Оптимизация условий проведения ПЦР-амплификации локуса BoLA-DRB3-rEHA
Автор: Гильманов Х.Х.
Статья в выпуске: 4 т.232, 2017 года.
Бесплатный доступ
Резюме: BoLA DRB3 - ген иммунного ответа организма, чьи аллели ассоциированы с устойчивостью или чувствительностью к лейкозу крупного рогатого скота. Из уровня техники известны способы BoLA-типирования методом секвенирования (SBT) с расшифровкой всего экзона 2 DRB3. Цель работы состояла в оптимизации условий проведения ПЦР-амплификации локуса BoLA-DRB3-rern, до уровня, пригодного для дальнейших процедур типирования методом секвенирования. В результате проведенных исследований были оптимизированы условия проведения ПЦР для амплификации локуса BoLA-DRB3-гена с праймерами DRB3FRW и DRB3REV и набором реактивов "Encyclo Plus PCR kit", обеспечившие эффективную наработку специфического продукта реакции.
Пцр, днк, ген, праймер, крупный рогатый скот
Короткий адрес: https://sciup.org/142213081
IDR: 142213081 | УДК: 636.2.082
Optimization of condition for PCR amplification of the BoLA-DRB3-gENE locus
BoLA DRB3 is the immune response gene of an organism whose alleles are associated with resistance or sensitivity to bovine leukemia. Methods for BoLA typing by sequencing (SBT) with decipherment of the entire exon 2 DRB3 are known in the art. The aim of the work was to optimize the conditions for PCR amplification of the BoLA-DRB3 gene locus, to a level suitable for further procedure of typing by sequencing. As a result of the studies, the PCR conditions for amplification of the BoLA-DRB3 gene locus with the DRB3FRW & DRB3REV primers and the "Encyclo Plus PCR kit" reagents were optimized to ensure the effective production of a specific reaction product.
Список литературы Оптимизация условий проведения ПЦР-амплификации локуса BoLA-DRB3-rEHA
- Baxter, R. A rapid and robust sequence-based genotyping method for BoLA-DRB3 alleles in large numbers of heterozygous cattle/R. Baxter, N. Hastings, A. Law//Anim enet. -2008. -V. 39. -P. 561-563.
- Miltiadou, D. Establishment of a sequence-based typing system for BoLA-DRB3 exon 2/D. Miltiadou, A.S. Law, G.C. Russell//Tissue Antigens. -2003. -V. 62(1). -P. 55-65.
- Takeshima, S. Structure, function and disease susceptibility of the bovine major histocompatibility complex/S. Takeshima, Y. Aida//Anim Sci J. -2006. -V. 77. -P. 138-150.
- Takeshima, S. Identification of new cattle BoLA-DRB3 alleles by sequence-based typing/S. Takeshima, M. Ikegami, M. Morita, Y. Nakai, Y. Aida//Immunogenet. -2001. -№53. -P. 74-81.
- Takeshima, S. Short communication: establishment of a new polymerase chain reaction sequence-based typing method for genotyping cattle major histocompatibility complex class II DRB3/S. Takeshima, Y. Matsumoto, Y. Aida//J Dairy Sci. -2009. -V. 92. -P. 29652970.
- Takeshima, S. A new method for typing bovine major histocompatibility complex class II DRB3 alleles by combining two established PCR sequence-based techniques/S. Takeshima, Y. Matsumoto, T. Miyasaka, M. Arainga-Ramirez, H. Saito,M. Onuma & Y. Aida//John Wiley & Sons A/S Tissue Antigens. -2011. -V. 78. -P. 208-213.
- Ковалюк, Н.В. Молекулярногенетические аспекты в селекции и ранней диагностике лейкоза крупного рогатого скота//дис.. д-ра биол. наук: 03.00.23/Ковалюк Наталья Викторовна. -Краснодар. -2008. -174с.
- Эрнст, Л.К. Особенности распространения антигенов BoLA-DRB3 у чернопестрого скота в связи с ассоциацией с лейкозом/Л.К. Эрнст, Г.Е. Сулимова, А.Р. Орлова, И.Г. Удина, С.П. Павленко//Генетика. -1997. -№1. -С. 84-95.
