Особенности процессов апоптоза иммунокомпетентных клеток крови у жителей Архангельской области и Ненецкого автономного округа

Репина Вероника Павловна, кандидат биологических наук, научный сотрудник

Полетаева Анна Васильевна, аспирантка

Добродеева Лилия Константиновна, доктор медицинских наук, профессор высоких концентрациях IgA и активизации лимфопролиферативных процессов [2]. Однако данных по апоптозу иммунокомпетентных клеток крови у жителей Заполярья фактически нет. Известно только, что под влиянием высоких уровней кортизола снижается содержание CD 16 и CD95 и повышаются концентрации провоспалительных цитокинов IL-1, TNF-a, IFN-y [1].

Материалы и методы. Проведено обследование 115 человек в возрасте от 25 до 60 лет, родившихся и проживающих на территории НАО. В качестве группы сравнения обследовано 100 практически здоровых человек, родившихся и проживающих на территории Архангельской области. Забор крови производился в утренние часы натощак. В мазках крови окрашенных по Романовскому-Гимзе определяли моноцитограмму, лимфоцитограмму и нейтрограмму по Григоровой О.П., 1958. Для характеристики апоптоза моноцитов подсчитывали процент полиморфноядерных клеток, лимфоцитов - процент крупных клеток, нейтрофилов - процент клеток с пятью и более сегментами ядра. Определение концентрации цитокинов IL-6, IL-10 и TNFa в сыворотке крови проводили с помощью иммунофермент-ного анализатора «Evolis» («Seramun Diagnos-tica», Германия). Содержание фенотипов лимфоцитов определяли методом двойной пероксидазной метки с использованием моноклональных антител (НПЦ «МедБиоСпектр», Россия). Результаты исследования обработаны с использованием пакета прикладных программ «SPSS 11.5» (США). Тип исследования ретроспективный, выборки случайные, одномоментные. Генеральная совокупность - жители Севера Европейской территории России. Проведено определение границ нормального распределения количественных показателей при помощи критерия Шапиро-Уилка. Достоверность различий между группами оценивали с помощью параметрического t-критерия Стьюдента для независимых выборок и непараметрического критерия Уилкоксона.

Результаты исследования и обсуждение. Для иммунного статуса обследованных коренных жителей Заполярья характерно увеличение общего содержания лейкоцитов по сравнению с лицами, проживающими в более благоприятных климатических условиях Архангельской области (с 5,39+0,26 до 6,71+0,19Ч10⁹ кл/л, р=0,01). Моноцитограмма отражает активизацию процессов апоптоза моноцитов

(рис. 1) с увеличением удельного веса полиморфноядерных клеток до 35,48+0,99% (против 29,45+1,12%).

Подобное усиление активности апоптоза выявлено относительно лимфоцитов (рис. 2): нарастает содержание больших лимфоцитов с 10,41+0,65 до 15,99+0,76%. Отмечается увеличение количества людей с избыточной концентрацией больших лимфоцитов до 56,95+0,49%.

Обратная картина наблюдается в составе нейтрограммы, где уменьшается процент клеток с пятью и более сегментами ядра с 6,02+0,22 до 4,32+0,31% (рис. 3).

Рис. 1. Моноцитограмма периферической крови у жителей Архангельской области и Ненецкого автономного округа

Примечание: по горизонтали - этапы развития моноцита; по вертикали - концентрация клеток в %; *p<0.01,

**p<0.001 по отношению к жителям Архангельской области

Рис. 2. Лимфоцитограмма периферической крови у жителей Архангельской области и Ненецкого автономного округа

Примечание: по горизонтали - этапы развития лимфоцита; по вертикали - концентрация клеток в %; *p<0.001 по отношению к жителям Архангельской области

Рис. 3. Нейтрограмма периферической крови у жителей Архангельской области и Ненецкого автономного округа

Примечание: по горизонтали - число сегментов ядра; по вертикали - концентрация клеток в %; *p<0.01 по отношению к жителям Архангельской области

Уровни апоптоза лимфоцитов по содержанию CD95+ имеют тенденцию к повышению с 0,48+0,02 до 0,59+0,03Ч109кл/л (рис. 4), однако все же остаются ниже показателей у жителей более благоприятных климатических зон. На этом фоне в 1,75 раза увеличивается лимфопролиферация по содержанию CD10+ (с 0,37+0,02 до 0,65+0,044109кл/л) и концентрация активированных форм лимфоцитов

CD25+, CD71+, HLADR+ (р=0,01). Возможно, лимфопролиферативные процессы обусловлены тем, что хроническое облучение малыми дозами укорачивает жизненный цикл лимфоцитов и в значительной степени меняет рециркуляцию лимфоцитов в периферических лимфоидных органах [1]. В соответствии с активизацией лимфопролиферации повышается и уровень апоптоза лимфоцитов.

Рис. 4. Содержание фенотипов лимфоцитов в периферической крови у жителей Архангельской области и Ненецкого автономного округа

Примечание: по горизонтали - фенотипы лимфоцитов; по вертикали - концентрация лимфоцитов в кл/л;

*p<0.001 по отношению к жителям Архангельской области

Выявлено снижение содержания провоспа-лительных цитокинов в периферической крови у коренных жителей НАО по сравнению с таковым у лиц, проживающих в Архангельской области. Концентрации IL-6 ниже в 2,4 раза с 24,901+2,65 до 10,51+1,41 пг/мл, TNF a - в 1,8 раза с 15,32+1,68 до 8,52+0,81 пг/мл (р=0,001).

Концентрации IL-10 у ненцев также ниже по сравнению с таковой у жителей Архангельской области (3,29+0,48 и 5,24+0,46 пг/мл). Можно предположить, что апоптоз лимфоцитов происходит не по механизму, вызванному лигандом FAS (APO-1) и фактором некроза опухолей (TNF a ), а по альтернативному пути [5].

Итак, установлены противоположные реактивные сдвиги уровней пролиферации и апоптоза лимфоцитов и моноцитов, с одной стороны, и нейтрофилов, с другой. Снижение активности апоптоза нейтрофильных гранулоцитов у коренных жителей Заполярья объясняется низким уровнем пролиферации этих клеток: ниже содержание палочкоядерных и сегментоядерных форм. Более высокое содержание лейкоцитов в крови у жителей Заполярья обусловливается повышением содержания лимфоцитов. Повышение концентрации лимфоцитов происходит на фоне лимфопролиферации; одновременно увеличивается активность апоптоза лимфоцитов, в качестве регуляторного механизма сохранения гомеостаза. Подобная закономерность регистрируется и жителей Заполярья, и у населения более благоприятных климатических зон Севера. Однако у жителей Заполярья указанные реакции более резко выражены. Увеличение концентрация больших лимфоцитов и лимфоцитов фенотипа CD95+ при значительном снижении содержания TNFa может свидетельствовать об активизации апоптоз-индуцирующих систем транскрипционных факторов АР-1 и NF-kB, Rel. Таким образом, синхронное изменение активности пролиферации и апоптоза лейкоцитов регулирует адаптивный состав циркулирующего пула клеток крови.