Получение водорастворимых пептидов из биомассы личинок Musca domestica и изучение их свойств
Автор: Крылова Л.С., Ремизов Е.К., Смирнова К.Ю., Сорокатая Е.И., Древко Я.Б.
Журнал: Вестник Красноярского государственного аграрного университета @vestnik-kgau
Рубрика: Ветеринария и зоотехния
Статья в выпуске: 4, 2020 года.
Бесплатный доступ
Цель исследования - выделение водорастворимых пептидов из биомассы личинок M. domestica и изучение их антимикробной активности. Задачи: подобрать условия высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) для эффективного разделения водорастворимых пептидов, выделить пептиды из биомассы личинок M. domestica, изучить антибактериальную активность. Экстракцию водорастворимых пептидов проводили 0,1 М фосфатно-солевым буфером по разработанной нами оригинальной методике, состоящей из последовательных стадий, таких как перерастворение, центрифугирование и многократное высаливание белков сульфатом аммония. Далее нами были подобраны условия для разделения водорастворимых пептидов методом ВЭЖХ на колонке BioSep SEC S-2000 300х2120 мм при скорости потока 1 мл/мин и длине волны 280 нм, времени хроматографирования 60 мин, объеме вводимой пробы 20 мкл и температуре 25 ºС. Таким образом, нами было получено 6 белковых фракций из биомассы личинок Musca domestica. Наибольший хроматографический выход регистрировали у фракции 5-й, он составил 38,84 %, у 1-й и 2-й фракции - 20,33 и 22,43 % соответственно, у 3-й фракции -11,87 %, в 4-й и 6-й фракциях в следовых количествах - 2,99 и 3,54 % соответственно...
Водорастворимые пептиды, высокоэффективная жидкостная хроматография, антимикробная активность
Короткий адрес: https://sciup.org/140248957
IDR: 140248957 | УДК: 615.331:543.544.5 | DOI: 10.36718/1819-4036-2020-4-97-101
Obtaining hydrosoluble peptides from the biomass of Musca domestica larvas and study of their properties
The aim of the research was the isolation of hydrosoluble peptides from the biomass of M. domestica larvae and the study of their antimicrobial activity. To achieve this goal, the following tasks were set: to select high performance liquid chromatography (HPLC) conditions for effective separation of hydrosolublepeptides, to isolate peptides from the biomass of M. domestica larvae, to study antibacterial activity. Thehydrosoluble peptides with 0.1 M phosphate-buffered saline were extracted according to original technique developed by the authors, consisting of successive stages, such as resolution, centrifugation, and multiple salting out of proteins with ammonium sulfate. Later the conditions for the separation of hydrosolublepeptides by HPLCon a BioSep SEC S-2000 300x2120 mm column at a flow rate of 1 ml / min and a wavelength of 280 nm were selected, chromatography time of 60 minutes, the volume of the injected sample was 20 μl and the temperature of 25 ºC. Thus, 6 protein fractions from the biomass of Muscadomestica larvaewe were obtained...
Список литературы Получение водорастворимых пептидов из биомассы личинок Musca domestica и изучение их свойств
- Wang G., Mishra B., Lau K., Lushnikova T.,Golla R., Wang X. Antimicrobial peptides in 2014 // Pharmaceuticals. 2015. V. 8. P.123-150.
- Józefiak A., Engberg R.M. Insect proteins as a potential source of antimicrobial peptides in livestock production. A review // Journal of Animal and Feed Sciences. 2017. V. 26. P. 87-99.
- Lai Y., Gallo R.L. AMPed Up immunity: how antimicrobial peptides have multiple roles in immune defense // Trends Immunol. 2009. Vol. 30, № 3. P. 131-141.
- Сычева М.В. Биологические эффекты антимикробных веществ животного и бактериального происхождения: дис. … д-ра биол. наук. Уфа, 2016. 274 с.
- Diamond G., Beckloff N., Weinberg A., Kisich K.O. The roles of antimicrobial peptides in innate host Defense // Curr. Pharm. Des. 2009. Vol. 15, № 21. P. 2377-2392.
- Крылова Л.С., Ремизов Е.К., Смирнова К.Ю. [и др.]. Индикация пептидов из биомассы личинок насекомых и изучение их антимикробной активности // Актуальные вопросы ветеринарной биологии. 2019. № 4 (44). С. 3-6.
- Крылова Л.С., Амелькина А.А., Древко Я.Б. [и др.]. Изучение некоторых биологических свойств антимикробных пептидов, полученных из гемолимфы личинок Galleria mellonella // Актуальные проблемы ветеринарной медицины, пищевых и биотехнологий: мат-лы Междунар. науч.-практ. конф. Саратов, 2017. С. 263-267.
- Крылова Л.С., Ларионова О.С., Древко Я.Б. Выделение антимикробных пептидов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии из личинок Galleria mellonella и изучение некоторых их свойств // Биотехнология: состояние и перспективы развития: мат-лы IX междунар. конгресса. М., 2017. С. 478-480.
- Патент RU 2714128. Композиция антимикробных пептидов, полученных из личинок Musca domestica, и способ ее получения / Крылова Л.С., Древко Б.И., Фауст Е.А., Ремизов Е.К., Смирнова К.Ю., Древко Я.Б., Бородина М.А., Осина Т.С., Ларионова О.С. Опубл. 12.02.2020.
- МУК 4.2.1890-04. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам: метод. указания. Введ. 2004-03-04. М.: Федеральный центр госсанэпиднадзора Минздрава России, 2004. 91 с.
