Результаты ампутаций нижней конечности на фоне сахарного диабета с использованием пластичного гемостатика в эксперименте

Введение . Одной из проблем современной хирургии ампутаций конечностей на уровне крупных трубчатых костей, на фоне использования антикоагулянтов, являются кровотечения. По данным мировой литературы послеоперационное кровотечение ухудшает течение послеоперационного периода у пациентов и является причиной гнойно-септических осложнений [1]. Нагноения послеоперационной культи на фоне сахарного диабета, гипертонической болезни, ишемической болезни сердца увеличивает частоту возникновения острой почечной недостаточности, тромботических и тромбоэмболических осложнений, инсультов, инфарктов миокарда [2] и сепсиса [3]. Кроме того, высокие ампутации являются фактором риска увеличения заболеваемости, смертности у пациентов и послеоперационных затрат лечебного учреждения [4]. В большинстве клиник для решения проблемы кровотечения из культи костной ткани и костно-мозгового канала используют гемостатическую губку, применение которого обусловлено отсутствием альтернативных гемостатических средств.

На сегодняшний день, частота встречаемости гнойных осложнений ампутированной культи конечности достигает 6% [5]. По данным мировой литературы послеоперационная инфекция культи являются ведущими причинами увеличения заболеваемости, летальности, социально-экономических издержек и дискомфорта пациентов после выполнения высоких ампутаций [6].

Учитывая все вышеизложенное, внедрение нового местного гемостатического средства в клиническую практику позволилит успешно использовать в области борьбы с осложнениями в хирургии ампутаций существенно снизив риск возникновения кровотечений и инфекций, а также способствует вытеснению с рынка Узбекистана дорогостоящую медицинскую продукцию, зарубежные гемостатические средства, тем самым активно способствуя развитию импортозамещающих технологий в Узбекистане.

Экспериментальное и морфологическое исследование эффективности Хемобена позволит оценить новое отечественное гемостатическое средство для лечения и профилактики осложнений ампутаций конечности.

Материалы и методы исследования . Экспериментальные исследования выполнены в лаборатории экспериментальной хирургии Государственное учреждение Республиканский специализированный научно-практический медицинский центр хирургии имени академика. В.Вахидова с 2025-2026гг. В эксперименте использованы белые беспородные крысы самцы весом 220-250гр. Животные содержались в условиях вивария, оснащенного приточновытяжной вентиляцией и кондиционированием с температурой 22-23^оС.

Оперативные вмешательства выполнялись по истечении 2 недель после индукции сахарного диабета. Условием для оперативного вмешательства являлось повышение уровня глюкозы в крови не менее 17 ммоль/л. Также из опыта временно исключались животные, вес которых не достигал исходных значений с восстановлением исходной физической и физиологической активности. Таким образом из 20 крыс с индуцированным сахарным диабетом в группу контроля включены 15 крыс.

Накануне перед оперативным вмешательством крысы находились на голодной диете 6 часов. Под общей анестезией парами изофлюрана крысам контрольной группы выполнена ампутация левой нижней конечности на уровне средней трети бедра. Во время операции гемостаз из общей бедренной артерии и вены осуществлялся с использованием электрокоагулятора. При рассечении массива бедренных мышц и при пересечении бедренной кости кровотечение останавливалось путем прикладывания к кровоточащим тканям гемостатической коллагеновой губки (рис.1).

Учитывая то, что кровотечение носило достаточно интенсивный характер губка достаточно быстро набухала кровью в связи с чем либо использовалась дополнительно другая губка, либо прикладывались марлевые шарики. В целом кровотечение из мягкий тканей и перикостальных сосудов составло 1,75 + 0,23 мл. Обращало внимание, что несмотря на достигнутый гемостаз из мягких тканей, кровотечение из сосудов костного мозга продолжалось в течение 2-3 минут и ушивание мышц с использованием атравматичной иглы 3/0 пролен производилось на фоне продолжающегося хотя и незначительного кровотечения. Бедренная кость и место пересечения бедренной кости тампонировалось мышечными тканями. Кожа после ампутации ушивалась непрерывным швом пролен 3/0. В послеоперационном периоде крыс обезболивали введением внутримышечной 0,1мл раствора ксилы и 0,2мл аналгина. Далее в питьевую воду добавляли ипобруфен из расчета 500 мг препарата на 100 мл воды.

Рис. 1. Контроль. Ампутация задней конечности на уровне бедра с активным кровотечением из культи, Гемостаз с использованием коллагеновой гемогубки

Аналогично животным контрольной группы, в опытной группе крыс, оперативные вмешательства выполнялись по прошествии 2 недель после индукции сахарного диабета и с условием повышения уровня глюкозы свыше 17ммоль/л, а также с учетом исключения из группы исследования ослабленных крыс. Таким образом из 20 крыс с индуцированным сахарным диабетом в опытную группу включены 14 крыс. Накануне перед оперативным вмешательством крысы находились на голодной диете 6 часов. Под общей анестезией парами изофлюрана крысам опытной группы выполнена ампутация левой нижней конечности на уровне с/3 бедра. Во время операции гемостаз из общей бедренной артерии и вены осуществлялся с использованием электрокоагулятора. При рассечении массива бедренных мышц и при пересечении бедренной кости кровотечение останавливалось путем использования порошка хемобен. Кровотечение из перикостальных сосудов и костномозгового канала осуществлялся с использованием пластичного геля, приготовленного по разработанной нами технологии (рис.2).

В целом кровотечение из мягкий тканей и перикостальных сосудов составло 0,85 + 0,13 мл. Обращало внимание, что пломбировка костно-мозгового канала пластичным гелем моментально останавливало кровотечение. Пересеченные мышцы и фасции ушиты атравматичной нитью пролен 3/0. Кожа ушита непрерывным швом пролен 3/0.

В послеоперационном периоде крыс обезболивали введением внутримышечной 0,1мл раствора ксилы и 0,2 мл анальгина. Далее в питьевую воду добавляли ипобруфен из расчета 500 мг препарата на 100 мл воды.

Рис. 2 Опыт. Ампутация задней конечности на уровне бедра. Гемостаз с использованием разработанного гемостатика.

Результаты и обсуждения . В контрольной группе животных (табл.1) на 1 сутки после операции летальный исход наступил у 2 особей. Остальные животные их состояние расценено как средней тяжести. Подвижность ограниченна, больше находятся в углу клетки. Прием пищи недостаточный. Шерсть тусклая. Слизистые с тенденцией к сухости. При попытке взять в руки сопротивляются вяло. Операционная рана чистая, признаков подсачивания крови не выявлено.

На 3 сутки после операции летальный исход наступил еще у 1 крысы. Оставшиеся животные передвигаются по клетке. Восстановился прием пиши и воды. Физиологические оправления в виду оформленного помета и мочи – улучшились. Шерсть все еще тусклая. При попытке взять в руки сопротивляются не активно. Рана отечная, болезненная. Отделяемого нет. Вес животных уменьшился на 10-12гр в сравнении с непосредственным замером веса после операции..

На 7 сутки после операции летальных исходов не было. Животные умерено активно передвигаются по клетке. Принимают корм и воду. Шерсть стала более гладкой и приобрела блеск. Со стороны раны у 3 особей наступило краевое расхождение раны с отделяемым и запахом. Этим крысам под общей анестезией парами изофлюрана произведена обработка раны антисептиками и присыпана антибиотиком цефтриаксон. У остальных животных область раны отечная, отделяемого не выявлено. Снижение веса у животных составило 15-20 гр в сравнении с послеоперационным весом.

Состояние животных на 14 сутки в контрольной группе приближается к норме, однако 4 крысы все еще недостаточно активны и вяло сопротивляются при попытке взять в руки. Операционная рана инфицирована у 4 крыс в виде расхождения швов на площади 5х5мм. Дно раны покрыто корочкой. У остальных животных рана чистая, отечность значительно снизилась. Болезненность в области раны также уменьшилась. Отмечена стабилизация веса животных.

Крысы контрольной группы на 21 сутки после операции достаточно активны. Стараются передвигаться по клетке. При попытке взять в руки активно сопротивляются. Отмечена прибавка в весе на 7-10 гр. Рана чистая, без отделяемого. У 3 особей происходит заживление ран под корочкой

Таблица 1

Результаты лечения экспериментальных животных в контрольной группе

Показатели	Сроки исследований (сут) / Количество животных
	После опер	3	7	14	21
Количество	15	13	9	6	3
Вес	248	235	230	235	237
Инфицирование		7	5	4
Летальность		2	1

В опытной группе (табл.2) на 1 сутки после операции летальный исход наступил у 1 особи. У остальных животных состояние расценено как средней тяжести. Подвижность ограничена, больше находятся в углу клетки. Прием пищи недостаточный. Шерсть тусклая. Слизистые с тенденцией к сухости. При попытке взять в руки сопротивляются вяло. Операционная рана чистая, признаков подсачивания крови не выявлено.

На 3 сутки после операции животные передвигаются по клетке. Восстановился прием пищи и воды. Физиологические оправления в виде оформленного помета и мочи – улучшились. Шерсть гладкая, блестящая. При попытке взять в руки активно сопротивляются.

Рана отечная, умерено болезненная. Отделяемого нет. Вес животных уменьшился на 8-10 гр в сравнении с непосредственным замером веса после операции..

В опытной группе на 7 сутки после операции животные активно передвигаются по клетке. Принимают корм и воду. Шерсть стала гладкой и блестящей. Со стороны раны небольшой инфильтрат отмечен у 1 особи. У остальных животных признаков воспаления и инфицирования не выявлено. Снижение веса у животных составило до 5 гр в сравнении с непосредственным послеоперационным весом.

На 14 сутки после операции крысы активны. При попытке взять в руки сопротивляются. Отмечена прибавка в весе на 5-7гр. Рана чистая, без отделяемого.

Состояние животных на 21 сутки расценено как удовлетворительное. Крысы большее время находились в движении, принимали корм и воду. Раны зажили первичным натяжением. Прибавка в весе составила 7-10 гр.

Таблица 2

Результаты лечения экспериментальных животных в опытной группе

Показатели	Сроки исследований (сут) / Количество животных
	После опер 15	3 13	7 9	14 6	21 3
Вес	247	238	238	240	242
Инфицирование		4	2
Летальность		1

Сравнительный анализ результатов выполненных оперативных вмешательств позволил сделать следующие заключения:

• -    объем кровопотери в опытной группе составил 85,2 + 0,13 мг , тогда как в контроле -1,75 + 0,23 мл , что статистически достоверно ( Р/0,05);

• -    длительность кровотечения из костно-мозгового канала в контрольной группе составило более 3мин, тогда как в опытной группе гемостаз достигался практически сразу.

• -    длительность операции в контрольной группе составила в среднем 45мин, тогда как в опытной сократилась до 31минуты.

• -    восстановление физической и функциональной активности в контрольной группе составило более 14 суток, тогда как в опытной в течение 7 суток.

• -    инфицирование ран наступило в контрольной группе чаще, чем в опытной: степени свободы: ( df = 1 ): критическое значение χ² при ( \alpha = 0.05 ): 3.84: Вывод: ( 6.16 > 3.84 ) → статистически значимая разница между группами по инфицированию

• -    динамика вес животных после выполненной операции продемонстрировало более раннюю стабилизацию веса животных в опытной группе и начало его восстановления.: t-статистика ≈ 3.16, p-значение ≈ 0.03

Разница в весе между группами статистически значима на уровне 5% (p < 0.05).

• -    по летальным исходам: в контрольной группе животных летальный исход имел место в 4 случаях, а в опытной в одном. Степени свободы: ( df = 1 ), критическое значение χ² при ( \alpha = 0.05 ): 3.84. Вывод: ( 1.106 < 3.84 ) - не выявлено статистически значимой разницы по летальности между группами. Это связано с небольшой выборкой в исследуемых группах.