Масс-спектрометрия для биотехнологии. Рубрика в журнале - Научное приборостроение
Автоматическая настройка времяпролетного масс-спектрометра
Статья научная
Описана система автоматической настройки времяпролетного масс-спектрометра с ортогональным вводом ионов в анализатор. Работа системы настройки основана на взаимодействии систем управления прибора и регистрации спектров. Приведено описание используемых алгоритмов автоматической настройки. В качестве результатов тестирования системы приведен ряд настроечных зависимостей, снятых в автоматическом режиме.
Бесплатно
ВЭЖХ-МС-анализ сверхмалых количеств лекарственных препаратов
Статья научная
С помощью приборного комплекса, состоящего из времяпролетного масс-спектрометра МХ 5310 и жидкостного хроматографа Милихром А-02, произведен анализ состава лекарственных препаратов. Показана возможность повышения чувствительности хромато-масс-спектрометрического анализа лекарственных компонентов по отношению к хроматографическому анализу.
Бесплатно
Статья научная
В работе исследовали возможность взаимодействия ацетилсалициловой кислоты (АСК) с очищенным глобином человека и крысы in vitro. Показано, что глобин крысы способен модифицироваться АСК по К-17 и К-57 в субъединице альфа и К-96 в субъединице бета, а глобин человека - по К-17, К-41, К-57 в субъединице альфа и К-18, К-121 в субъединице бета.
Бесплатно
Возможности применения метода ГХ-МС (обзор)
Статья обзорная
В обзоре рассмотрены возможности применения метода ГХ-МС (газовая хроматография-масс-спектрометрия). Описаны основы метода и области, в которых используется ГХ-МС.
Бесплатно
Идентификация алкилированных аддуктов глобина крысы методами масс-спектрометрии
Статья научная
В данной работе была исследована возможность образования аддуктов глобина крысы с сернистым ипритом (HD) in vitro. В результате был обнаружен ряд триптических пептидов: EFTPCHDAQAAFQK (1444.62 Да), GTFAHLSELHCHDDK (1561.66 Да), IGGHGGEYGEHDEALQR (1676.78 Да), - модифицированных остатком HD по С126, С93 и E27 соответственно и относящихся к глобину крысы.
Бесплатно
Статья научная
Одним из основных биомаркеров интоксикации фосфорорганическими соединениями (ФОС) является ковалентный аддукт ФОС с сывороточным альбумином. В данной работе предложена универсальная методика выделения фосфорсодержащих пептидов из биологических образцов, позволяющая выделить и идентифицировать пептиды сывороточного альбумина, модифицированные фосфорсодержащими соединениями. Предлагается комбинация аффинной хроматографии с использованием триазиновых красителей как сорбента и металл-аффинной хроматографии с использованием сорбентов с хелатированными ионами Fe3+ для выделения фосфонилированных параоксоном пептидов сывороточного альбумина. Идентификацию фосфонилированных пептидов проводили времяпролетной масс-спектрометрией с методом ионизации МАЛДИ. Впервые обнаружены и идентифицированы триптические пептиды сывороточного альбумина крысы, модифицированные остатком параоксона по тирозину-150 и тирозину-411.
Бесплатно
Статья научная
Описана процедура разработки импульсной малогабаритной ионной цезиевой пушки, работающей в диапазоне низких энергий ионов и формирующей пучок с заданными параметрами. Источником ионов цезия служит нагреваемый алюминат цезия. Пушка предназначена для использования в качестве тестового ионного источника при исследовании свойств нового времяпролетного анализатора. Приводятся расчетные и измеренные на макете пушки параметры формируемого ею пучка. Описаны особенности работы пушки в режиме формирования коротких (меньше 1 мкс) импульсов. Проводилось моделирование процедуры формирования коротких импульсов с помощью программы SIMION. Показано, что эффект банчинга позволяет добиться существенной временнóй фокусировки ионных пакетов, однако не позволяет получить импульсы короче 100 нс. При этом в значительной степени возрастает разброс ионов по кинетической энергии.
Бесплатно
Статья научная
В работе описывается газодинамический интерфейс времяпролетного масс-спектрометра (ВПМС) МХ 5311 с ортогональным вводом и источником ионов "Электроспрей". Представлены результаты исследования характеристик газодинамического интерфейса ВПМС МХ 5311. Показано, что полная потеря ионного тока при прохождении всего газодинамического интерфейса от области ионообразования до импульсного ортогонального источника масс-анализатора составляет менее 6 порядков.
Бесплатно
Статья научная
В работе приведены результаты исследований системы транспортировки ионных пучков, образованных при атмосферном давлении, в высоковакуумную область масс-анализатора. Исследована радиочастотная транспортирующая система с использованием двух квадруполей с системой дифференциальной откачки, работающая при существенно различных давлениях остаточного газа. Показаны возможность управления ионным током при давлении порядка 1-5 Торр и транспортировка в охлаждающем радиочастотном квадруполе при давлении порядка нескольких (1-10) мТорр. Проведен анализ экспериментальных данных, подтверждающий эффективность использования такой системы.
Бесплатно
Источник ионов наноэлектроспрей для масс-спектрометра МХ 5310
Статья научная
Настоящая работа посвящена сравнению источников ионов наноэлектроспрей и электроспрей для масс-спектрометра МХ 5310 (ИАП РАН). Источник ионов наноэлектроспрей позволил снизить расход анализируемой пробы до 50-100 нл/мин. Показано увеличение эффективности использования пробы, а также уменьшение порога детектирования (с 10-8 до 10-9 М) по сравнению со штатным источником ионов. Была подтверждена возможность проведения успешных масс-спектрометрических анализов биологических проб, прошедших многостадийную биохимическую пробоподготовку на примере фрагментов сывороточного альбумина крысы, модифицированных остатком инсектицида параоксона.
Бесплатно
Статья научная
Продемонстрирована возможность использования масс-спектрометрии для комплексного анализа лекарственных препаратов, содержащих стрептокиназу. Определен состав белков в препаратах и содержание целевого белка - стрептокиназы. Идентификация и количественная оценка содержания стрептокиназы проводились по продуктам исчерпывающего триптического гидролиза с использованием MALDI-MS. Для количественной оценки в анализируемые пробы в качестве внутреннего стандарта добавлялись 18О-изотопомеры триптических пептидов стрептокиназы с известной концентрацией. Концентрация анализируемого белка рассчитывалась по соотношениям интенсивностей изотопных распределений аналита и меченого 18О внутреннего стандарта. Биологическая активность стрептокиназы оценивалась по ее способности активировать плазминоген в сыворотке крови человека. Активация плазминогена сопровождается появлением эстеразной активности, которая определялась по скорости гидролиза синтетического субстрата ТАМЕ. Образование продукта гидролиза ТА определялось с помощью ESI-MS в присутствии изотопномеченного ТА в качестве внутреннего стандарта. Все изотопомеры, использованные в качестве внутренних стандартов, были получены путем изотопного обмена карбоксилсодержаших продуктов (пептидов и тозиларгинина) в среде Н218О в присутствии ТФУ.
Бесплатно
Статья научная
Проведены хроматографическое разделение и МС-анализ компонентов сложных смесей полипептидов в режиме "on-line" путем стыковки высокоэффективного жидкостного микроколоночного хроматографа МилиХром А-02 и времяпролетного масс-спектрометра с ортогональным источником и электрораспылением ионов МХ5303. Возможности тандема показаны на примере контроля содержания целевых и побочных продуктов на отдельных стадиях промышленного биотехнологического процесса получения генно-инженерного инсулина человека.
Бесплатно
Статья научная
Предложено использование метода масс-спектрометрии для количественной оценки концентрационных соотношений галоген-модифицированных дезоксиуридинов. Показана прямая зависимость между концентрационным соотношением компонентов смеси и интенсивностью сигналов. Установлено, что метод масс-спектрометрии вполне может быть применен к количественному определению галоген-модифицированных дезоксиуридинов, причем имеется возможность не только оценить концентрационное соотношение исследуемых соединений, но и дать достаточно точную количественную оценку.
Бесплатно
Масс-спектрометрия с мягкими методами ионизации в протеомном анализе (обзор)
Статья обзорная
В обзоре рассмотрено использование масс-спектрометрии с мягкими методами ионизации в протеомике. Описаны основы масс-спектрометрического анализа белковых соединений, показаны возможности масс-спектрометрии при идентификации белков и пептидов, поиске и идентификации посттрансляционных модификаций, при сравнительном количественном анализе.
Бесплатно
Метод извлечения значимой информации из масс-спектров пептидов
Статья научная
Описан метод обработки масс-спектров пептидов с целью извлечения информации о массах молекул пробы. Предметом обработки является массив данных о молекулярных пиках, выделенных на стадии предварительной обработки. Метод основан на анализе и декомпозиции структуры масс-спектра и предполагает использование статистических данных о форме изотопных распределений молекулярных пиков пептидов, которые получены методом численного моделирования на множестве идеализированных масс-спектров пептидов. Приводится описание алгоритма, реализующего предложенный метод, а также результаты обработки набора тестовых данных.
Бесплатно
Определение токсинов пептидной природы методом MALDI-MS (обзор)
Статья обзорная
В обзоре рассмотрены возможности MALDI-масс-спектрометрии применительно к анализу токсинов пептидной природы, продуцируемых бактериями, некоторыми растениями, морскими организмами, насекомыми, членистоногими и змеями. Показаны преимущества и недостатки метода.
Бесплатно
Определение элементного состава твердых растворов Li1-xNaxCo0.07Ga0.93O2 методом MALDI-MS
Статья научная
Разработана методика синтеза сложного оксида LiCoO2 со стабилизированной структурой методом магнитного разбавления в LiGaO2. Впервые проведен качественный элементный анализ твердых растворов Li1-xNaxCoO2-LiGaO2 методом MALDI-MS.
Бесплатно
Параллельный (МС-МС)-анализ во времяпролетном тандеме. Постановка задачи, метод и схемы приборов
Статья научная
Для повышения скорости и чувствительности тандемного масс-спектрометрического (МС-МС)-анализа предложено использовать тандем из двух времяпролетных анализаторов (ВПА) в принципиально новом режиме "вложенных времен": медленное разделение родительских ионов в первом анализаторе происходит на миллисекундной временнóй шкале, а быстрая фрагментация и быстрый масс-анализ фрагментов во втором анализаторе - на микросекундной шкале. Режим вложенных времен позволяет осуществлять так называемый "параллельный анализ" фрагментных спектров для всех родительских ионов в рамках единичного цикла разделения в ВПА1. Для реализации метода предложены "медленные" ВПА нового типа, сочетающие поперечное удержание ионного пучка с высоким порядком времяпролетной фокусировки по энергии ионов. Для поперечного удержания предложены радиочастотные (РЧ) или периодические электростатические поля. В работе анализируются характеристики ключевых компонент тандема, включая "медленный" ВПА, ионный источник с накопителем ионов и фрагментную ловушку с быстрым пропусканием ионов.
Бесплатно
Первые экспериментальные исследования планарного многоотражательного ВПМС
Статья научная
В статье приводится описание экспериментального макета нового времяпролетного анализатора, способного работать в миллисекундном диапазоне времени пролета. Основой ионно-оптической системы анализатора являются уникальные бессеточные плоские элестростатические зеркала. Для удержания ионного пучка в направлении дрейфа используется система из пяти электростатических линз. Экспериментально определен диапазон фокусировки зеркальной системы анализатора по энергии и полученные данные сопоставлены с результатами расчета. В процессе испытаний нового анализатора определены режимы работы зеркал при разных значениях энергии ионов и проведено сравнение расчетных и экспериментальных данных, определены зависимости разрешающей способности и пропускания от энергии ионов. В диапазоне энергий ионов от 10 до 100 эВ получены масс-спектры, содержащие следы ионов щелочных металлов, содержащихся в алюминате цезия. Содержание этих ионов не превышало 2·10^ -5 от интенсивности ионов цезия. В процессе исследований нового анализатора определены особенности его настройки и пределы устойчивости по отношению к внешнему магнитному полю и пульсациям питающих напряжений.
Бесплатно
Статья научная
Предложена схема многоотражательного времяпролетного масс-анализатора, ионы в котором последовательно отражаются от двух параллельных друг другу двумерных бессеточных электростатических зеркал. Пространственное удержание пучка ионов при большом количестве отражений и временнáя фокусировка в широком диапазоне энергий обеспечиваются оптимизацией полевого распределения в зеркалах.
Бесплатно
