Изучение антигенных свойств белков дезинтегрированных мембран псевдотуберкулезного микроба
Автор: Кузнецова Вера Сергеевна, Иващенко Сергей Владимирович, Киреев Михаил Николаевич, Хапцев Заур Юрьевич, Спиряхина Татьяна Владиславовна
Журнал: Вестник Красноярского государственного аграрного университета @vestnik-kgau
Рубрика: Ветеринария и зоотехния
Статья в выпуске: 2, 2023 года.
Бесплатный доступ
Дезинтегрированные мембраны Yersinia pseudotuberculosis (ДМ Y. pseudotuberculosis) являются перспективными в антигенном плане препаратами. Цель исследования - изучение белкового и антигенного составов препарата ДМ Y. pseudotuberculosis. С помощью электрофореза было установлено преобладание в ДМ Y. pseudotuberculosis белков с молекулярными массами 23, 38 и 45 кДа, из которых в наибольшем количестве присутствовал белок массой 38 кДа. У мышей, иммунизированных препаратом ДМ Y. pseudotuberculosis, отмечалось усиление дыхательной активности перитонеальных макрофагов и антителогенеза. Скорость прироста дыхательной активности перитонеальных макрофагов снижалась при иммунизирующих дозах выше 63 мкг/мышь, а также замедлялось антителообразование, что определило величину иммунизирующей дозы в 63 мкг/мышь. При пересчете на кролика массой 2,5 кг иммунизирующая доза составила 2 мг. Нами также была проведена пятикратная иммунизация кроликов для получения высокоспецифических антител к ДМ Y. pseudotuberculosis. Титры антител полученной сыворотки в ИФА с цельными клетками Y. pseudotuberculosis составили 1:25600, с клетками Y. enterocolitica - 1:200, с клетками других представителей кишечной группы бактерий - 1:100-1:400. Это свидетельствует о том, что основной антигенной активностью в ДМ Y. pseudotuberculosis обладают белки с видовой специфичностью. Полученные антитела взаимодействовали в иммуноблоттинге с белками ДМ, имеющими молекулярные массы 38, 45, 58, 66 кДа. Однако наиболее интенсивное взаимодействие отмечалось с белком молекулярной массы 45 кДа. При психрофильном культивировании иерсиний молекулярным массам обнаруженных нами белков соответствуют только термостабильный токсин и порины клеточной стенки. Данные антигены достаточно устойчивы к низким концентрациям додецилсульфата натрия и вместе с липополисахаридом могут составлять основную антигенную композицию ДМ Y. pseudotuberculosis, обладающую видовой специфичностью.
Yersinia pseudotuberculosis, дезинтегрированные мембраны, антигены, белки
Короткий адрес: https://sciup.org/140299669
IDR: 140299669 | DOI: 10.36718/1819-4036-2023-2-122-128
Список литературы Изучение антигенных свойств белков дезинтегрированных мембран псевдотуберкулезного микроба
- Зыкин Л.Ф., Щербаков А.А., Хапцев З.Ю. Иерсиниоз и псевдотуберкулез сельскохозяйственных животных. Саратов, 2002. 67 с.
- Псевдотуберкулез / И.А. Шурыгина [и др.]. Новосибирск: Наука, 2003. 320 с.
- Ценева Г.Я., Солодовникова Н.Ю., Воскресенская Е.А. Молекулярные аспекты вирулентности иерсиний // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2002. № 3 (4). С. 248–266.
- The superantigenic toxin of Y. pseudotuber-culosis, a novel virulence factor? / C. Carnoy [et al.] // Int. J. Med. Microbiol. 2000. № 4-5 (290). P. 477–482.
- Андрюков Б.Г., Недашковская Е.П., Тимченко Н.Ф. Опыт клинического использования видоспецифической иммуноферментной тест-системы для диагностики псевдотуберкулеза // Лаб. нов. Дальн. Вост. 1999. № 1. С. 3–4.
- Использование порина наружней мембра-ны Yersinia enterocolitica для диагностики иерсиниоза с помощью ИФА / О.П. Востри-кова [и др.]; Тихоокеанский ин-т биооргани-ческой химии ДВО РАН (Владивосток) // Биологические мембраны. 2009. № 5 (26). С. 419–428.
- The effect of polyazolidinammonium on the dynamics of the synthesis of pseudotuber-culosis antibodies / S.V. Ivashchenko [et al.] // IOP Conf. Series: Earth and Environmental Science. 2020. 421. 022055. DOI: 10.1088/ 1755-1315/421/2/022055.
- Laemmli U.K. Cleavage of Structural Proteins during the Assembly of the Head of Bacterio-phage T4 // Nature. 1970. № 22. P. 680–685.
- Mosmann T. Rapid colorimetric assay for cel-lular growth and survival: application to proli-feration and cytotoxicity assays // J. Immunol. Methods. 1983. № 1-2 (65). P. 55–63.
- Hornbeck P., Winston S.E., Fuller S.A. En-zyme-linked immunosorbent assays // Current Protocols in Molecular Biology. 2001. № 15. P. 2.1.1–2.1.23.
- Towbin H., Staehelin T., Gordon J. Electropho-retic transfer of proteins from polyacrylamide gels to nitrocellulose sheets: procedure and some applications // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America: journal. 1979. № 9 (76). P. 4350–4354.
- Выбор дозы препарата для доклинического исследования: межвидовой перенос доз / Е.В. Шекунова [и др.] // Ведомости Научного центра экспертизы средств медицинского применения. 2020. № 1 (10). С. 19–28.