Биохимические критерии некоторых видов отравлений

В настоящее время в судебно-медицинской экспертизе отравлений токсикологически важными веществами различных химических групп в недостаточном объеме используются биохимические исследования. Особое значение вышеуказанные исследования приобретают при установлении причин смерти в случаях, когда морфологические проявления в исследуемых объектах отсутствуют, концентрация токсикологически важных веществ не соответствует диапазонам токсической и летальной, либо информация по диапазонам этих концентрации недоступна для судебно-медицинского эксперта. При этом в большинстве случаев изменения метаболизма позволяют установить характер функциональных нарушений.

В ряде работ показана высокая эффективность биохимических методов исследования в решении экспертных задач, для ряда причин смерти, в том числе отравлений этиловым спиртом, разработаны объективные критерии, позволяющие по биохимическим показателям трупного материала (крови, тканей) подтвердить причину смерти [1-3]. Целью исследования был статистический анализ ряда биохимических показателей, определяемых в рамках судебно-медицинской экспертизы при летальных отравлениях наркотическими средствами, а также этанолом и его суррогатами.

Объектом исследования были образцы трупной крови из бедренной вены. Установленные причины смерти – отравление наркотическими средствами группы опиатов (в том числе комбинированные с другими наркотическими средствами) (1-я группа), отравление этанолом и его суррогатами (2-я группа), цирроз печени (3-я

Воронин Александр Васильевич, кандидат фармацевтических наук,доцент кафедры химии фармацевтического факультета.

группа), механическая травма (4-я группа). Возраст умерших в исследуемой выборке составлял от 17 до 60 лет, половое распределение – 75,7% мужчин, 24,3% женщин. Сбор данных производили в течение 14 месяцев в судебно-химическом отделении Самарского областного бюро судебно-медицинской экспертизы.

В отобранных образцах крови определяли следующие биохимические показатели: в цельной крови – концентрации глюкозы (ферментативный фотометрический метод), мочевины (фотометрический метод, основанный на взаимодействии с диацетилмонооксимом), креатинина (фотометрический метод, основанный на взаимодействии с пикриновой кислотой в щелочной среде), активность холинэстеразы (метод Хестрина в модификации Б.Ф. Коровкина); в сыворотке крови – концентрация общего белка (биуретовый метод), уровень “средних молекул” (метод УФ-спектрофотометрии) [3]. Аналитические характеристики методик определения вышеуказанных показателей и их референтные значения указаны в инструкциях, прилагаемых к соответствующим наборам реактивов.

Для статистического анализа полученных данных использовали процедуру однофакторного дисперсионного анализа, достоверность различий показателей в группах устанавливали с помощью параметрических и непараметрических критериев.

Величину уровня значимости p (приемлемую границу статистической значимости) устанавливали равной 0,05.

Статистический анализ проводили с применением программы Statistica 6.0 (Statsoft Inc., USA) [4].

Биохимические показатели крови в исследуемых группах представлены в таблице 1. Показатель активность холинэстеразы находился в диапазоне референтных значений для трупной крови – 1,9-2,6 ммоль/л; концентрация общего белка соответствовала норме в 1-й группе, в ос-

Известия Самарского научного центра Российской академии наук, т. 12, №1(6), 2010

Таблица 1. Значения биохимических показателей крови в исследуемых группах

П оказатель	1 гр у ппа ( n =24)	2 гру пп а ( n =15)	3 группа ( n =21)	4 гр у ппа ( n =14)
Концентрация глюкозы, ммоль/л	5,0	3,1	3,7	4,9
Концентрация мочевины, ммоль/л	12,38	18,55	16,06	23,71
Концентрация креатинина, ммоль/л	0,27	0,35	0,28	0,52
Активность холинэстеразы, ммоль/л	2,6	2,4	2,0	2,5
Концентрация общего белка, г/л	72,5	64,1	54,9	58,1
“Средние молекулы”	1,13	1,41	1,34	1,59

Таблица 2. Результаты дисперсионного анализа биохимических показателей крови в исследуемых группах

Показатель Ди сперсия э ффекта MS Дисперсия ошибки MS F-критерий Уровень значимости p Концентрация глюкозы , ммоль/л 15,29 47,33 0,323 0,809 Концентрация мочевины, моль/л 397,76 184,72 2,153 0,101 Концентрация креатинина, моль/л 0,219 0,080 2,736 0,0499 Активность холинэстеразы, ммоль/л 1,30 0,44 2,938 0,0391 Концентрация общего белка, г/л 1298,27 366,40 3,543 0,0189 “Средние молекулы” 0,677 0,382 1,769 0,161 тальных группах была пониженной; значения других биохимических показателей в различной степени превышали референтные значения.

Полученный массив данных подвергали однофакторному дисперсионному анализу с целью проверки статистической значимости различия между средними значениями изучаемых биохимических показателей в группах лиц, умерших от отравления опиатами, этанолом и его суррогатами, цирроза печени; в качестве контрольной группы использовали биохимические показатели крови лиц, умерших от механической травмы.

Из табл. 2 видно, что для исследуемых образцов крови необходимо отвергнуть гипотезу о равенстве средних значений следующих биохимических показателей: концентрация креатинина, активность холинэстеразы, а также концентрация общего белка – наблюдаемый уровень значимости p менее 0,05. Так как для расчета компонентов дисперсии был использован массив данных, образованный всеми четырьмя группами, то из вышеуказанной таблицы не очевидно, какие группы вызвали значительное расхождение средних.

Для детального изучения вклада отдельных групп в расхождение средних значений изучаемых биохимических показателей применяли апостериорный критерий – критерий наименьшей значимости, позволяющий выполнять сравнение средних при отсутствии априорной гипотезы относительно характера их распределения; определение вышеуказанного критерия выполняли для каждого из биохимических показателей.

По данным табл. 3 концентрация глюкозы в трупной крови значимо не отличалась во всех исследуемых группах и находилась на относительно невысоком уровне (от 3,0 до 5,0 ммоль/ л), что согласуется с литературными данными о быстрой утилизации глюкозы в крови после смерти. Необходимо учитывать, в случаях смерти углеводы на поддержание энергетических затрат расходуются быстро и неравномерно в органах и различных отделах кровеносного русла [3].

В случаях отравления опиатами (1-я группа) по сравнению с группой лиц, умерших от механической травмы (4-я группа) отмечено статистически значимое различие средних значений ряда биохимических показателей: концентрация мочевины была ниже на 47,7%, концентрация креатинина – на 48,0%, уровень «средних молекул» – на 28,9%; при этом концентрация общего белка превышала аналогичный показатель в случаях смерти от механической травмы на 24,8%.

В группе лиц, умерших от отравления этанолом и его суррогатами (2-я группа), не было вы-

Таблица 3. Значения вероятности критерия наименьшей значимости для биохимических показателей крови в исследуемых группах

Конц ен тр ация глю козы, ммоль/л Конц ен тр ация мочеви ны, моль/л 1 группа 2 групп а 3 группа 4 груп па 1 группа 2 группа 3 группа 4 группа 1 группа 0,399 0,526 0,957 0,173 0,368 0,0157 2 группа 0,399 0,794 0,486 0,173 0,590 0,310 3 группа 0,526 0,794 0,620 0,368 0,590 0,108 4 группа 0,957 0,486 0,620 0,0157 0,310 0,108 Концентрация креатинина, моль/л Активность холинэстеразы, ммоль/л 1 группа 0,349 0,824 0,00913 0,323 0,00534 0,603 2 группа 0,349 0,474 0,116 0,323 0,121 0,684 3 группа 0,824 0,474 0,0181 0,00534 0,121 0,0516 4 группа 0,00913 0,116 0,0181 0,603 0,684 0,0516 Конц ен тр ация общ его белк а, г/л “С редние молекулы” 1 группа 0,191 0,00302 0,0282 0,161 0,253 0,0299 2 группа 0,191 0,157 0,394 0,161 0,720 0,456 3 группа 0,00302 0,157 0,635 0,253 0,720 0,249 4 группа 0,0282 0,394 0,635 0,0299 0,456 0,249 явлено значимого различия исследуемых биохимических показателей по сравнению с другими группами. Однако в некоторых литературных источниках отмечается, что одним из маркеров отравления суррогатами этанола является значительное увеличение активности сывороточной холинэстеразы и концентрации креатинина в крови из бедренной вены.

Таким образом, был выполнен статистический анализ биохимических показателей трупной крови, в результате которого установлен характер их изменений при летальных отравлениях наркотическими средствами группы опиатов. Комплекс показателей трупной крови – концентрация мочевины, креатинина, общего белка, уровень “средних молекул” могут быть использованы в качестве биохимического маркера вышеуказанного вида отравления в комплексе с данными судебно-химического анализа.

Показано, что при отравлениях этанолом и его суррогатами результаты биохимических исследований в рамках предложенного перечня показателей не позволяют дифференцировать данный вид отравлений. Возможно, увеличение объема исследуемой выборки, также применение более широкого круга биохимических показателей позволит провести более детальное изучение закономерностей изменения биохимической картины трупной крови в случаях отравления этанолом и его суррогатами, а также опиатами.