Взаимосвязь гормонального статуса маралов-рогачей и качества полученной спермопродукции в период гона

Введение. Отрасль пантового оленеводства направлена на получение основной продукции – пантов. Для рентабельности производства необходимо стремиться получать панты маралов 1-го сорта с максимальными показателями по массе и качеству консервирования. В маралохозяйст-вах России продолжают содержать маралов рогачей 2-го и 3-го классов с низкой пантовой продуктивностью. Искусственное осеменение маралов как один из методов проведения селекционно-племенной работы, направленной на повышение продуктивности животных, невозможно без создания банка качественной спермопродук-ции, пригодной для оплодотворения. В свою очередь, изучение взаимосвязи гормонального статуса маралов-рогачей с качеством получаемой спермопродукции и классностью самих животных по пантовой продуктивности позволит определить высококлассного донора для участия в искусственном осеменении. Изучением гормонов у пантовых оленей занимались отечественные и зарубежные исследователи: [1–6]. У перечислен- ных исследователей нет данных о взаимосвязи уровня тестостерона с качеством получаемой спермопродукции от маралов-рогачей во время гона.

Цель исследования – изучить гормональный статус маралов-рогачей и качество полученной спермопродукции в период гона.

Задачи : определить уровень тестостерона и кортизола в крови маралов-рогачей в период гона; изучить качество спермопродукции от уровня тестостерона.

Объекты и методы. Работа проведена в филиале «ОС Новоталицкое» ФГБНУ ФАНЦА (Алтайский край) в 2022 г.

Для отбора биопродукции от маралов-рогачей использовали передвижной станок для фиксации марала при взятии спермы. Маралам-рогачам перед взятием спермы вводили в/м Рометар в дозе, регламентированной производителем, затем через 15–20 мин производили фиксацию животных в станке (рис.).

Зафиксированный марал-рогач в станке перед взятием спермы

Перед взятием спермы осуществляли туалет препуция у маралов-рогачей с помощью приготовленного мыльного раствора с фурацилином, затем промывали дистиллированной автоклавированной водой и насухо протирали стерильной белой салфеткой. Получение спермы осуществляли электроэякулятором Волоскова, в прямую кишку маралу-рогачу вводили электрод, смоченный водой, на глубину 22–24 см, затем подавали ток 3–4 раза по 5 с с перерывом в 10 с, при этом напряжение составляло 6–8 В и сопротивление в цепи 1000 Ом. Стимуляцию эякуляции у маралов-рогачей проводили 2 раза с интервалом 7– 10 мин между актами. Полученную сперму собирали в стерильные спермоприемники, затем проводили ее качественную и количественную оценку [7].

Для определения гормонального статуса маралов-рогачей в период гона и прослеживания взаимосвязи качества спермопродукции от уровня тестостерона отбирали 10 маралов-рогачей в период срезки пантов, определяли их классность по продуктивности. Осенью (октябрь) от данных маралов отбирали спермопродукцию, проводили ее оценку, параллельно брали кровь в вакуумные стерильные пробирки на исследование уровня гормона тестостерона и кортизола. После взятия пробирки размещали в термоящик на 4 часа для транспортировки и отстаивания сыворотки. Затем производили сливание сыворотки крови с помощью дозатора в пробирки эппен-дорфа по 300 мкл, наконечники дозатора меняли после каждого использования. Подписанные пробирки эппендорфа с сывороткой замораживали при температуре –20 °С. Исследования на гормоны проводили в ФГБНУ ФАНЦА (отделе ВНИИПО) на анализаторе иммуноферментных реакций MR-96A с применением наборов реагентов для иммуноферментного определения гормонов фирмы «ХЕМА» и «вектор БЭСТ».

Полученные данные подвергались стандартной статистической обработке [8] с помощью программы MS Excel.

Результаты и их обсуждение. Для отработки усовершенствованного метода фиксации маралов-рогачей при отборе спермопродукции использовали запатентованный передвижной станок для фиксации марала при взятии спермы.

В результате проведенных экспериментов по отбору биоматериала от маралов-рогачей применяли препарат Рометар, что позволило отобрать жизнеспособную сперму с минимальным травматизмом для животного. Время подготовки для отбора биопродукции и фиксации маралов-рогачей в положении лежа на боку с применением препарата Рометар составило 30 мин, из них 20 мин – время начала действия препарата, 10 мин – время фиксации. Фиксация в подвешенном состоянии маралов-рогачей составляла 15–20 мин.

При взятии спермы от маралов-рогачей производили отбор крови для исследования на уровень гормонов тестостерона и кортизола. Результаты исследований представлены в таблице 1.

Таблица 1

в период гона при взятии спермы

Группа рогачей, дата отбора	Возраст, лет	Класс по продуктивности	Тестостерон, нмоль/л	Кортизол, нмоль/л
n = 6 05.10.2022	6–9	1	3,9 (1,3–13,2)	106,5 (35,0–260,0)
n = 2 05.10.2022	6–7	Элита	4,7 (4,5; 4,9)	168,0 (157,0; 179,0)
n = 2 05.10.2022	8	2	1,7 (1,2; 2,2)	136,0 (130,0; 142,0)

Уровень тестостерона и кортизола в крови маралов-рогачей

Уровень тестостерона у маралов-рогачей колеблется в пределах 1,3–13,2 нмоль/л, кортизола – 35,00–260,00 нмоль/л. У испытуемых животных с классностью элита и первым классом по продуктивности уровень тестостерона выше, чем у рогачей второго класса, на 2,2–3,0 нмоль/л.

Невысокие значения кортизола в момент отбора спермы у маралов-рогачей объясняются проведением премедикации Рометаром.

Результаты исследований взаимосвязи качества спермопродукции от уровня тестостерона представлены в таблице 2.

Таблица 2

Ф го ГО О о ^ О- о ® го 1________	1— ф ।— аз со о ОО	1— о о о СО о s s ^ О о	н	Качественная оценка нативной спермы
				Объем, мл	Цвет	Активность, балл	Концентрация, млн/мл
n = 6 05.10.2022	6–9	1	3,9 (1,3– 13,2)	4,0 (2,0–6,0)	Белый 50 % Желтый 50 %	2,0 (0,0–5,0)	683,3 (500,0–900,0)
n = 2 05.10.2022	6–7	Элита	4,7 (4,5; 4,9)	6,8 (6,5; 7,0)	Белый	8,5 (8,0; 9,0)	950,0 (900,0; 1000,0)
n = 2 05.10.2022	8	2	1,7 (1,2; 2,2)	3,8 (3,5;4,0)	Желтый	1,0 (0,0; 2,0)	550,0 (500,0; 600,0)

Качественные показатели спермы маралов-рогачей в зависимости от уровня тестостерона во время гона

Отмечается низкая активность сперматозоидов или ее отсутствие в образцах спермы желтого цвета. У трех маралов-рогачей первого класса и всех испытуемых животных второго класса присутствовало желтое окрашивание. Окрашивание в желтый цвет эякулята обусловлено примесью бульбоуретральных желез, представляющей собой тягучую жидкость, выделяемую в мочеиспускательный канал при проведении электроэякуляции. При этом объем эякулятов составляет 4,0–6,0 мл и концентрация сперматозоидов 600–900 млн/мл. У маралов-рогачей классов элиты и первого с концентрацией гормона тестостерона выше 3,9±2,20 нмоль/л во время гона наблюдается объем эякулята 3,5–7,0 мл, активность сперматозоидов до 9 баллов и концентрацией от 700 млн до 1,0 млрд/мл. Исключением является один образец, в эякуляте которого наблюдалась железистая жидкость желтого цвета, пагубно воздействующая на жизнеспособность спермиев.

Заключение

• 1.    Уровень тестостерона и кортизола в период гона у маралов-рогачей разных классов продуктивности варьировал в пределах 1,2–13,2 и 35,0–260,0 нмоль/л соответственно.

• 2.    Качество полученной нативной спермы выше у маралов-рогачей первого класса и элиты в сравнении со вторым классом, так, концентрация сперматозоидов выше на 133,3–400,0 млн/мл, активность – 1,0–7,5 баллов, объем эякулята – 0,2–3,0 мл соответственно.