±0,50	3,73±0,45	0,20-5,10
Мочевина, ммоль/л	3,32±0,26	3,11±0,39	3,34-6,68
Креатинин, мкмоль/л	84,34±0,69	71,96±1,24**	88,00-162,00
Триглицериды, ммоль/л	0,30±0,01	0,31±0,02	0,20-0,60
Щелочная фосфатаза, Ед/л	52,71±0,68	53,67±1,73*	20,00-164,00
Щелочной резерв, об%СО2	49,07±1,00	51,49±0,27	46,00-66,00
Общий кальций, ммоль/л	2,53±0,09	2,11±0,06**	2,50-3,12
Неорганический фосфор, ммоль/л	1,97±0,05	2,06±0,04	1,45-1,94

Примечание: * - p<0,05, ** - p<0,01.

Данные о концентрации гормонов в крови коров с кистозной патологией, значительно разнятся. Согласно исследованию В.А. Анзорова [8] у животных с фолликулярным типом кист уровень ФСГ колебался в пределах 0,25– 0,35 нг/мл, а концентрация ЛГ находилась в пределах от 0,86 до 1,33 нг/мл. При этом содержание эстрадиола-17в оставалось стабильно высоким и достигало 6,95–10,10 пг/мл, что превышало физиологические значения в 1,7 раза. В то же время уровень прогестерона не изменялся и находился в диапазоне 0,2– 0,34 нг/мл.

A.V. Lysenko и ряд других авторов [10, 11] обнаружили, что у коров с кистами уровень ЛГ повышен, а ФСГ снижен или в норме. Возможно, различия в показателях объясняются особенностями методики измерения концентрации гормонов.

С учетом различий в опубликованных данных по содержанию половых гормонов у лак-тирующих коров, нами были определены ориентировочные средние показатели гормонального профиля у животных с физиологически нормальным репродуктивным циклом. Установлено, что концентрация прогестерона в сыворотке крови варьировала в пределах 0,20– 1,50 нг/мл, эстрадиола-17в — от 1,84 до 4,01 пг/мл, лютеинизирующего гормона — от

14,30 до 24,2 мЕ/мл, фолликулостимулирующего гормона — от 5,40 до 15,6 мЕ/мл.

Кроме того, отмечено повышение уровня прогестерона в сыворотке крови коров в период с 11-го по 18-й день полового цикла до 2,12±0,06 нг/мл (табл. 3), что было связано с формированием желтого тела. Уровень эстрадиола-17в в сыворотке крови демонстрировал иную динамику: концентрация этого гормона росла постепенно. Пик концентрации этого гормона (3,73±0,24 пг/мл) у животных приходился на 19-21-й день цикла. При этом соотношение этих гормонов колебалось от 0,43 до 0,80 в зависимости от стадии цикла.

Известно, что фолликулостимулирующий и лютеинизирующий гормоны являются гормонами передней доли гипофиза, которые контролируют рост фолликулов, овуляцию, формирование желтого тела, секрецию прогестерона и эстрогенов [8, 9]. В рамках нашего исследования было выявлено, что у коров контрольной группы уровень ЛГ повышался в период с 6-го по 10-й день и составил 18,0±0,70 мЕ/мл, тогда как концентрация ФСГ демонстрировала увеличение в промежутке между 6-10-м и 19-21-м днями цикла (10,6±0,90 и 10,78±0,24 мЕ/мл соответственно).

Таблица 3 - Уровень гормонов у коров контрольной и опытной групп

Показатель		Прогестерон, нг/мл	Эстрадиол, пг/мл	ФСГ, мЕ/мл	ЛГ, мЕ/мл
3 то о	1-2 день	1,03±0,01	1,84±0,21	17,6±0,23	21,35±0,30
	3-5 день	1,21±0,06	2,27±0,12	13,9±0,21	4,73±0,85
	6-10 день	1,45±0,02	2,47±0,50	10,6±0,90	18,0±0,70
	11-12 день	1,91±0,03	2,39±0,13	3,00±0,11	6,40±0,07
	13-18 день	2,12±0,06	3,17±0,18	9,00±0,09	5,40±0,15
	19-21 день	1,61±0,06	3,73±0,24	10,78±0,24	10,43±0,17
й сб И к О	Фолликулярные кисты	0,66±0,11	1,89±0,32	8,26±0,47	9,36±0,75
	Лютеиновые ки сты	2,02±0,42	2,01±0,41	15,41±0,61	25,88±0,46

У коров с лютеиновыми кистами концентрация прогестерона была в среднем в три раза выше, чем у животных с фолликулярными кистами, достигая уровня, характерного для контрольной группы. В то же время при наличии фолликулярных кист уровень эстра-диола-17в в сыворотке крови снижался на примерно 6% по сравнению с его показателями у коров с лютеиновыми кистами.

При этом концентрация этого гормона у коров с лютеиновыми кистами не превышала максимальные значения, зарегистрированные у нормально циркулирующих животных. Также отмечено уменьшение соотношения прогестерона к эстрадиолу у животных с фолликулярными кистами до 0,35, а при формировании лютеиновых кист этот коэффициент возрастал до 1,0.

Исследование уровня гипофизарных гормонов показало, что у коров с фолликулярными кистами концентрация лютеинизирующего и фолликулостимулирующего гормонов в крови была в 2,7 и 1,9 раза ниже соответственно, чем у животных с лютеиновыми кистами. У последних уровень ЛГ оказался выше максимальных значений, наблюдаемых в контрольной группе. В свою очередь, у коров с фолликулярными кистами концентрация ЛГ оставалась в пределах физиологической нормы, характерной для животных с регулярным половым циклом.

Что касается фолликулостимулирующего гормона, то у животных обеих опытных групп его уровень не отличался статистически от показателей, зарегистрированных у контрольных особей.

Полученные нами данные о гормональном статусе коров с кистозными образованиями яичников совпадают с результатами, представленными в работах Е. У. Байтлесов, В. А. Анзорова, Г. П. Дюльгера [6, 8, 11] и других исследователей [13, 14]. Они также указывают на то, что у коров с фолликулярными кистами концентрация прогестерона не превосходит 1 нг/мл, тогда как у животных с лютеиновыми кистами этот показатель превышает данный порог.

Формирование фолликулярных кист у животных опытной группы было связано с недостаточным количеством ЛГ в крови животных и, как следствием, отсутствии овуляции. При избытке ЛГ происходила частичная лютеинизация фолликула с образованием, в последующем, лютеиновой кисты.

Выводы. Наши результаты свидетельствуют о существенном влиянии дисбаланса рациона на морфофункциональное и гормональное состояние коров, страдающих от кистозной патологии яичников. Повышение уровней прогестерона до 2,02 нг/мл, ФСГ до 15,41 мЕ/ мл и ЛГ до 25,88 мЕ/мл в сыворотке крови способствовало образованию лютеиновых кист. В свою очередь, у животных с фолликулярными кистами концентрация прогестерона составила в среднем 0,66±0,11 нг/мл. Уровень эстрадиола-17в у этих коров был снижен на 6 %, а концентрации ЛГ и ФСГ — в 2,7 и 1,9 раза соответственно ниже, чем у коров с лютеиновыми кистами.

У коров с нормальным половым циклом, содержащихся в исследуемом хозяйстве, концентрация прогестерона варьировала от 0,20 до 1,50 нг/мл, эстрадиола-17в — от 1,84 до 4,01 пг/мл, ЛГ — от 14,30 до 24,2 мЕ/мл, а ФСГ — от 5,40 до 15,6 мЕ/мл.

Добавление сбалансированных премиксов и витаминно-минеральных добавок в рацион животных может улучшить обменные процессы и нормализовать гормональный фон, что положительно скажется на репродуктивной функции и воспроизводительных качествах коров.