Получение опытно-промышленной партии белкового гидролизата из тушек норок и изучение его токсичности

В связи с существующим в настоящее время в отечественном животноводстве дефицитом качественных и безопасных для организма животных кормов, актуальным является поиск новых источников белка и получение на их основе кормовых препаратов, которые обладают не только биологической ценностью, но и безопасностью для организма животных, а их производство является экономически оправданным для животноводческой отрасли.

Для нормализации протеинового баланса в кормлении животных используют различные белковые добавки, в частности отходы переработки молока, мясокостную и рыбную муку, кормовые дрожжи, белковые гидролизаты и др. [1].

Белковые гидролизаты представляет собой ами-нокислотно-пептидные смеси. Они легко усваиваются организмом при разных способах введения, нетоксичны, неантигенны, не дают анафилактических реакций и других побочных эффектов.

Являясь более сложными соединениями, они выполняют в микро- и макроорганизмах более сложные функции: служат источниками аминокислот, принимают участие в различных процессах организма как регуляторы и посредники, могут служить иммуномодуляторами и иммуномедиаторами [2].

В настоящее время гидролизаты белков широко используются в индустрии питания, медицине, ветеринарии, биологической и микробиологической промышленности. Их применяют в качестве пищевых и кормовых добавок, в диетологии, особенно для детей, в рационе животных, в первую очередь молодняка, как основы питательных сред для культивирования клеток тканей и бактерий, в качестве

компонента защитных сред при сушке микроорганизмов [3].

Материалом для гидролиза могут служить любые белковые соединения, будь они животного, растительного или микробного происхождения. Расщепление проводят физическими, в основном термическими, химическими (кислотными, щелочными) или ферментативными методами, а также путем сочетания разных видов воздействия. При этом оба фактора (исходное сырье и метод гидролиза) определяют состав гидролизатов и способ его использование [4].

Целью данной работы явилось получение опытно-промышленной партии белкового гидролизата из тушек норок для применения его в качестве кормовой добавки для животных и изучение его токсичности.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

Получение опытно-промышленной партии гидролизата из тушек норок проводили на реакторе объёмом 250 литров. Материалом служили тушки норок, полученные при убое в зверосовхозе «Салтыковский» Московской области.

В качестве фермента использовали свиную поджелудочную железу (ГОСТ 11285-73), подтит-ровку pН проводили 10% NaOH.

Содержание аминного азота в гидролизате определяли методом формольного титрования, остаточную влажность высушиванием пробы при температуре 105ºС, pН-потенциометрически. Аминокислотный состав гидролизата определяли на аминокислотном анализаторе RSX-200.

Изучение острой токсичности гидролизата проводили на белых мышах в соответствии с методическими рекомендациями ФГУ НЦЭСМП [5] на кафедре внутренних незаразных болезней животных (МГАВМиБ).

Подопытных мышей содержали согласно общепринятым санитарным правилам на стандартном рационе. Перед опытом животных лишали корма и воды. Через 2 ч их взвешивали на электронных весах, отбирали особей с массой тела 19-21 г, на ко- торых ранее не проводились никакие исследования. После взвешивания проводили их рандомизацию.

Испытуемый препарат вводили животным в дозах 0,1 и 0,5 мл. Перед введением препарат разводили в физиологическом растворе так? чтобы испытуемая доза содержалась в объеме 0,5 мл, который вводили мышам внутрижелудочно с помощью специального зонда.Контрольной группе мышей вводили внутрижелудочно физиологический раствор в объеме 0,5 мл. Каждая подопытная и контрольная группы животных состояли их 20 особей.

Срок наблюдения за животными составлял 15 сут, на протяжении которых следили за состоянием животных, оценивали их шерстный покров, слизистые, выделения, поведенческие реакции. На 5, 10 и 15-е сут животных взвешивали для оценки динамики прироста массы тела.

Статистическую обработку полученных результатов проводили по методу Стьюдента [6]. Вычисляли среднее значение полученных результатов и стандартное отклонение.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Ранее в лабораторных условиях были отработаны условия проведения процесса гидролиза (используемый ферментный препарат, соотношение субстрата и фермента, продолжительность процесса гидролиза, рН гидролизуемой смеси и температурный режим, а также способ подготовки сырья) [7]. По результатам лабораторных исследований был выбран наиболее оптимальный и экономически менее затратный способ ведения гидролиза, который и был положен в основу промышленного способа.

По отработанному технологическому режиму была изготовлена опытно-промышленная партия гидролизата объемом 6,1 кг, для ее изготовления пошло 65 кг исходного сырья.

Полученный гидролизат был проанализирован по физико-химическим показателям и аминокислотному составу (табл. 1 и 2).

Таблица 1. Физико-химические показатели качества опытно-промышленной серии ферментативного гидролизата из тушек норок

Показатели	Характеристики продукции
Внешний вид, запах и цвет	Мелкодисперсный порошок, светлый со слабым специфическим запахом
Концентрация водородных ионов (рН)	6,4
Массовая доля влаги, %	5,0
Массовая доля аминного азота, %	6,9

Таблица 2. Аминокислотный состав гидролизата из тушек норок

Название аминокислоты	Содержание в%	Название аминокислоты	Содержание в%
Аспарагиновая	7.67	Метионин*	3.49
Треонин *	4.93	Изолейцин*	4.93
Серин	3.87	Лейцин*	8.2
Глутаминовая	13.62	Тирозин	2.53
Пролин	1.17	Фенилаланин*	4.24
Цистин	1.06	Гистидин	1.86
Глицин	3.97	Лизин*	10.41
Аланин	4.43	Аргинин	9.64
Валин*	2.76

Прим.: *- незаменимые аминокислоты

Как видно из представленных в таблицах данных, полученный гидролизат характеризуется высоким содержанием аминного азота, что говорит о глубокой степени расщепления белка, содержит в своем составе свободные аминокислоты (в том числе все незаменимые).

В опытах на мышах по изучению токсичности полученного гидролизата было показано, что введение исследуемого препарата не вызывает внешних признаков интоксикации животных. Через 24 ч после введения препарата и в последующие 14 сут гибели животных в контрольных и опытных группах отмечено не было. У животных не было выяв- лено отклонений во внешнем виде, состоянии шерстного покрова и слизистых, характере выделений, поведенческих реакциях в сравнении с аналогичными показателями животных в контрольных группах.

В таблице 3 приведены данные о динамике прироста массы тела у животных подопытных и контрольных групп на протяжении всего срока наблюдения.

На основании полученных результатов можно сделать вывод, что испытуемый препарат не оказывает токсического действия на организм белых мышей при внутрижелудочном введении.

Таблица 3. Динамика прироста массы тела у белых мышей после внутрижелудочного введения гидролизата тушек норок

Препарат, доза	Масса животных в % от исходной через:
	5 сут	10 сут	15 сут
	M±m	M±m	M±m
Контроль (физиологический раствор), 0,5 мл.	119,6±3,36	134,1±3,86	142,4±5,72
Испытуемый препарат
Гидролизат 0,1 мл + 0,4 мл физиологического раствора	121,7±3,39	136,4±3,81	143,5±5,86
Гидролизат 0,5 мл	124,1±3,42	137,3±3,95	148,4±5,93