Применение и методы оценки качества гомеопатической матричной настойки кактус

Cactus grandiflorus L. using in homeopathic practice as carditonical remedy. Phytochemical studing of blossoming stalk herb showed that the main groops of the biologically active substances are aminogacid. The qualitative and quantative aminoacid contens of the Cactus grandiflorus L. can be used for standardization of the matrix tincture Cactus.

Кактус крупноцветковый - Selenicereus grandifloras (L) Britten et Rose (синоним Cactus grandiflorus L.) семейство кактусовые - Cactaceae широко используется в гомеопатической практике в виде монокомпонентных препаратов. Начиная с XVIII в. это растение применялось при болезнях сердца наряду с наперстянкой и строфантом. В гомеопатическую практику оно было введено доктором Робини в середине ХГХ в. и с тех пор настойка гомеопатическая матричная (НГМ) Кактус, а также лекарственные средства на ее основе включаются в различные гомеопатические фармакопеи и справочники [1,4,5]. Кактус крупноцветковый произрастает в Центральной Америке, в других странах выращивается в теплицах. Для получения гомеопатической матричной настойки используются молодые, собранные в июле стебли и цветы этого растения. Действующие вещества кактуса крупно цветкового мало исследованы, имеются лишь единичные сведения о наличии в нем гликозида кактина, смол и алкалоида неустановленного строения.

В гомеопатической практике НГМ Кактус используется в виде различных разведений (D3, D6, D12, D30, D200 и др.), а также комплексных препаратов, назначаемых при слабости сердечной мышцы, неврозах сердца, стенокардии, а также нарушениях деятельности органов пищеварения, дыхательной и мочеполовой системы [2,3,6].

Целью настоящего исследования явилось изучение компонентного состава комплекса биологически активных веществ (БАВ) НГМ Кактус и их количественного содержания. В связи с отсутствием в литературе сведений об аминокислотном составе кактуса и учитывая важность этой группы БАВ, мы провели исследование качественного и количественного содержания аминокислот в НГМ Кактус.

Исследование состав свободных аминокислот проводили методом хроматографии в тонком слое сорбента (ТСХ) на пластинках «Сорбфил». В качестве подвижной фазы использована смесь растворителей н-бутанол-ледяная уксусная кислота-вода в соотношении 80:20:20.

Методика эксперимента: на стартовую линию, отстоящую на 1 см от края хроматографической пластинки «Сорбфил ПТСХ-ПА» размером 15 х 20 см, наносили 25 мкл НГМ Кактус в виде полосы длиной 1 см и по 5 мкл растворов стандартных образцов аминокислот глицина, глютаминовой кислоты, метионина, триптофана также в виде полосы длиной 1 см. Пластинку помещали в хроматографическую камеру, предварительно насыщенную в течение 2 ч смесью растворителей, и хроматографировали восходящим способом. Длина пробега составила 15 см. Затем пластинку вынимали из камеры, оставляли на воздухе до удаления запаха растворителей и опрыскивали 0,2%-ным спиртовым раствором нингидрина и нагревали в сушильном шкафу при температуре 100-105°С в течение 5 минут. На хроматограмме испытуемого раствора проявлялось 3 зоны адсорбции с R_f около 0,18 темно-желтого цвета, соответствующая аналогичной зоне адсорбции глицина, с Rf около 0,51 красного цвета - метионину, с R_f около 0,55 красного цвета - триптофану (рис. 1).

Рис. 1. Хроматограмма аминокислот НГМ Кактус

1 - РСО глицина; 2 - РСО глютаминовой кислоты; 3 - РСО метионина; 4 - РСО триптофана; 5 - НГМ Кактус

Примечание. I. Приготовление растворов рабочих стандартных образцов (РСО) аминокислот : 0,05 (точные массы) соответствующих аминокислот помещали в мерные колбы вместимостью 100 мл, прибавляли 50 мл воды очищенной, перемешивали до растворения в ультразвуковой бане при температуре (5О±5) °C и доводили объем раствора до метки тем же растворителем.

• 2.    Приготовление 0,2 % раствора нингидрина . В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 1,0 г нингидрина, 2,5 г ацетата кадмия, 10 мл уксусной кислоты ледяной растворяют и объем раствора доводят до метки 96 %-ным спиртом этиловым.

В результате проведенного исследования в НГМ идентифицированы свободные аминокислоты, такие как глицин, метионин, триптофан.

Для оценки содержания аминокислот в НГМ Кактус нами разработана методика количественного определения суммы аминокислот в пересчете на кислоту глютаминовую. Данный метод основан на измерении оптической плотности окрашенного комплекса, образующегося в результате взаимодействия аминокислот с раствором нингидрина. Нами изучены спектры поглощения комплекса кислоты глютаминовой и НГМ Кактус. Исследование проводили на спектрофотометре Гелиос (США). В результате установлено, что комплекс кислоты глютаминовой имеет максимум поглощения при длине волны 566±2 нм, а комплекс аминокислот НГМ -562,5±2нм (рис. 2). Таким образом, нами предложено использовать в качестве аналитической длину волны 564±2 нм и проводить количественное определение суммы аминокислот в пересчете на кислоту глютаминовую.

Методика анализа: 5 мл НГМ Кактус помещали в мерную колбу вместимостью 50 мл прибавляли 1 мл 0,25%-ного раствора натрия карбоната. 2 мл спиртового раствора нингидрина и нагревали 10 минут на кипящей водяной бане. После охлаждения раствор доводили водой до метки. Параллельно в мерную колбу вместимостью 50 мл помещали 2 мл раствора РСО кислоты глютаминовой и далее поступали, как указано выше. Оптическую плотность полученных растворов измеряли на спектрофотометре при длине волны 564 нм в кювете с толщиной слоя жидкости 10 мм, используя в качестве раствора сравнения воду очищенную. Содержание суммы аминокислот в НГМ Кактус в % (X) в пересчете на кислоту глютаминовую вычисляют по формуле:

X = D* M-50-2 - 100 ,

Р-5 - 100-50

где D* - оптическая плотность испытуемого раствора; D - оптическая плотность РСО глютаминовой кислоты; М -масса РСО глютаминовой кислоты, г.

Рис. 2. Спектр поглощения комплекса аминокислот НГМ Кактус с нингидрином