Статьи журнала - Сельскохозяйственная биология

Все статьи: 1833

Место обитания как определяющий фактор формирования микробиома рубца у северных оленей в арктической России

Место обитания как определяющий фактор формирования микробиома рубца у северных оленей в арктической России

Ильина Л.А., Лайшев К.А., Йылдырым Е.А., Филиппова В.А., Дуняшев Т.П., Дубровин А.В., Соболев Д.В., Новикова Н.И., Лаптев Г.Ю., Южаков А.А., Романенко Т.М., Вылко Ю.П.

Статья научная

Северный олень ( Rangifer tarandus ) географически изолирован от других подвидов жвачных семейства Cervidae , что предполагает формирование специфических микробных сообществ рубца у этого вида. Известно, что приуроченность к определенным экологическим условиям может оказывать значимое влияние на состав микробиоты рубца жвачных. В настоящей работе с применением молекулярно-биологического анализа впервые показано, что одним из ключевых факторов, влияющих на состав микробиома рубца у северного оленя, служит место обитания. Цель работы состояла в оценке региональных и половозрастных особенностей микробиома рубца северных оленей из различных природно-климатических зон Российской Федерации с использованием T-RFLP-анализа (terminal restriction fragment length polymorphism) и количественной ПЦР. Объектом исследования были 58 особей северных оленей ненецкой породы - телята (4-8 мес) и взрослые особи. Содержимое рубца северных оленей отбирали в летне-осенний период 2017 года ( n ≥ 3 из каждой возрастной группы) в Ямало-Ненецком автономном округе (АО) (п.г.т. Харп, лесотундровая природно-климатическая зона), Ненецком АО (п. Нельмин-Нос, тун-дровая природно-климатическая зона) и Мурманской области (ст. Лопарская, тундровая природно-климатическая зона). Также для анализа были отобраны образцы пастбищной растительности, составлявшие основу рациона северных оленей в каждом регионе. Общее количество бактерий, архей и грибов класса Neocallimastigales в содержимом рубца анализировали методом количественной ПЦР, состав бактериального сообщества - методом Т-RFLP. Основным детерминантом всех компонент микробного сообщества рубца северных оленей оказались региональные условия обитания, что, по всей видимости, обусловлено различиями в составе пастбищного рациона и эпизоотической ситуацией в стаде. Наименьшее сходство с другими регионами по составу содержимого рубца было выявлено у образцов из Мурманской области. Половозрастные различия животных оказались менее значимыми, однако вносили определенный вклад в соотношение микроорганизмов в рубце. Выявленные изменения микробиоты были неодинаковы у особей из разных регионов. Так, у северных оленей старше 2 лет из Мурманской области и Ямало-Ненецкого АО наблюдалось достоверное увеличение численности бактерий (p function show_abstract() { $('#abstract1').hide(); $('#abstract2').show(); $('#abstract_expand').hide(); }

Бесплатно

Метаболизм азотистых веществ у ремонтных бычков при разных источниках кормового белка в рационе

Метаболизм азотистых веществ у ремонтных бычков при разных источниках кормового белка в рационе

Ващекин Е.П.

Статья научная

В научно-хозяйственном опыте изучали интенсивность метаболизма азотистых веществ корма в рубце и организме ремонтных бычков черно-пестрой породы, содержавшихся на разных рационах (зерно гороха и люпина).

Бесплатно

Метаболизм азотсодержащих веществ и отложение белка у молодняка свиней при разном количестве протеина и аминокислот в рационе

Метаболизм азотсодержащих веществ и отложение белка у молодняка свиней при разном количестве протеина и аминокислот в рационе

Ниязов Н.С.-А., Еримбетов К.Т.

Статья научная

Изучали влияние различного содержания протеина и аминокислот в рационе молодняка свиней гибридного происхождения на обмен азотсодержащих метаболитов и качество мяса. Оценивали оптимальное количество этих веществ в рационе.

Бесплатно

Метаболизм альтернативных растительных источников протеина у овец мясо-сального направления продуктивности

Метаболизм альтернативных растительных источников протеина у овец мясо-сального направления продуктивности

Юлдашбаев Ю.А., Карамушкина С.В., Олесюк А.П., Демкина О.В.

Статья научная

Обеспечение животноводческой отрасли сельского хозяйства высокобелковыми кормами, позволяющими повысить интенсивность откорма, остается на сегодняшний день актуальным вопросом. При выращивании овец мясо-сального направления белковые добавки используют при интенсивном откорме баранчиков. Наряду с общепринятыми белковыми добавками в последнее время часто используются новые альтернативные источники протеина. Высокое содержание в семенах люпина и рапса сырого белка и жира позволяет им конкурировать с общепринятой белковой добавкой — соевым шротом. Однако для создания сбалансированных рационов на основе этих кормов необходимо оценить эффективность их метаболизма в организме жвачных животных. Научная новизна работы заключается в восполнении отсутствующих в литературе данных о характере панкреатической секреции в 12-перстной кишке овец при использовании в рационах семян люпина и рапса, а также корреляционных связях процессов кишечного пищеварения с показателями рубцовой ферментации. Цель настоящего исследования заключалась в сравнительной оценке влияния различных источников растительного протеина — соевого шрота, люпина и рапса — на показатели азотистого обмена и ферментативную активность пищеварительной системы овец эдельбаевской породы в период интенсивного откорма. Использование фистульных технологий позволяет оценить метаболизм предложенных альтернативных источников протеина на разных этапах пищеварения через анализ рубцовой жидкости, содержимого кишечника и сыворотки крови на показатели азотистого обмена и ферментативную активность. Комплексный подход к исследованию процессов рубцового и кишечного гидролиза питательных веществ, содержащихся в семенах люпина и рапса, позволил адекватно судить об их биологической доступности для баранчиков. Исследования проводили на трех баранчиках эдильбаевской породы в возрасте 5 мес с фистульной канюлей рубца и 12-перстной кишки. Для проведения хронического физиологического эксперимента использовали метод групп-периодов, при котором в каждый экспериментальный период животным скармливался рацион с частичной заменой концентратной части одним из экспериментальных кормов (соевый шрот, семена люпина и семена рапса), сбалансированных по сырому протеину (14 %). В контрольный период животные получали основной рацион, состоящий из 2 кг сена и 0,5 кг комбикорма ОК 80. Продолжительность каждого периода составила 14 сут, из них 7 сут адаптации и 7 сут учетных. Результаты исследования показали дифференцированное влияние разных растительных источников протеина на азотистый обмен. Самый высокий уровень мочевины как в рубцовой жидкости, так и в сыворотке крови регистрировали при введении в рацион семян люпина (+1,9 раза и +1,4 раза по сравнению с контролем) и соевого шрота (+1,7 раза и +1,3 раза по сравнению с контролем), в то время как при использовании рапса ее количество возрастало в меньшей степени. Аналогичная зависимость прослеживается и в других показателях белкового метаболизма, таких как общий азот рубцового содержимого и общий белок в сыворотке крови. При этом наблюдался высокий уровень корреляции содержания общего азота и активности трипсина дуоденального химуса (r = 0,94, p < 0,001). Липолитическая активность дуоденального химуса значительно увеличивается при введении в рацион семян рапса и составляет 1760,15±72,01 ед/л, что в 2,2 раза выше контрольных показателей. Активности липазы при введении в рацион альтернативных источников протеина коррелирует с уровнем триглицеридов в сыворотке крови (r = 0,76, p < 0,01) , что указывает на эффективность жирового обмена веществ. Таким образом, люпин и рапс представляют собой эффективные аналоги соевого шрота для эдильбаевских овец. Однако из-за их специфического влияния на азотистый и липидный обмен параметры рациона требуют индивидуальной корректировки.

Бесплатно

Метаболизм в семенах амаранта Amaranthus L. при воздействии электрохимически активированной воды

Метаболизм в семенах амаранта Amaranthus L. при воздействии электрохимически активированной воды

Пасько О.А.

Статья научная

Представленные в специальной литературе данные свидетельствуют о высокой эффективности применения электрохимически активированной воды (ЭХАВ) в сельском хозяйстве, но механизм ее влияния на биологические объекты практически не описан. Мы изучали влияние предпосевной обработки семян амаранта хвостатого Amaranthus caudatus L. ЭХАВ на активность дыхательных ферментов, содержание субстратов, энергию прорастания и силу роста. Установлено, что физико-химические изменения, происходящие в воде в результате электролиза, индуцируют в семенах различные метаболические процессы. Высокое содержание растворимых сахаров на фоне анаэробиоза в вариантах со смесью католита с анолитом и католитом способствует развитию гликолитических процессов, а накопленный пул метаболитов позволяет использовать их в более разнообразных химических превращениях. Повышенное содержание гормонов ускоряет ростовые процессы, обеспечивает усиленное деление и растяжение клеток, интенсивное прохождение начальных стадий развития растения (увеличение энергии прорастания и силы роста семян).

Бесплатно

Метаболизм витамина а и бесплодие у высокопродуктивных молочных коров при несбалансированности рационов

Метаболизм витамина а и бесплодие у высокопродуктивных молочных коров при несбалансированности рационов

Порфирьев И.А.

Статья научная

В двух племенных хозяйствах проводили комплексную диспансеризацию высокопродуктивных молочных коров голландской, черно-пестрой и холмогорской пород в связи с бесплодием. Выявили нарушения метаболизма витамина А, белкового, углеводного, липид-ного, фосфорно-калъциевогр обмена, функции печени, ацидоз вследствие несбалансированности рационов по питательным веществам и использования кормов низкого качества.

Бесплатно

Метаболизм свинца и механизмы его цитотоксического действия в организме млекопитающих

Метаболизм свинца и механизмы его цитотоксического действия в организме млекопитающих

Мирзоев Э.Б., Кобялко В.О., Полякова И.В., Губина О.А.

Статья обзорная

В России загрязнение окружающей среды соединениями свинца считается наиболее распространенным (В.В. Снакин, 1998). Изучение механизмов влияния, закономерностей поступления в организм, последующего распределения и выведения этого токсичного тяжелого металла необходимо для обоснования допустимых пределов его воздействия на млекопитающих и оценки биологических эффектов. Эти данные постоянно пополняются, а их обобщение требует актуализации с учетом изменения климатических и экологических условий, антропогенных воздействий, расширения географии наблюдений. Процесс всасывания свинца в желудочно-кишечном тракте (ЖКТ) млекопитающих зависит от проницаемости мембраны эпителиальных клеток кишечника. На интенсивность всасывания влияют физико-химические свойства (концентрация, размер частиц, минералогический состав, растворимость соединения в жидкой среде ЖКТ, величина ионного потенциала, атомная масса) и физиологические особенности организма (пол, возраст, живая масса, обмен веществ, беременность, лактация), а также состав рациона и содержание в нем протеина, клетчатки, кальция, цинка, железа, марганца и витамина D (J.A...

Бесплатно

Метаболиты автотрофных и гетеротрофных листьев амаранта Amaranthus tricolor L. сорта Early splendor

Метаболиты автотрофных и гетеротрофных листьев амаранта Amaranthus tricolor L. сорта Early splendor

Гинс М.С., Гинс В.К., Мотылева С.М., Куликов И.М., Медведев С.М., Пивоваров В.Ф.

Статья научная

Важное направление системной биологии (метаболомики) - изучение состава и свойств низкомолекулярных метаболитов сельскохозяйственных растений с разным способом питания. Использование метаболомных технологий расширяет возможности анализа биохимических изменений в составе и структурных модификациях метаболитов, происходящих при переходе с автотрофного способа питания на гетеротрофный. Большинство фотосинтезирующих растений способно питаться автотрофно, однако в их жизни есть периоды появления бесхлорофилльных органов, которые питаются за счет органических веществ, запасенных ранее. Так, среди растений вида Amaranthus tricolor L. встречаются сорта, листья которых различаются по способу питания. Например, на растениях сорта Early Splendor в конце вегетативной фазы наряду с зеленоокрашенными фотосинтезирующими листовыми пластинками образуются ярко окрашенные красные гетеротрофные листья. Сравнительное изучение состава низкомолекулярных метаболитов в этих листьях актуально для понимания взаимосвязи гетерогенного и автотрофного способов питания в целом растении. В настоящей работе при метаболомном анализе водных и спиртовых экстрактов листьев амаранта сорта Early Splendor с использованием метода газовой хромато-масс-спектрометрии впервые установлены существенные качественные различия состава метаболитов в автотрофных и гетеротрофных листьях. В составе низкомолекулярных метаболитов идентифицированы как неспецифические (общие для разных способов питания), так и специфические (характерные для каждого из них в отдельности). Цель работы - сравнительное изучение состава низкомолекулярных метаболитов и выявление новых биологически активных метаболитов-антиоксидантов в гетеротрофных и автотрофных листьях амаранта сорта Early Splendor. Эксперименты проводили в 2017-2019 годах. Объектом исследования были растения амаранта сорта Early Splendor в фазу конец цветения-начало формирования семян. Растения выращивали в пленочной теплице Федерального научного центра овощеводства. Материалом служили свежие красноокрашенные гетеротрофные листья, сформированные на верхушке главного побега, и нижележащие фотосинтезирующие листья растения. Исследовали листья с полностью сформированной листовой пластинкой. Листья измельчали и проводили экстракцию 96 % этанолом или дистиллированной водой при соотношении 1:10 (навеска листьев:экстрагент) и температуре 24 °С в течение 30 мин. Анализ метаболитов выполняли методом газовой хромато-масс-спектро-метрии на хроматографе JMS-Q1050GC («JEOL Ltd», Япония). По библиотечным масс-спект-рам базы NIST-5 National Institute of Standards and Technology (США) идентифицировали 87 метаболитов, из которых в гетеротрофных листьях содержалось 19 веществ в водных экстрактах и 38 - в спиртовых, тогда как в фотосинтезирующих листьях было определено соответственно 21 и 57 веществ. В водных и спиртовых экстрактах обнаружили 29 одинаковых метаболитов. В гетеротрофных и автотрофных листьях амаранта вида сорта Early Splendor впервые был выявлен сквален (C30H50) - биологически активное соединение, которое проявляет антиоксидантные свойства. Также в гетеротрофных листьях идентифицировано соединение монопеларгонин (mono-nonanoin) (C15H11O7), который служит промежуточным продуктом o-гликозилирования флавоноидов, относится к фенольным соединениям и обладает высокой антиоксидантной активностью. Были идентифицированы одинаковые метаболиты, характерные для листьев амаранта с разным типом питания, что позволяет сделать предположение о тесном взаимодействии двух способов питания в период появления, роста и развития гетеротрофных листьев. При этом фотосинтезирующие листья служили донорами ключевых метаболитов для гетеротрофных листьев, тогда как последние были не только акцепторами, но и сами могли синтезировать и модифицировать метаболиты, необходимые для построения клетки. Богатый состав углеводов, незаменимых аминокислот, липидов и органических кислот, идентифицированных в фотосинтезирующих листьях, обусловливает использование воспроизводимой листовой биомассы в качестве источника антиоксидантов и биологически активных веществ. Следует подчеркнуть, что не все метаболиты удалось идентифицировать. Тем не менее выявленный нами набор метаболитов, поступающих из фотосинтезирующих листьев, позволяет предположить, что этих веществ достаточно для построения и функционирования клеток и тканей гетеротрофных листьев.

Бесплатно

Метаболические параметры и интенсивность метанообразования в рубцовой жидкости in vitro при тестировании рационов с добавками растительных препаратов и CoCl2

Метаболические параметры и интенсивность метанообразования в рубцовой жидкости in vitro при тестировании рационов с добавками растительных препаратов и CoCl2

Шейда Е.В., Рязанов В.А., Дускаев Г.К.

Статья научная

Для получения экологически безопасной продукции при выращивании крупного рогатого скота необходимо включать в рационы животных биологически активные вещества, повышающие эффективность использования питательных компонентов корма. Некоторые из этих соединений применяются в качестве модификаторов функции рубца (чаще по отдельности, а не в комплексах). В настоящей работе впервые описаны изменения метаболических параметров в рубцовой жидкости бычков казахской белоголовой породы в тестах in vitro с образцами рациона, содержащими добавки фитопрепаратов и хлорида кобальта, определены их наиболее эффективные сочетания и дозировки. При использовании комплекса Artemisiae absinthil herba (2,0 г/кг СВ) и CoCl2 (1,5 мг/кг СВ) было установлено повышение переваримости сухого вещества, увеличение активности пищеварительных ферментов и содержания метаболитов в рубцовой жидкости, а также снижение образования метана. Использование комплекса Salviae folia (1,6 г/кг СВ) и CoCl2 (1,5 мг/кг СВ) привело к максимальному снижению образования метана. Цель работы - изучить влияние растительных препаратов и хлорида кобальта отдельно и совместно на изменение метаболических параметров в рубцовой жидкости бычков методом in vitro. Опыты проводили в 2021 году в ЦКП БСТ РАН (г. Оренбург). У бычков ( Bos taurus taurus ) казахской белоголовой породы ( N = 4, средняя масса 250-265 кг, возраст 9-10 мес) через хроническую фистулу рубца отбирали пробы рубцовой жидкости (РЖ) спустя 12 ч после кормления. Для тестирования in vitro c РЖ были приготовлены I контрольный рацион, включавший 70 % грубых кормов (сено луговое разнотравное) и 30 % концентрированных кормов (ячмень дробленый), и пять опытных образцов, в состав которых входили дополнительные компоненты: II - CoCl2 (1,5 мг/кг СВ; ООО «НПК «Асконт+», Россия) , III - Salviae folia (1,6 г/кг СВ), IV - Artemisiae absinthil herba (2,0 г/кг СВ), V - Salviae folia (1,6 г/кг СВ) + CoCl2 (1,5 мг/кг СВ), VI - Artemisiae absinthil herba (2,0 г/кг СВ) + CoCl2 (1,5 мг/кг СВ). Каждый образец РЖ от 4 животных тестировали 4-кратно ( n = 16). Образцы корма массой 500 мг раскладывали в полиамидные мешочки, которые затем помещались в инкубатор в смесь буферного раствора с рубцовой жидкостью на 48 ч при 39,5 °С. По окончании инкубации образцы промывали и высушивали при температуре 60 °С до постоянной массы. Вычисляли коэффициент переваримости сухого вещества in vitro. Проводили отбор проб воздуха отдельно из каждой емкости для определения содержания метана на приборе Кристаллюкс-2000М (ООО «НПФ «Мета-хром», Россия) методом газовой хроматографии. Количество летучих жирных кислот (ЛЖК) определяли методом газовой хроматографии с пламенно-ионизационным детектированием на газовом хроматографе Кристаллюкс-4000М. Анализ содержания различных форм азота проводили на оборудовании фирмы «Millab» (Италия) методом Кьельдаля. Активность амилазы измеряли по Смиту-Рою в модификации по Аносону для определения высокой активности фермента в панкреатическом соке. Активность протеолитических ферментов оценивали по количеству расщепленного казеина, очищенного по Гаммерстену, при колориметрическом контроле (λ = 450 нм). Сухое вещество биосубстратов определяли методом высушивания до постоянной массы при 60 °С. Установлено, что фитовещества Salviae folia и Artemisiae absinthil herba смещали ферментацию в сторону пропионата и бутирата. Присутствие A. absinthil herba усиливало интенсивность метаболизма азота в РЖ, при этом отмечали увеличение количества общего азота на 11,6 %, небелкового азота - на 144,3 %, аммиачного азота - на 71,4 %, мочевинного - на 31,7 % (р £ 0,05). При добавлении фитовеществ значительно увеличивалась активность амилазы, протеаз, концентрация летучих жирных кислот, однако повышалось количество метана. Комбинации фитовеществ и хлорида кобальта оказывали положительное влияние на процессы ферментации in vitro. Максимальный эффект был выявлен при использовании A. absinthil herba и хлорида кобальта: зафиксировано повышение переваримости сухого вещества при снижении образования метана на 2,1 %, увеличении активности пищеварительных ферментов, а также концентрации летучих жирных кислот в РЖ.

Бесплатно

Метаболические эффекты включения сока фиолетового картофеля (Solanum tuberosum L.) в рацион крыс (пилотное исследование)

Метаболические эффекты включения сока фиолетового картофеля (Solanum tuberosum L.) в рацион крыс (пилотное исследование)

Черницкий А.Е., Оберюхтин Д.А., Шанина Е.П., Кузнецова Е.О., Опарина О.Ю., Белоусов А.И.

Статья научная

Клубни картофеля (Solanum tuberosum L.) - важный продукт питания с высоким содержанием витаминов С, В, макро- (калий, фосфор, кальций, магний) и микроэлементов (железо, йод, селен, цинк), также содержащий сложные углеводы и незаменимые аминокислоты. У сортов картофеля с пигментированной мякотью клубни богаты каротиноидами, токоферолами, липоевой кислотой, L-тирозином и полифенолами. Однако биологическое действие картофельного сока практически не описано. В настоящей работе мы впервые охарактеризовали изменения белкового, липидного, минерального обмена, уровня глюкозы в крови, активности органоспецифичных ферментов, вызываемые добавлением сока из неочищенных клубней картофеля с фиолетовой мякотью в рацион белых крыс. Целью работы было изучить метаболические эффекты, вызываемые включением сока из неочищенных клубней картофеля с фиолетовой мякотью в рацион белых крыс. В эксперименте использовали три группы нелинейных крыс-самцов по 6 особей в каждой (возраст 9-10 нед, масса 278,7±5,28 г). В опытной группе каждое утро в течение 1 мес животные получали сок из клубней картофеля с фиолетовой мякотью, крысы из групп положительного и отрицательного контроля - соответственно сок из клубней обычного столового картофеля и питьевую воду; через 1 мес всех крыс возвращали на общевиварный рацион. Образцы крови для исследований получали в начале эксперимента (фон), через 30 сут (действие) и 60 сут (последействие). В плазме крови определяли содержание калия, натрия, кальция, магния, железа, фосфора, хлоридов, бикарбонатов, общего белка, альбуминов, глобулинов, мочевины, мочевой кислоты, креатинина, общего холестерина, триглицеридов, глюкозы, активность аспартатаминотрансферазы, аланинаминотрансферазы, щелочной фосфатазы, γ-глутамилтранспептидазы, общей креатинкиназы, лактатдегидрогеназы, холинэстеразы, глутаматдегидрогеназы и липазы (биохимический анализатор Chem Well-2910 Combi, «Awaveness Technology», США; наборы реактивов AO «Витал Девелопмент Корпорэйшен», Россия), определяли осмотическую резистентность эритроцитов, количественное содержание малонового диальдегида и общий антиоксидантный статус (спектрофотометр BioMate 160 UV-Vis, «Thermo Fisher Scientific», США; коммерческие наборы AO «Вектор-Бест», Россия). Данные обрабатывали с использованием непараметрического критерия Краскела-Уоллеса с процедурой множественных апостериорных попарных сравнений методом Двасс-Стил-Кричлоу-Флигнера (p function show_abstract() { $('#abstract1').hide(); $('#abstract2').show(); $('#abstract_expand').hide(); }

Бесплатно

Метаболический и антиоксидантный профиль коз (Capra hircus L.) Нубийской и карачаевской пород

Метаболический и антиоксидантный профиль коз (Capra hircus L.) Нубийской и карачаевской пород

Селионова М.И., Трухачев В.И., Айбазов А.М.М., Боголюбова Н.В., Сермягин А.А., Рыков Р.А., Зиновьева Н.А., Загарин А.Ю.

Статья научная

При оценке состояния здоровья животных при разных физиологических состояниях и влиянии различных факторов необходимо знать референтные значения биохимических показателей и параметров антиоксидантной защиты (АОЗ). Кроме того, для понимания механизма функционирования звеньев антиоксидантной системы организма важно исследовать характер связи между ними. В настоящей работе впервые установлено, что метаболический и антиоксидантный профиль у коз комбинированного направления продуктивности зависит от возраста и числа лактаций, а также от зоны разведения относительно высоты над уровнем моря. С ростом числа лактаций у животных повышались показатели, связанные с окислительным стрессом, наряду с активацией системы антиоксидантной защиты. Нашей целью была оценка биохимического и антиоксидантного статуса коз в зависимости от породы и числа лактаций, а также определение корреляции между биохимическими показателями крови и индикаторами антиоксидантной системы организма коз карачаевской и нубийской пород. Работу проводили в 2023 году на лактирующих нубийских (n = 43) и карачаевских (n = 93) козах (Capra hircus L.). Карачаевские козы относятся к мясомолочному направлению продуктивности, нубийские - к молочно-мясному. Животные разных пород в соответствии с числом лактаций (1-я, 2-я, 3-я и 4-я) были разделены на четыре группы. Образцы крови для исследования отбирали в летний период. Карачаевские козы содержались на горных пастбищах Северного Кавказа (1000 м над уровнем моря), нубийские - в лесостепной зоне Московской области (180 м над уровнем моря). Система содержания первых пастбищно-стойловая, вторых - стойлово-пастбищная. У коз в рационах, состоявших преимущественно из объемистых кормов, не было компонентов с выраженными антиоксидантными свойствами. Биохимические показатели крови определяли на автоматическом анализаторе Chem-Well («Awareness Technology», США) с использованием реактивов фирм «Analyticon Biotechnologies AG» (Германия), «Spinreact S.A.» (Испания) и АО «Диакон» (Россия), показатели перекисного окисления липидов (ПОЛ) - по концентрации продуктов, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой (ТБК-АП), с использованием наборов ООО «Агат-Мед» (Россия), АОЗ - по активности церулоплазмина (ЦП) с использованием метода Ревина, суммарную концентрацию водорастворимых антиоксидантов (СКВА) - амперометрическим методом на приборе Цвет Яуза-01-АА с детектором (НПО «Химавтоматика», Россия), соотношение ТБК-АП к ЦП - расчетным методом. Статистическую обработку результатов проводили с применением программных пакетов Microsoft Office Excel 2003. Влияние факторов на изменчивость признаков оценивали методом многофакторного дисперсионного анализа (MANOVA) с использованием уравнения обобщенных линейных моделей (GLM). Установлено, что фактор породной принадлежности с высокой достоверностью влияет на концентрацию мочевины, билирубина, фосфора, церулоплазмина, с меньшей - на активность аланинаминотрансферазы (АЛТ), содержание кальция, ТБК-АП, общего белка, глобулинов, фосфолипидов и холестерина. В крови карачаевских коз было выше содержание общего белка, глобулинов, мочевины, активность АЛТ, концентрация общего билирубина, кальция, фосфора, ТБК-АП, соотношение ТБК-АП/ЦП (от 4,96 до 85,90 %, p ≤ 0,05, p ≤ 0,001), нубийских - церулоплазмина (80,0 %, p ≤ 0,001), холестерина и фосфолипидов (8,64 и 9,58 %). Установлена динамика биохимических показателей и индикаторов АОЗ для коз комбинированного направления продуктивности в зависимости от числа лактаций. Показатели белкового обмена и содержание магния в сыворотке крови были минимальными в 1-ю лактацию, максимальными - в 4-ю. Активность аспартатаминотрансферазы (АСТ), концентрация ТБК-АП, соотношение ТБК-АП/ЦП значительно возрастали во 2-ю лактацию, затем в 3-ю и 4-ю снижались до значений в 1-ю лактацию. Различия в концентрации фосфора, церулоплазмина и активности щелочной фосфатазы были противоположными: снижение во 2-ю лактацию, повышение - в последующие. СКВА была выше в первые две лактации и снижалась в 3-ю и 4-ю. Характер изменений содержания ТБК-АП и индикаторов АОЗ (СКВА и ЦП) свидетельствовал об особенностях их взаимодействия для обеспечения антиоксидантного гомеостаза в организме коз в разные возрастные периоды. Корреляционный анализ выявил для обеих пород положительную связь между концентрацией ТБК-АП и количеством альбуминов (r = +0,34…+0,44, p ≤ 0,01), холестерина (r = 0,30-0,43, p ≤ 0,01), фосфолипидов (r = 0,30-0,41, p ≤ 0,01) и кальция (r = 0,35-0,64, p ≤ 0,01, p ≤ 0,001), отрицательную - между содержанием церулоплазмина и СКВА (r от -0,30 до -0,40, p ≤ 0,01). Результаты исследования важны для формирования базы данных референсных интервалов биохимических показателей крови и индикаторов АОЗ для коз комбинированного направления продуктивности разного возраста и пород.

Бесплатно

Метаболический профиль беременных коров с разным типом этологической активности

Метаболический профиль беременных коров с разным типом этологической активности

Смирнова Е.В., Нежданов А.Г., Рецкий М.И., Братченко Э.В., Папин Н.Е., Степанов А.В., Шушлебин В.И., Чусова Г.Г.

Статья научная

Известно, что высокопродуктивные животные крайне чувствительны к изменениям условий содержания и эксплуатации, что влечет за собой глубокие нарушения в функциях эндокринной, иммунной, репродуктивной и других систем организма. Интеграция адаптационных реакций у животных, которую осуществляет центральная нервная система, зависит от особенностей высшей нервной деятельности. У глубокостельных коров черно-пестрой голштино-фризской породы в возрасте 4-6 лет со среднегодовой молочной продуктивностью за предшествующую лактацию 7-8 тыс. кг ( n = 82) и разным типом поведения изучали комплекс биохимических и гормональных показателей крови, характеризующих метаболический статус и стрессоустойчивость. В сыворотке и цельной крови определяли концентрацию белков, мочевины, креатинина, общих липидов, холестерина, триглицеридов, глюкозы, молочной и пировиноградной кислот, Ca, P, Mg, Zn, Mn, Cu, Fe, витаминов А, Е, связанного с белком йода, малонового диальдегида, общих иммуноглобулинов, активность аспартатаминотрансферазы, аланинаминотрансферазы, γ-глутамил-трансферазы, щелочной фосфатазы, глутатионпероксидазы, каталазы, бактерицидную активность, содержание половых (прогестерон, эстрадиол-17β, тестостерон), кортикостероидных (кортизол) и тиреоидных (тироксин, три-йодтиронин) гормонов. Также анализировали характер течения родов и послеродового периода. Показано, что по активности функционирования физиологических систем организма идентичными оказываются инфрапассивные и ультраактивные животные (крайние типы), а также активные и пассивные животные (средние типы). Коровы со средними типами поведения более устойчивы к родовым и послеродовым патологиям. Следовательно, крупногрупповое содержание животных, периодическое перемещение их из одной технологической группы в другую без учета типологических особенностей нервной системы и поведенческих реакций приводит к снижению репродуктивного (и продуктивного) потенциала.

Бесплатно

Метаболический профиль и спермопродукция у голштинских быков-производителей зарубежной селекции при содержании в разных климатических и геохимических условиях в России и Казахстане

Метаболический профиль и спермопродукция у голштинских быков-производителей зарубежной селекции при содержании в разных климатических и геохимических условиях в России и Казахстане

Абилов А.И., Комбарова Н.А., Амерханов Х.А., Шеметюк С.А., Шамшидин А.С., Мымрин С.В., Пыжова Е.А., Боголюбова Н.В., Гудилина А.А., Абилова С.Ф., Комбаров П.Г., Митяшова О.С.

Статья научная

В современных условиях потенциал высокопродуктивных животных, приспособленных к промышленной технологии содержания, должен использоваться наиболее эффективно и не зависеть от географического положения и агроклиматических ресурсов региона. В представляемом нами исследовании установлено, что отрицательный эффект региональных климатических и геохимических факторов можно минимизировать при соблюдении всех технологических регламентов. Полученные результаты расширяют представления об особенностях метаболизма быков-производителей в различных геоклиматических условиях умеренной циркуляционной зоны между 55.86 и 51.18° с.ш., что может представлять интерес для практики разведения голштинской породы в странах с аналогичными природными факторами. Мы сравнили адаптационный статус быков голштинской породы ( n = 122) зарубежной селекции в возрасте 3-9 лет в условиях Центральной России (АО «Головной центр по воспроизводству сельскохозяйственных животных», Московская обл.), Среднего Урала (ОАО «Уралплемцентр», Свердловская обл.) и Северного Казахстана (РЦПЖ АО «АсылТулик», Акмолинская обл.). Был проведен биоэлементный мониторинг по содержанию Ca, P, Mg, Ca:P, Fe, хлоридов, Se, Cu, Zn. Белково-липидный обмен и активность ферментов оценивали по содержанию в крови общего белка, альбуминов, глобулинов, мочевины, креатинина, билирубина общего, триглицеридов, холестерина, аланинаминотрансферазы (АЛТ), аспартатаминотрансферазы (АСТ) и щелочной фосфатазы, секрецию эндогенных гормонов - по содержанию тестостерона, эстрадиола, тироксина, кортизола. Спермопродуктивность оценивали по объему эякулята, концентрации сперматозоидов в эякуляте, числу сперматозоидов в эякуляте. Климатические и геохимические характеристики регионов: АО «ГЦВ» - умеренно-континентальный климат, дерново-подзолистые почвы, ОАО «Уралплемцентр» - резко-континентальный климат, коренные скальные породы с песчано-глинистыми и дерново-подзолистыми почвами; АО РЦПЖ «АсылТулик» расположен вблизи города Нур-Султан в Центрально-Северной части Республики Казахстан, суровый резко-континентальный климат, темно-каштановые почвы. В результате межрегионального исследования установлено, что макроэлементный баланс быков-производителей находился в пределах допустимых норм и не имел достоверных различий между регионами: содержание в крови Са - 2,34-2,53 ммоль/л, P - 1,47-2,01 ммоль/л, Ca:P - 1,20-1,65, Mg - 0,79-0,98 ммоль/л. Обеспеченность животных железом в Московском регионе находилась в пределах нормы (23,82±6,18 мкмоль/л), в Северном Казахстане проходила по верхней границе нормы (30,74±6,97 мкмоль/л), на Среднем Урале превышала норму (40,32±7,30 мкмоль/л). Баланс Se (0,72-1,13 мкмоль/л) и Cu (12,6-16,0 ммоль/л) находился в допустимых пределах. На землях Москворецко-Окской провинции (АО «ГЦВ») обеспеченность производителей Zn составила 65,8 %, в зоне сухой степи на темно-каштановых почвах (АО РЦПЖ «Асыл-Тулик») - 95,9 % от минимального нормального значения. Повышенную в 2 раза активность ферментов в крови (по коэффициенту де Ритиса) выявили у быков в Московском регионе и в Северном Казахстане. У всех быков-производителей отмечали достаточную концентрацию как общего белка, так и его фракций. Излишнее количество белка с кормом получали производители Московского региона, о чем свидетельствует концентрация мочевины 7,57±2,82 ммоль/л (по верхней границе нормы) и креатинина 147,45±37,94 мкмоль/л. У производителей из Северного Казахстана отмечен синдром перегрузки железом (30,74±6,97 мкмоль/л) на фоне повышенного билирубина (9,15±3,42 мкмоль/л). Баланс стероидных гормонов свидетельствовал о легком дефиците тестостерона (39,17±5,06 нмоль/л) и избытке кортизола (226,75±45,62 нмоль/л) у быков-производителей из Московского региона по сравнению с Уралом (соответственно 50,36±5,80 и 138,81±21,48 нмоль/л) и Казахстаном (52,79±4,14 и 190,50±50,30 нмоль/л) (разница статистически не достоверна). Среднее содержание тироксина находилось в пределах физиологически допустимой нормы - от 66,65±3,52 нмоль/л на Среднем Ура

Бесплатно

Метаболический статус и молочная продуктивность коров при применении тканевого биостимулятора из отходов убоя пантовых оленей

Метаболический статус и молочная продуктивность коров при применении тканевого биостимулятора из отходов убоя пантовых оленей

Пушкарев И.А., Афанасьева А.И., Куренинова Т.В., Шаньшин Н.В., Хаперский Ю.А., Мальцева О.Е., Бурцева С.В., Чекункова Ю.А.

Статья научная

Интенсивность и направленность обмена веществ в период лактации во многом определяют молочную продуктивность коров. Тканевые биостимуляторы оптимизируют обменные процессы посредством активации нейрогуморальных механизмов регуляции и положительно влияют на лактогенез и лактопоэз. Биоактивные препараты получают из разнообразного сырья с применением различных технологий. В представленном исследовании впервые установлено, что новый тканевой биостимулятор на основе вторичных продуктов оленеводства при 4-кратном введении в сухостойный период и в период раздоя положительно влияет на белковый и липидный обмен у лактирующих коров. Доказано, что применение этого биостимулятора по предлагаемой нами схеме приводит к росту суточных удоев молока, выходу молочного белка и жира за первые 60 сут лактации. Цель работы заключалась в оценке влияния разработанного тканевого биостимулятора, изготовленного из боенских отходов пантовых оленей, на показатели метаболизма и молочную продуктивность коров. Исследования проводили на коровах ( Bos taurus taurus ) приобского типа черно-пестрой породы в период сухостоя и начала лактации (АО Учхоз «Пригородное», г. Барнаул, Алтайский край, 2019 год). Сформировали две группы ( n = 10) сухостойных коров-аналогов в возрасте III лактации и старше за 55-60 сут до предполагаемого отела. Коровам контрольной группы вводили физиологический раствор: в период сухостоя - за 55-60 сут до предполагаемого отела 4-кратно в дозе 22,5 мл/гол. с интервалом 14 сут; в период раздоя - с 15-х сут лактации в той же дозе и кратности. Животным опытной группы вводили тканевый биостимулятор по аналогичной схеме. Опытная партия тканевого биостимулятора была изготовлена из субпродуктов и боенских отходов пантовых оленей (А.С. РФ № 2682641). Материалом для приготовления препарата служили мезентериальные лимфоузлы и средостения, селезенка, печень, матки с плодами (2-3 мес), плацента, отобранные в асептических условиях во время убоя здоровых особей. При постановке коров на опыт, а также на 15-е и 60-е сут лактации брали кровь из хвостовой вены в вакуумные пробирки (с активатором сгустка). Содержание общего белка, альбуминов, холестерина, триглицеридов, глюкозы определяли на автоматическом биохимическом анализаторе ChemWell Combo 2910 («Awareness Technology, Inc.», США), количество глобулинов, альбумин-глобулиновый коэффициент и соотношение холестерина к триглицеридам - расчетным методом. Суточный удой молока учитывали на 15-е, 30-е и 60-е сут лактации контрольной дойкой, надой молока за 60 сут лактации - расчетным методом. Пробы молока отбирали на 15-е и 60-е сут лактации. Содержание в молоке белка и жира определяли на анализаторе MilkoScan FT 120 («Foss Electric», Дания), выход молочного белка и жира за 60 сут лактации - расчетным методом по общепринятой формуле. Введение тканевого биостимулятора способствовало активации метаболизма и повышению показателей пластического и энергетического обмена относительно контроля: содержания в сыворотке крови общего белка, альбуминов и холестерина - соответственно на 3,0-6,4 (p function show_abstract() { $('#abstract1').hide(); $('#abstract2').show(); $('#abstract_expand').hide(); }

Бесплатно

Метаболический статус коров при задержке внутриутробного развития эмбриона и плода

Метаболический статус коров при задержке внутриутробного развития эмбриона и плода

Нежданов А.Г., Михалв В.И., Чусова Г.Г., Папин Н.Е., Черницкий А.Е., Лозовая Е.Г.

Статья научная

Внутриутробная задержка развития эмбриона и плода (ВЗРП) у коров - это полифакторный синдром, который определяется как несоответствие размеров формирующегося эмбриона и плода срокам их гестации. Принято считать, что процессы роста и развития эмбриона и плода у коров обусловлены морфофункциональной полноценностью половых клеток, участвующих в оплодотворении, и в основном регулируются характером материнского питания, состоянием метаболического гомеостаза и половых органов матери. В 2013 году в условиях крупного молочного комплекса (ООО «Агротех-Гарант» Нащекино, Аннинский р-н, Воронежская обл.) у 53 коров красно-пестрой породы со среднегодовой молочной продуктивностью 6,0-6,5 тыс кг мы исследовали показатели обмена белков (содержание общего белка, белковых фракций, мочевины в сыворотке крови), углеводов (концентрация глюкозы, молочной и пировиноградной кислот в крови), витаминов (А, Е, С), гормонального гомеостаза (содержание прогестерона, дегидроэпиандростерон-сульфата, тестостерона, эстрадиола, кортизола, трийодтиронина в сыворотке крови), эндогенной интоксикации (концентрация среднемолекулярных пептидов, мочевины, креатинина, активность трансаминаз в сыворотке крови) и системы оксида азота на 38-40-е, 60-65-е, 110-115-е и 230-240-е сут гестации, а также влияние этих показателей на развитие эмбриона и плода. Забор крови осуществляли в утренние часы до кормления из яремной вены. Состояние половых органов и метрических показателей эмбриона и плода оценивали методом трансректальной пальпации и эхографии с использованием ультразвукового сканера «Easi-Scan-3» с линейным датчиком 4,5-8,5 МГц («BCF Technology Ltd», Великобритания). Определяли диаметр рога-плодо-вместилища, размер плацентом, диаметр корпуса и копчико-теменной размер зародыша. Критерием задержки его развития в возрасте 38-40 сут служил копчико-теменной размер 12-16 мм и диаметр корпуса 7-9 мм, 60-65 сут - соответственно 25-45 мм и 12-16 мм, 110-115 сут - диаметр рога-плодовместилища 9-15 см и плацентом 10-17 мм. На 230-240-е сут гестации в опыт включали тех животных, у которых ВЗРП была диагностирована в период 38-40 сут беременности. Установлено, что на ранних этапах формирования зародыша (38-40-е сут) задержка его развития была связана с гипопрогестеронемией, обусловленной гипоплазией желтого тела. Помимо гипопрогестеронемии, у коров с ВЗРП наблюдали снижение содержания в сыворотке крови кортизола на 36,9 % (p 2- + NO3-) в сыворотке крови на 23,9 % (p

Бесплатно

Метаболомика - современный подход при изучении адаптации растений картофеля к биотическому и абиотическому стрессу

Метаболомика - современный подход при изучении адаптации растений картофеля к биотическому и абиотическому стрессу

Пузанский Р.К., Емельянов В.В., Шишова М.Ф.

Статья обзорная

Геномные и протеомные исследования в значительной степени расширили возможности решения спектра задач по расшифровке механизмов регуляции роста и развития растений в постоянно изменяющихся условиях окружающей среды. Не менее значимым стало появление еще одного направления системной биологии - метаболомики, сфокусированной на изучении динамики низкомолекулярных соединений, которые можно рассматривать как результат совокупности метаболических процессов в организме. Интенсивность этих процессов подвержена существенным изменениям при действии как биотических, так и абиотических стрессовых факторов. Исследования по метаболомному анализу проводятся не только на модельных объектах, но и на сельскохозяйственных растениях. К их числу относится картофель, входящий в десятку наиболее востребованных культур. Представленный обзор ставит целью обобщить имеющиеся в литературе данные о выявленных с помощью метаболомного подхода системных биохимических перестройках при действии патогенных вирусов и микроорганизмов, насекомых, а также абиотических стрессоров на растения картофеля ( Solanum tuberosum L.). Данные последних лет указывают на то, что метаболомный анализ позволяет не только охарактеризовать развитие вирусных и грибных болезней картофеля, но и тестировать устойчивость к ним у различных видов и сортов (H. Hamzehzarghani с соавт., 2016; T. Stare с соавт., 2015; H. Tai с соавт., 2014; S. Tomita с соавт., 2017). Для ряда соединений вторичного метаболизма показаны значимые изменения. Метаболомный подход достаточно чувствителен и для выявления перестроек при действии абиотических факторов. В обзоре рассмотрены метаболические перестройки, непосредственно связанные с дегидрированием клетки, в том числе при воздействии осмотических и температурных стрессоров. Особое значение имеет содержание аминокислот и сахаров. Однако требуется ряд дополнительных исследований, которые позволят выявить, насколько изменятся метаболические перестройки при совместном действии нескольких факторов, например недостатка влаги и повышения температуры (V. Arbona с соавт., 2013; M. Drapal с соавт., 2017; R.D. Hancock с соавт., 2014). Абсолютное большинство данных получено при изучении метаболома различных вегетативных органов растений картофеля. К сожалению, метаболомные особенности генеративных органов в настоящее время не изучены. Полностью отсутствуют сведения о метаболомном профилировании формирования пыльцы, в том числе у форм картофеля с цитоплазматической мужской стерильностью. Это указывает на актуальность развития обсуждаемого направления в исследовании метаболома у картофеля. Дальнейшая стандартизация протоколов метаболомного анализа и методов обработки полученных результатов позволит использовать метаболомику не только как важнейший компонент фундаментальных исследований, но со временем и как основу мониторинга коллекционных образцов, создаваемых сортов и гибридов картофеля. Анализ современных данных свидетельствует о перспективности такого подхода для фенотипирования различных генотипов картофеля, а также выявления форм, устойчивых к различным типам неблагоприятных воздействий.

Бесплатно

Метагеномная характеристика ризосферного эффекта при выращивании злаковых культур в черноземной и дерново-подзолистой почв

Метагеномная характеристика ризосферного эффекта при выращивании злаковых культур в черноземной и дерново-подзолистой почв

Зверев А.О., Першина Е.В., Проворов Н.А., Андронов Е.Е., Серикова Е.Н.

Статья научная

Ризосферный эффект (изменение состава сообщества микроорганизмов под действием корневой экссудации растений) широко освещен в научной литературе. Убедительно показана его зависимость от таких внешних факторов, как тип почвы, вид и сорт растения и т.д. Задачей настоящей работы стало изучение влияния типа почвы и вида растения на ризосферный эффект при помощи современных методик высокопроизводительного секвенирования. Эта проблема неоднократно рассматривалась иностранными коллегами, однако подобное исследование на российских почвах и культурах, используемых в отечественной агропромышленности, было поведено впервые. В работе использовались две контрастные по агрохимическим показателям почвы - чернозем (Воронежская обл.) и дерново-подзолистая почва (Псковская обл.). Семена ржи (Secale cereale L., к-6469 по каталогу ВИР, местный сорт, используемый в Псковской области) и пшеницы (Triticum aestivum L., сорт Волшебница, к-54609 по каталогу ВИР) (получены из коллекции ВИР, г. Санкт-Петербург) выращивали в вегетационном домике на обеих почвах в течение 42 сут. Используя NGS-секвенирование V4 вариабельного участка гена 16S-рДНК, про-анализировали состав сообществ микроорганизмов исходных почв и сформированных на них ризосфер. Несмотря на небольшую длительность эксперимента, в обеих почвах был выявлен выраженный ризосферный эффект. Наиболее сильным фактором оказался тип почвы. Сообщества исходных почв, а также различные ризосферные сообщества, сформированные на этих почвах, достоверно отличались друг от друга. Для обеих почв показано сохранение этой закономерности при формировании ризосферных сообществ микроорганизмов у ржи и пшеницы. Вид растения был вторым по значимости (после типа почвы) фактором, определяющим таксономический состав ризосферного микробиома. У ржи сообщества ризосферы в целом оказались несколько ближе к сообществам исходных почв, чем у пшеницы. Также сообщества ризосфер ржи на дерново-подзолистой почве, по данным кластерного анализа, близки по структуре к сообществам исходной почвы. Таксономический микробиомный анализ сообществ на уровне фил позволил выявить группы, в наибольшей степени ответственные за ризосферный эффект. Формирование ризосферных сообществ сопровождалось увеличением количества последовательностей, характерных для класса Betaproteobacteria, при снижении числа представителей филы Verrucomicrobia. Сочетание особенностей дерново-подзолистой почвы и выращиваемой на ней пшеницы приводит к значительным изменениям в сообществе. По результатам всех анализов эти сообщества существенно отличаются от сообществ исходной почвы и ризосферы ржи на дерново-подзолистой почве. Возможно, это связано с увеличением доли бактерий из рода Flavobacterium (фила Bacteroidetes) в указанных сообществах. Таким образом, при помощи метода высокопроизводительного секвенирования, обладающего высокой разрешающей способностью и возможностью исследовать в том числе некультивируемые формы микроорганизмов, было наглядно показано наличие ризосферного эффекта при выращивании культурных сортов растений, а также продемонстрированы особенности взаимодействия отдельных формирующих его факторов. Однако для подтверждения ризосферного эффекта, а также более подробного исследования механизмов, лежащих в его основе, необходимо дополнить проведенный нами таксономический анализ исследованиями, характеризующими связь структуры ризосферного микробиома с составом растительных экссудатов. Для этого запланировано проведение ряда модельных экспериментов по внесению в почву веществ, входящих в состав корневых экссудатов исследуемых сортов ржи и пшеницы.

Бесплатно

Метагеномное профилирование нормофлоры Canis familiaris для последующего отбора штаммов-кандидатов в качестве пробиотиков

Метагеномное профилирование нормофлоры Canis familiaris для последующего отбора штаммов-кандидатов в качестве пробиотиков

Детинкин И.А., Фролов С.В., Фоменко В.В., Машенцева Н.Г., Вольнова Е.Р.

Статья научная

Исследование микробиоты желудочно-кишечного тракта домашних животных играет важную роль в поиске способов поддержания их здоровья. Особый интерес представляют собаки (Canis familiaris), которые используются не только как домашние животные, но и в правоохранительных органах, сельском хозяйстве и т.д. Одна из перспективных стратегий лечения и профилактики заболеваний, связанных с пищеварительной системой домашних животных, — применение пробиотиков. Современные подходы в анализе больших микробных сообществ с использованием секвенирования ДНК открывают новые возможности для исследования микробиоты собак и выделения из ее образцов штаммов-кандидатов для использования в качестве пробиотиков. В настоящей работе впервые методом высокопроизводительного метагеномного секвенирования охарактеризована фекальная микробиота клинически здоровой немецкой овчарки на всех таксономических уровнях (от типа до вида) и на ее основе целенаправленно отобраны виды-кандидаы в пробиотики. Выявлено, что Enterococcus lactis не детектируется стандартным метагеномным анализом из-за высокой гомологии с E. faecium, что подтверждено выделением трех штаммов E. lactis при отсутствии соответствующих прочтений в метагеноме. Целью исследования был метагеномный анализ фекальной микробиоты собак для поиска штаммов-кандидатов в пробиотики. Работу проводили на базе ФГБОУ ВО Российский биотехнологический университет (РОСБИОТЕХ) (г. Москва) в 2024-2025 годах. Для метагеномного анализа были отобраны пробы фекалий от клинически здоровой немецкой овчарки возрастом 4 года. Выделение тотальной ДНК проводили с использованием набора ZymoBIOMICS DNA Kit («Zymo Research», США). Для подготовки библиотек использовали 100 нг ДНК и набор Illumina DNA Prep (M) Tagmentation («Illumina, Inc.», США). Секвенирование выполняли на платформе NovaSeq 6000 («Illumina, Inc.», США). Таксономическую классификацию осуществляли алгоритмом LCA в MEGAN6 Ultimate Edition (v6.18.7) при пороге относительной абундантности > 0,01 %. В результате секвенирования было получено 24,009 млн чтений (2,407 Гб данных), из которых 61,97 % успешно классифицированы на таксономическом уровне и 12,6 — на функциональном (Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG). Доминирующим доменом оказались бактерии — 99,91 %. Для выделения изолятов микроорганизмов образцы фекалий ресуспендировали в 10 мл 0,9 % NaCl, после чего делали серийные стандартные разведения, высевая каждое разведение на чашки Петри со средой MRS («HiMedia Laboratories Pvt. Ltd.», Индия). Всего было выделено 100 штаммов бактерий, 17 из которых были идентифицированы методом секвенирования гена 16S рРНК. Для некоторых штаммов использовали амплификацию с видоспецифическими праймерами. Метагеномный анализ выявил доминирование бактерий типа Firmicutes (77,28 %) и Actinobacteria (18,88 %). На уровне класса наиболее распространенными были Clostridia, Coriobacteriia и Bacilli; отряда — Eubacteriales, Coriobacteriales и Lacto-bacillales. Видовой состав характеризовался доминированием Ruminococcus gnavus (9,45 %) и Collinsella intestinalis (8,13 %), что может отражать адаптацию микробиоты к составу рациона животного. Анализ выявил 8 видов-кандидатов в пробиотики, присутствовавших в значимых количествах (> 0,05 %): Enterococcus faecium, Bifidobacterium pseudolongum, Latilactobacillus curvatus, Lactiplantibacillus plantarum, Lactobacillus johnsonii, Limosilactobacillus reuteri, Latilactobacillus sakei и Leuconostoc mesenteroides. Из 100 выделенных изолятов 17 были идентифицированы до вида: Enterococcus faecium (7 штаммов), Lactiplantibacillus plantarum (6 штаммов), Enterococcus lactis (3 штамма) и Latilactobacillus sakei subsp. sakei (1 штамм). Наличие E. lactis среди выделенных бактерий при его отсутствии в данных метагенома, вероятно, обусловлено генетической схожестью этого микроорганизма с видом E. faecium. Исследование подтверждает потенциал использования метагеномного профилирования для целенаправленного поиска пробиотических штаммов. Не все потенциально перспективные виды (B. pseudolongum, L. curvatus, L. johnsonii, L. reuteri, L. mesenteroides) удалось выделить из образцов, что указывает на необходимость дальнейших работ по их изоляции и изучению пробиотических свойств уже полученных штаммов. Кроме того, полученные результаты представляют интерес с точки зрения состава здоровой микробиоты пищеварительной системы собак.

Бесплатно

Метагеномный анализ микробиома кишечника и биохимический состав мяса бройлеров при использовании растительного экстракта Quercus cortex в рационах

Метагеномный анализ микробиома кишечника и биохимический состав мяса бройлеров при использовании растительного экстракта Quercus cortex в рационах

Багиров В.А., Ушаков А.С., Дускаев Г.К., Кван О.В., Рахматулин Ш.Г., Яушева Е.В., Вершинина И.А.

Статья научная

На сегодняшний день использование антибиотиков в ветеринарии, а также в качестве стимуляторов роста в животноводстве считается основной причиной развития устойчивости бактерий к антибиотикам. Водные экстракты растительного происхождения могут обеспечить новые простые подходы к борьбе с патогенными бактериями. В этой связи ведется активный поиск естественных альтернативных источников противомикробных препаратов. Дикие растения считаются практически неограниченным источником фитохимических веществ. Кроме того, водные экстракты растительного происхождения могут обеспечить новые простые подходы к борьбе с патогенными бактериями. Высказываются предположения, что увеличение показателей роста бройлеров после добавления биоактивных веществ растительного происхождения может быть связано с улучшением микробного состава кишечника и метаболической функции. Для других растительных веществ характерно улучшение профиля ненасыщенных жирных кислот и аминокислот в мясе. Таким образом, чтобы получить более полную картину потенциального использования растительных экстрактов для профилактики или борьбы с бактериальными инфекциями, необходимо оценить активность растительных экстрактов в отношении микробиома кишечника сельскохозяйственных животных и птицы и качества получаемой продукции. Мы изучили влияние танинсодержащего экстракта коры дуба (Quercus cortex) на биохимический состав мяса цыплят-бройлеров и микробиом кишечника. Исследования проводили в Центре коллективного пользования научным оборудованием ФНЦ биологических систем и агротехнологий РАН (г. Оренбург) на цыплятах-бройлерах кроссам Смена 8 в 2019 году. Для экспериментов сформировали четыре группы 7-суточных цыплят (по n = 30, всего 120 особей). Контрольная группа получала основной рацион (ОР); I опытная - ОР + экстракт Quercus cortex (1 мл/кг живой массы); II опытная - ОР + экстракт Quercus cortex (2 мл/кг живой массы); III опытная - ОР + экстракт Quercus cortex (3 мл/кг живой массы). Анализ химического состава мяса цыплят-бройлеров показал, что включение в рацион птицы экстракта коры дуба в дозе 1 мл/кг живой массы способствует улучшению качества мяса за счет большего содержания влаги, сырого протеина и золы с одновременным уменьшением количества сырого жира (на 27,3 %, р ≤ 0,01). Добавление экстракта коры дуба в рацион приводило к повышению содержания незаменимых аминокислот в мясе: по лизину - на 1,63-3,43 % (р ≤ 0,01), по лейцину-изолейцину - на 2,20-5,00 % (р ≤ 0,05), метионину - на 0,55-1,93 % (р ≤ 0,05), валину - на 1,06-1,95 % (р ≤ 0,05), фенилаланину (I и II группа) - на 0,45 % и 1,14 % (р ≤ 0,05), треонину (I и II группа) - на 1,07 % (р ≤ 0,05) и 1,82 % (р ≤ 0,01). Количество заменимых аминокислот в грудных мышцах цыплят-бройлеров относительно контроля также возрастало, причем максимальный рост показателя отмечали в группе с дозировкой экстракта коры дуба 2 мл/кг живой массы. В грудных мышцах цыплят-бройлеров из I и III групп активнее, чем контроле, аккумулировались ненасыщенные жирные кислоты (в частности, содержание пальмитолеиновой было соответственно на 1,0 и 0,7 % больше; р ≤ 0,05). Эксперименты также показали, что дополнительное скармливание птице экстракта Quercus cortex (использованные рационы характеризовались различным содержанием танинсодержащих веществ) оказывает непосредственное воздействие на состав микрофлоры кишечника (в частности, на его слепой отдел). В первую очередь это влияние проявилось в отношении филумов Firmicutes и Bacteroidetes , что указывает на возможные изменения в обменных процессах у цыплят-бройлеров, например в резорбции энергии и деградации белков и полисахаридов . Численность бактерий филума Bacteroidetes повышалась в I и III группах в 3,96 и 2,10 раза относительно контроля (р ≤ 0,05), тогда как во II группе этих бактерий не обнаружили. Число представителей филума Firmicutes уменьшалось в 3,60 и 1,47 раза в I и III группах относительно контроля (р £ 0,05), но увеличивалось в 1,26 раза - во II группе (р ≤ 0,05). Таким образом, интенсификация процессов пищеварения в кишечнике бройлеров при применении экстракта коры дуба в дозировке 1-3 мл/кг живой массы в качестве биологически активной добавки к рациону приводила к повышению содержание аминокислот и ненасыщенных жирных кислот в тушках, что улучшает их потребительские качества.

Бесплатно

Метагеномный анализ про- и эукариотических компонентов микробиоты биологически активного препарата БАГС

Метагеномный анализ про- и эукариотических компонентов микробиоты биологически активного препарата БАГС

Лисина Т.О., Зверев А.О., Гладков Г.В., Кимеклис А.К., Орлова О.В., Кичко А.А., Андронов Е.Е.

Статья научная

В подавляющем большинстве микробные препараты создаются на основе чистых культур микроорганизмов. Использование подобных препаратов вполне оправдано и результативно в случае азотфиксации в симбиозе ризобий с бобовыми или биоконтрольных свойств бацилл. Однако если речь идет о почвенных процессах, обусловливающих круговорот биогенных элементов, в частности о трансформации растительных остатков, микробные препараты на основе чистых культур оказываются недостаточно эффективными и стабильными, причем даже тогда, когда используются сконструированные консорциумы из смеси нескольких видов микроорганизмов. Связано это с тем, что микробиологические процессы в почве осуществляются не отдельными видами, а микробными сообществами со сложной сетевой организацией. Поэтому более перспективной альтернативой является мобилизация нативных целлюлозоразлагающих сообществ в виде микробных препаратов. Именно таков микробный препарат БАГС (биологически активный грунт на соломе), создание предшественника которого началось во Всероссийском НИИ сельскохозяйственной микробиологии в 1930-е годы. В настоящей работе с помощью метагеномных методов анализа впервые получены данные о таксономическом составе прокариотического и эукариотического сообществ двух последовательно приготовленных партий препарата БАГС (препарат из первой партии выступал в качестве инокулюма). Кроме того, сопоставление микробного состава зрелого БАГС, основных компонентов, используемых при его приготовлении (торф, солома), и почвы как источника гуматразлагающих бактерий позволило сделать предположение о происхождении мажорных прокариотических компонентов микробиоты препарата. Цель работы - с использованием метагеномного анализа исследовать таксономический состав консорциума двух партий микробного препарата БАГС и компонентов, используемых при его приготовлении. Объектами исследования были микробный препарат БАГС - готовый зрелый препарат, полученный в результате компостирования торфо-соломисто-минеральной смеси и инокулюма в течение 11 мес (последний из серии многолетних периодических возобновлений в течение не менее 20 лет); инокулюм - зрелый препарат БАГС предыдущего приготовления (15 мес компостирования); торф - произвесткованный верховой сфагновый торф (пос. Форносово, Ленинградская обл., степень разложенности 15 %); солома - сухая измельченная солома овса; почва - дерново-подзолистая, легкосуглинистая (пос. Белогорка, Ленинградская обл.). Для приготовления БАГС в произвесткованный доломитовой мукой до рН 6,4 торф вносили солому овса (10 % от массы торфа), азофоску (10 г д.в. по азоту/кг соломы) и инокулюм (20 % от массы торфа). Смесь увлажняли до 60 % от полной влагоемкости, перемешивали, расфасовывали в пластиковые емкости объемом 90 л и инкубировали в течение 11 мес при 28 °С, периодически увлажняя и перемешивая. Микробиологический анализ, включая бактериальный и грибной компоненты, проводили с использованием метода глубокого секвенирования ампликонных библиотек гена 16S рРНК (прокариоты) и ITS (грибы). Данные анализировали при помощи пакета dada2, основные анализы (альфа- и бета-разнообразие, барграфы и теплокарты) выполняли при помощи пакета phyloseq и tidyverse в программной среде R. Анализ PERMANOVA проводили с использованием пакета vegan. По данным анализа таксономического состава БАГС, основные компоненты бактериальных сообществ обеих партий препарата БАГС, один из которых выступал в качестве инокулюма, относились к представителям фил Pseudomonadota (27-32 %), Planctomycetota (11-14 %) и Bacteroidota (10-11 %), а основными компонентами грибного сообщества были представители классов Sordariomycetes , Mucoromycetes и Leotiomycetes . Показано, что к концу срока компостирования бактериальная часть сообщества БАГС более стабильна, чем грибная, и очень близка к составу инокулюма, тогда как эукариотическая мажорная компонента больше подвержена влиянию микробиома торфа. При этом за годы воспроизводства БАГС сформировался его собственный уникальный микробиом. Около 12 % от всех таксонов в БАГС оказались уникальными и присущими только ему, а на долю микробной массы уникальных таксонов в сообществе препарата приходилось 93 % от общего их числа.

Бесплатно

Журнал