Влияние генотипа и регуляторов роста на эффективность индукции каллусогенеза и регенерации в культуре пыльников риса in vitro

Актуальность. Биотехнологический метод культуры пыльников позволяет за короткое время получать чистые линии и тем самым сокращать селекционный период. Реакция гибридов риса Oryza sativa L. на культуру пыльников генетически детерминирована и различается на разных этапах культивирования in vitro. Регуляторы роста ауксины и цитокинины являются факторами, индуцирующими соматический эмбриогенез. В связи с этим, наряду с подбором отзывчивых на культуру in vitro генотипов в индукционных средах необходимо использовать регуляторы роста растений, которые повышают индукцию эмбриоидогенеза и регенерацию растений при культивировании пыльников риса. Цель исследования. Изучение влияние генотипа, регуляторов роста растений и дополнительного стимулятора нитрата серебра на индукцию каллусогенеза, эмбриоидогенеза и регенерацию зелёных растений в культуре пыльников in vitro гибридов риса и оптимизация их концентраций применительно к изучаемым генотипам. Материал и методика. Исследования проводили в лаборатории биотехнологии и молекулярной биологии ФГБНУ «ФНЦ риса» по общепринятой методике in vitro Бутенко Р.Г. (1990). Материалом для исследования послужили гибриды риса F1-3 поколений. Результаты исследований. Выявлено положительное влияние регуляторов роста растений 6-бензиламинопурина, α-нафтилуксусной кислоты, абсцизовой кислоты и дополнительного стимулятора нитрата серебра в индукции каллусной ткани и последующей регенерации для гибридов риса F1-3 поколений. Показано, что регуляторы роста всегда следует рассматривать во взаимосвязи с генотипом и в диапазоне концентраций 6-БАП – 2,0 и 4,0 мг/л; α-НУК – 1,0-2,0 мг/л; АБК – 1,0 и 2,0 мг/л и AgNO3 – 2,0 и 4,0 мг/л. Заключение. Для ускоренного создания гомозиготных селекционных ресурсов риса посредством гаметных технологий подобраны эффективные концентрации ауксинов, цитокининов и дополнительного стимулятора роста нитрата серебра. У исследуемых образцов по морфологическим признакам выделено 4 типа каллусных тканей. Выделены генотипы F3 Вита/Южная ночь, F3 Славянец/Австрал, F3 Вита/Снежинка как наиболее отзывчивые к культуре пыльников in vitro с формированием эмбриогенных или морфогенных тканей (каллусов), клетки которых обладают способностью к вторичной дифференцировке с возникновением организованных структур de novo, как следствие, с наибольшей степенью регенерации при оптимальных концентрациях используемых регуляторов роста и стимулирующих веществ.