Изменение энзиматической активности у ягнят на фоне введения препаратов-эрготропиков

Наибольшее практическое значение для ветеринарных специалистов имеют ферменты, которые катализируют общие для всех тканей реакции обмена и находятся в большинстве органов и тканей (например, аспартатаминотрансфераза, аланинаминотрансфераза, гамма-глутамилтранспептидаза, амилаза, липаза, щелочная фосфатаза и др.). Отклонения их от референсных значений указывают на нарушение метаболизма в целом и функций печени [5].

Нарушение каталитической активности приводит к накоплению в клетках, тканях и органах недоокисленных продуктов обмена, вследствие чего происходит нарушение различных структур и функции, как отдельных органов, так и организма в целом [6]. Проблема ферментопатий в животноводческих хозяйствах приводит к снижению генетического потенциала, предрасположенностью к заболеваниям, нарушению воспроизводительной функции животных, их ранней выбраковке [7].

В основном среднестатистические величины отражают направленность изменений активности энзимов крови [8, 9]. Активность энзимов, влияющих на метаболические процессы, корректируется рациональным введением животным препаратов-эрготропиков [10].

Исходя из этого, цель настоящего исследования заключалась в анализе изменений активности энзимов в возрастном аспекте и на фоне сочетанного применения препаратов-эрготропиков ягнятам после отъема от овец-матерей.

Условия, материалы и методы. Научное исследование выполнено на платформе КФХ, расположенного на юге Ивановской области в Южском районе. Крестьянское фермерское хозяйство специализируется на выращивании помесных овец на мясо. Двухмесячные ягнята после отъема от овец-матерей содержались в типовой постройке в соответствии с Приказом

№ 774 от 1 ноября 2022 года «Об утверждении "Ветеринарных правил содержания овец и коз в целях их воспроизводства, выращивания и реализации"».

Объектом исследования послужили ягнята, предметом - сыворотка крови.

Для достижения цели исследования путем случайной выборки сформировали три группы – контрольную и две опытные. В каждую группу включены по 6 ягнят, полученных от одноплодной беременности овец.

Животные контрольной группы получали стандартный рацион, принятый в КФХ, питьевую воду - без ограничений.

Помесным ягнятам (романовская × эдиль-баевская × катумская породы) опытных групп, участвующим в исследовании, вводили препарат юберин в течение 4 дней по 2 мл, повторное введение повторяли через каждые две недели. Первой опытной группе в сочетании с юбериином вводили тетравит один раз в три недели в стандартной дозе для молодняка овец (1 мл). Второй опытной группы в сочетании с юберином вводили элеовит в дозе 1 мл один раз в три недели. Циклы препаратов-эрготропиков повторяли четырехкратно после последнего введения юберина с последующим лабораторным исследованием сыворотки крови на предмет оценки динамики энзимов. Исследования выполнены в научной лаборатории ФГБОУ ВО «Верхневолжский ГАУ» на автоматическом биохимическом анализаторе Super Z (Rayto Life and Analytical Sciences Co) и математической обработкой данных в системе Microsoft Excel.

Результаты и обсуждение. Известно, что у полигастричных животных синтез ферментов обусловлен адаптацией органов пищеварения к качеству питания [11]. Раннее приучение ягнят к грубым кормам позволяет проводить их отъем от овец-матерей в 1,5-2месячном возрасте.

Оценивая стартовые показатели активности энзимов, можем отметить, что существуют не только возрастные, но и индивидуальные особенности организма, оказывающие влияние на изучаемые показатели (табл.1).

Как правило, в первую очередь функциональная активность печени оценивается активностью АСТ и АЛТ [12]. Параллельное определение их содержания позволяет более детально изучать биохимические процессы, протекающие в организме.

Анализируя панель трансаминаз, отметим, что в норме у овец в зависимости от породных и возрастных особенностей концентрация АСТ находится в диапазоне 60-280 ед/л, АЛТ - 26-36 ед/л.

В первой и второй опытных группах наблюдали недостоверное повышение активности АСТ на фоне 1-го цикла применения препаратов-эрготропиков и повышение их более чем на 90% на фоне применения 2-го цикла. Относительно 2 цикла, введение 3 цикла эрготропиков привело к снижению активности фермента у ягнят первой и второй опытных групп на 43,78% и 43,02%, соответственно (р≤0,05). Четвертый цикл введения препаратов не оказал выраженного влияния на активность АСТ.

В контрольной группе ягнят отмечается снижение активности АСТ параллельно применению 2 цикла эрготропиков опытным ягнятам на 14,42% и последующее повышение его активности, достигающее 166,30 ед/л на финальном этапе исследований.

Стоит отметить, что активность фермента не превышала референсный интервал в течение эксперимента. Тем не мене, активность АСТ в конечной точке выше у ягнят контрольной группы по сравнению с данными первой группы на 9,32% и второй на 7,04% (р<0,05).

Активность АЛТ у ягнят первой и второй опытных группы на фоне применения эрготропиков постепенно повышалась и на финальном этапе, после введения 4 цикла препаратов, увеличилась относительно первоначального показателя более чем в 2 раза (табл.1).

Таблица 1 – Динамика энзиматической активности у ягнят контрольной и опытных групп, ед/л

Группа ягнят	Стартовые данные	1 цикл	2 цикл	3 цикл	4 цикл
1	2	3	4	5	6
АСТ
Контрольная	134,37±3,24	135,80±5,14	115,00±3,85	148,00±19,19	166,30±23,34
1 опытная	132,70±12,18	134,80±7,12	259,00±3,21	145,60±17,85	150,80±19,20
2 опытная	134,98±4,96	1137,10±7,69	259,40±3,75	147,80±16,83	154,60±18,37
АЛТ
Контрольная	13,36±0,12	13,50±1,52	15,00±0,90	19,50±5,02	36,97±7,24
1 опытная	13,23±1,70	17,10±1,57	26,90±3,24	28,10±3,76	31,90±3,40
2 опытная	13,69±0,41	18,10±1,72	27,10±2,53	28,30±5,84	29,10±4,25
ГГТ
Контрольная	65,87±2,26	64,60±240	63,60±2,36	52,10±9,97	51,49±10,15
1 опытная	69,94±2,24	68,60±8,91	73,10±7,52	63,30±13,01	47,36±8,94

Продолжение Таблицы 1

1	2	3	4	5	6
2 опытная	67,98±1,11	69,00±1,69	73,40±2,71	64,00±3,96	46,86±7,80
Щелочная фосфатаза
Контрольная	463,71±48,74	579,50±21,10	496,20±22,55	550,60±10,14	713,36±25,40
1 опытная	462,37±44,33	466,50±23,95	436,50±20,52	471,70±6,89	478,00±15,00
2 опытная	467,09±38,51	474,40±9,80	441,40±16,82	465,80±12,17	469,14±12,73
а-амилаза
Контрольная	12,61±1,81	29,10±2,60	23,30±1,51	19,80±4,30	20,56±4,24
1 опытная	19,91±2,17	31,00±1,60	36,80±6,52	35,30±5,36	31,62±4,38
2 опытная	22,22±3,34	31,20±1,39	38,40±5,12	34,60±6,85	33,55±6,17
Липаза
Контрольная	23,34±0,33	8,50±0,51	8,40±0,23	5,60±1,06	3,72±0,69
1 опытная	25,75±0,98	10,50±0,06	9,50±0,16	5,40±1,04	4,90±0,92
2 опытная	22,56±0,17	9,60±0,11	9,90±0,17	6,00±1,12	4,22±0,76

В контрольной группе активность АЛТ повышалась медленно, но на финальном этапе превысила первоначальный показатель в 3 раза и была больше, чем в первой и второй опытных группах на 13,71% и 21,29% (р≤0,05). Активность АЛТ, как и АСТ, не превышала референсной величины.

По мнению ученых, высокая изменчивость активности тарнсаминаз может быть обусловлена особенностями метаболизма, функцией печени или влиянием генотипа [13].

Активность щелочной фосфатазы на стартовом этапе у контрольных и опытных ягнят составила 462,37-467,09 ед/л. Применение препаратов-эрготропиков не оказало выраженного влияния на активность фермента. В тоже время в контрольной группе активность щелочной фосфатазы имела волнообразный характер и значительно превосходила первоначальный показатель в конце эксперимента (на 53,84%). Также концентрация щелочной фосфатазы в этой группе в конечной точке была больше, чем в первой опытной группе на 32,99%, и во второй - на 34,23% (р<0,05).

ГГТ - микросомальный фермент, участвующий в метаболизме аминокислот. В первой и второй опытных группах при введении 2-го цикла эрготропиков отмечено достоверное повышение активности ГГТ (на 4,52-7,97%) и постепенное снижение активности до 47,3646,86 ед/л, что меньше первоначальных данных на 32,28% и 31,07%, соответственно (р<0,05).

В контрольной группе происходило плавное снижение активности ГГТ и на конечном этапе концентрация фермента была ниже (по сравнению с первоначальной) на 21,83% и недостоверно выше, чем в опытных группах.

Динамика щелочной фосфатазы у молодняка является процессом закономерным и обусловлена повышением активности остеобластов, что в свою очередь влечет повышение активности щелочной фосфатазы в сыворотке крови.

У животных а-амилаза является ключевым пищеварительным ферментом, принимающим участие в расщеплении сложных углеводов. При этом биологическая вариация амилазы, как всякого фермента, высокая, но уровень фермента в организме в целом постоянный [14]. У овец диапазон а-амилазы достаточно широк и составляет 20-98 ед/л.

Применяемые препараты в опытных группах оказали положительное влияние на активность а-амилазы. Наибольшая активность фермента отмечалась у ягнят после 2-го цикле применения эрготропиков и удерживалась на уровне 38,40-31,62 ед/л на протяжении всего эксперимента, превысив первоначальные данные в первой группе на 58,81% и второй опытной группе на 50,99% (р<0,01).

Значительное повышение активности а-амилазы у ягнят контрольной группы отмечалось одновременно с применением 1 цикла препаратов опытным группам животных, в дальнейшем отмечено снижение ее активности. Тем не менее, активность а-амилазы у ягнят опытных групп выше, чем в контрольной на 53,80-63,20% (р<0,01).

Совместно с исследованием активности а-амилазы анализируют и концентрацию липазы. Липаза важна для расщепления глицеридов высших жирных кислот и очень актуальна при кормлении подсосного молодняка.

После отъема ягнят от овец-матерей липаза в сыворотке крови сохранялась на высоком уровне - 22,56-25,75 ед/л. При переводе ягнят на дефинитивный корм во всех группах отмечалось постепенное снижение активности энзима. На финальном этапе исследований в контрольной группе активность липазы снизилась в 6,3 раза, в первой и второй опытных группах - в 5,3 раза (р<0,01).

Выраженное изменение активности энзимов после применения 2 цикла препаратов-эрготропиков по времени совпало с резким повышением температуры воздуха и началом пастбищного сезона.

У ягнят опытных групп активизировались процессы пищеварения, и, соответственно, повысилась активность трансаминаз. В тоже время в контрольной группе ягнят наблюдалось снижение активности АСТ и АЛТ, что также может свидетельствовать о снижении функции пищеварительных желез, обусловленной сменой рациона. Применение 3-го цикла эрготропиков, повышенная двигательная активность на пастбище и адаптация органов пищеварительной системы к изменившемуся рациону способствовали снижению активности АСТ в опытных группах и повышению в контрольной группе. В этот период активность фермента не имела достоверной разницы у ягнят опытных и контрольной групп и находилась на уровне 145,60148,00 ед/л. При дальнейшем наблюдении вследствие интенсивного роста, развития и повышения живой массы ягнят отмечено повышение активности АСТ и АЛТ. Аналогичная динамика активности наблюдалась при анализе ГГТ.

Относительно активности щелочной фосфатазы у молодняка известно, что ее концентрация выше, чем у взрослых животных. На эпюре (рис. 1) мы наблюдали достаточно стабильную ее концентрацию у ягнят опытных групп и выраженное повышение активности у ягнят контрольной группы. Высокая активность фермента может привести к нарушению процессов ремоделирования костной ткани и, в дальнейшем, вовлечению в патологический процесс иммунной системы.

Рисунок 1 – Динамика активности щелочной фосфатазы у ягнят контрольной и опытных групп, ед/л

У ягнят, питающихся материнским молоком, амилолитическая активность ниже, чем у взрослых животных. При переводе молодняка на дефинитивный рацион концентрация амилазы повышается и еще более увеличивается при пастбищном содержании (рис. 2, табл.). Постепенно активность а-амилаза достигает референсной величины, свойственной взрослым животным.

В тоже время активность липазы при переводе ягнят на стандартный рацион снижается. Процесс снижения липолитической активности более выражен у ягнят контрольной группы (рис. 2, табл.1).

Анализируя активность а-амилазы и липазы установлена реципрокность этих показателей, т.е. процесс происходит взаимосогласовано и противоположно направленно (рис. 2).

Рисунок 2 - Динамика активности а-амилазы и липазы у ягнят контрольной и опытных групп

Выводы. Проведенное исследование позволяет сделать выводы:

• -    у ягнят, получавших материнское молоко, высокая липолитическая активность, концентрация липазы в сыворотке крови составила 22,56-25,75 ед/л, при переводе ягнят на дефинитивный рацион содержание фермента

снизилось;

• -    у ягнят, находящихся на молочном вскармливании низкая амилолитическая активность, уровень а-амилазы составил 12,6122,22 ед/л, при переводе ягнят на стандартный рацион концентрация ее повысилась;

• -    у ягнят опытных групп активность

а-амилазы выше, чем у контрольной группы ягнят на 53,80-63,20%;

• -    у ягнят опытных групп в адаптационный период к дефинитивному рациону повышается активность АСТ, АЛТ, ГГТ; на финальном этапе активность этой группы ферментов ниже, чем в контрольной группе;

• -    в период активного роста ягнят активность щелочной фосфатазы больше, чем у

• взрослых животных;

• -    у ягнят опытных групп активность щелочной фосфатазы в течение всего эксперимента не превышала 478,00 ед/л в отличие от ягнят контрольной группы.

Следовательно, композиции препаратов-эрготропиков, примененные в опытных группах, способствовали нормализации активности ферментов, лучшему усвоению питательных веществ.