Лабораторные и экспериментальные исследования. Рубрика в журнале - Сибирский онкологический журнал
![Противоопухолевое действие 2-[3-(2-хлорэтил)-3-нитрозоуреидо]-1,3-пропандиола (хлонизола) на рост спонтанных опухолей молочной железы у Her-2/neu трансгенных мышей](/file/thumb/140300183/protivoopuholevoe-dejstvie-232-hlorjetil3-nitrozoureido13-propandiola.png "Противоопухолевое действие 2-[3-(2-хлорэтил)-3-нитрозоуреидо]-1,3-пропандиола (хлонизола) на рост спонтанных опухолей молочной железы у Her-2/neu трансгенных мышей")
Статья научная
Введение. Современное лечение HER2-положительного метастатического рака молочной железы (РМЖ) основано на использовании анти-HER2-блокаторов как патогенетических препаратов, а также поиске оптимальной комбинации противоопухолевых препаратов с различным механизмом действия. Интересно выяснить потенциальную активность хлонизола при HER2+ РМЖ. Цель исследования - оценить противоопухолевую активность отечественного соединения 2-[3-(2-хлорэтил)-3-нитрозоуреидо]-1,3-пропандиола (хлонизола) на рост спонтанных опухолей молочной железы у HER2/neu трансгенных мышей линии FVB/N. материал и методы. В проспективном исследовании использовали 5-месячных мышей-самок с развившимися HER2-позитивными опухолями молочной железы. Из этих животных были сформированы десять пар с практически одинаковыми размерами новообразований (соответственно, для контрольной группы и группы лечения хлонизолом). Хлонизол вводили в дозе 20 мг/кг внутрибрюшинно однократно. За животными наблюдали в течение 30 дней. Результаты. Во всех десяти парах мышей хлонизол проявил выраженный противоопухолевый эффект, вплоть до полной временной регрессии опухоли. При суммировании сравнительных результатов всех десяти пар животных торможение роста опухолей (ТРО) при применении хлонизола по сравнению с контролем составило 90-97 % (p function show_abstract() { $('#abstract1').hide(); $('#abstract2').show(); $('#abstract_expand').hide(); }
Бесплатно
Статья научная
На экспериментальных моделях опухолей аденокарциномы Кребс-2, Эрлиха и карциномы легких Люис проведено исследование противоопухолевой активности композиционного препарата, содержащего в своем составе ФНО-α и фото- сенсибилизатор - производные гематопорфирина (ПГП). Полученные данные свидетельствуют о том, что композиционный препарат отличался повышенной противоопухолевой активностью, по сравнению с его компонентами, в отношении ин- гибирования как первичного опухолевого узла, так и процесса метастазирования опухолевых клеток. Повышение уровня накопления ПГП в ткани опухоли после введения композиции позволяет предполагать, что наблюдаемое усиление эффекта ФНО-α связано с повышением селективности накопления ПГП в опухоли и его модулирующим действием. Комплексный препарат ПГП-ФНО-альфа отличается более низким уровнем токсичности, по сравнению с препаратом ФНО-альфа.
Бесплатно
Противоопухолевые свойства ядерных эритроидных клеток
Статья научная
Целью исследования явилось изучение супрессорной и/или цитотоксической активности ядерных эритроидных клеток (ЯЭК) в отношении опухолевых клеток различного происхождения. Материал и методы. В работе использованы мыши линии С57Bl/6, клетки опухолевых линий Р815, l1210, В16 и l929. «Фенилгидразиновые» ЯЭК получали от мышей с индуцированной гемолитической анемией. «Эритропоэтиновые» ЯЭК выделяли из «фенилгидразиновой селезенки» и далее культивировали в присутствии эритропоэтина. Еще одним источником ЯЭК были селезенки новорожденных мышей, клетки фетальной печени человека и мыши и клетки костного мозга мыши, прокультивированные с эритропоэтином. Цитостатический эффект ЯЭК или их супернатантов регистрировали по снижению пролиферации линий Р815, l1210, B16, llc, l929 Результаты. Обнаружено наличие выраженной прямой противоопухолевой активности как у ЯЭК, так и у продуктов их культивирования в отношении клеток различных опухолевых линий. Супрессорный эффект неспецифичен. Заключение. Учитывая цитостатическую активность ЯЭК, их существенное численное преобладание во время развития эмбриона над всеми другими ростками кроветворения, можно предположить возможность участия эритробластов в процессе создания противоопухолевой защиты плода в этот период жизни.
Бесплатно
Статья научная
Кислотность микроокружения опухоли представляет собой фундаментальный признак рака, способствующий прогрессированию опухоли, инвазии, уклонению от иммунного ответа и устойчивости к лечению. Цель исследования – изучение противоопухолевых механизмов ощелачивания гидрокарбонатом натрия на клетках аденокарциномы толстой кишки мыши CT26 и меланомы человека. Материал и методы. Клетки подвергали воздействию различных повышенных концентраций гидрокарбоната натрия (50–119 мМ) с целью оценки его влияния на жизнеспособность, метаболизм, миграцию и пути клеточной гибели. Результаты. Результаты показали немедленное повышение значений внеклеточного pH, зависящее от концентрации гидрокарбоната натрия, с последующим их понижением через 24 ч вследствие метаболической адаптации. Обе линии клеток демонстрировали дозозависимую цитотоксичность с концентрацией полумаксимального ингибирования примерно 80–90 мМ, при этом уровень апоптоза, определённый с помощью окрашивания Annexin V/PI, был минимален, что указывает на альтернативные механизмы клеточной гибели. Гидрокарбонат натрия значительно нарушал миграцию клеток в тестах по восстановлению монослоя и вызывал деполяризацию митохондрий, подтверждённую снижением флуоресценции зонда Mito Red. Метаболический анализ выявил повышенное потребление глюкозы и глутамина на фоне увеличенного образования лактата, что свидетельствует о метаболическом перепрограммировании в ответ на стресс ощелачивания. Несмотря на увеличение накопления лизосом, определенное с помощью зонда Lyso Green, классические маркеры аутофагии (LC3B и p62) не показали значимых изменений, свидетельствуя о том, что традиционные пути аутофагии не играют ведущей роли. Заключение. Полученные данные указывают на то, что ощелачивание гидрокарбонатом натрия индуцирует гибель опухолевых клеток посредством механизмов, выходящих за рамки классического апоптоза и аутофагии, возможно включая лизосом-зависимую смерть или алкалиптоз. Исследование дает механистическое обоснование потенциала гидрокарбоната натрия в качестве потенциальной адъювантной терапии, направленной на кислотность микроокружения опухоли, с перспективой повышения эффективности традиционных методов лечения рака через модуляцию pH. Для полного понимания задействованных путей клеточной гибели необходимы дальнейшие исследования.
Бесплатно
Статья научная
Разработаны источники, способные генерировать импульсно-периодическое рентгеновское излучение (ИПРИ) в наносекундном диапазоне с возможностью изменения частоты повторения импульсов и дозы за импульс. Целью настоящего исследования стал анализ воздействия ИПРИ на уровень двунитевых разрывов ДНК в опухолевых и нормальных клетках человека в условиях in vitro. Для оценки уровня двунитевых разрывов ДНК и эффективности их репарации использовался метод анализа флуоресцентных фокусов белков репарации ДНК γH2AX и 53BP1 в клетках опухолевой линии MOLT-4, имеющей лимфобластное происхождение, после воздействия ИПРИ в условиях in vitro. Наибольший уровень фокусов γH2AX и 53BP1 через 18 ч после воздействия, являющийся маркером эффективности репарации ДНК, в клетках линии MOLT-4 отмечался при воздействии ИПРИ с частотой повторения импульсов 8 имп./с, при которой ранее в лимфоцитах наблюдалось наименьшее количество двунитевых разрывов ДНК. Полученные результаты указывают, что использование ИПРИ с различными частотами повторения импульсов может позволить дифференцированно воздействовать на опухолевые клетки, незначительно повреждая при этом нормальные клетки человека.
Бесплатно
Статья научная
Введение. Для решения задач персонализированной медицины в онкологии важным становится этап предклинических исследований, основанный на использовании трехмерных клеточных моделей опухолей in vitro, в том числе сфероидов/тумороидов, которые представляют собой интересный инструмент для генетических, эпигенетических, биомедицинских и фармакологических исследований с целью определения наиболее эффективного индивидуального терапевтического подхода, так как позволяют моделировать динамическую эволюцию опухолевого заболевания от ранних стадий до метастатического распространения через взаимодействие с микроокружением. Цель исследования - провести сравнительные исследования особенностей формирования и пространственной организации сфероидов, полученных из клеток солидных злокачественных новообразований различного гистогенеза: меланом (МК), сарком мягких тканей и остеогенных сарком (СМТ/ОС), эпителиальных опухолей (ЭОп). Материал и методы. Основой для создания 3D-клеточных моделей служили культуры клеток солидных опухолей пациентов, которые проходили лечение в ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» в 2015-21 гг. Фрагменты опухолевой ткани были получены интраоперационно: 15 образцов МК, 20 - СМТ/ОС и 9 -ЭОп. Все опухолевые клетки культивировали не менее 10 пассажей. Для изучения сфероидов были использованы методы фазовой контрастной, конфокальной микроскопии, гистологическая техника. С помощью методов ИФА и мультиплексного анализа были изучены супернатанты монослойных клеточных культур и сфероидов на предмет присутствия широкого спектра биологически активных веществ, обеспечивающих процессы иммуносупрессии, инвазии и метастазирования. результаты. Использование низкоадгезивных поверхностей оказалось предпочтительным для получения сфероидов заданной посевной концентрации и интересующего размера. Среднее время культивирования сфероидов составило 4,7 сут, оптимальная посевная концентрация - 10 000 клеток на лунку, при этом диаметр сфероида варьировал от 300 до 1 000 мкм в зависимости от типа злокачественных клеток: самые крупные сфероиды формировали культуры МК. В целом эффективность образования сфероидов составила 88,6 % (39 из 44). Введение в 3D-конструкцию фибробластов приводило к усилению инвазивного потенциала опухолевых клеток, который был ассоциирован с продукцией IL8 (rho=0,636, p=0,035), HGF (rho=0,850, p=0,004), SCF (rho=0,857, p=0,014), FST (rho=0,685, p=0,029), Prolactin (rho=0,810, p=0,015), PECAM1 (rho=0,788, p=0,004). Заключение. Технология низкоадгезивных поверхностей позволяет успешно создавать трехмерные модели опухолевого узла из клеток злокачественных новообразований различного гистогенеза. Заселение трехмерной конструкции фибробластами усиливает биологически агрессивные свойства опухолевых клеток и демонстрирует сложные реципрокные взаимодействия между клеточными элементами стромы опухоли и малигнизированными клетками, что приближает модель к реальной клинической ситуации.
Бесплатно
Статья научная
Цель исследования - разработка in vitro лабораторных моделей для оценки параметров качества и специфической эффективности дендритно-клеточной вакцины (ДКВ). Материал и методы. В исследование включены биологические образцы больных злокачественными новообразованиями, получавших вакцинотерапию на основе аутологичных дендритных клеток (ДК). Для индукции пролиферации антигенспецифических Т-лимфоцитов (n=227) использовали незрелые ДК (n=46) и зрелые ДК (n=56). Для изучения противоопухолевой цитотоксической активности in vitro генерированных ЦТЛ (n=18) использовали аутологичные опухолевые клетки меланомы кожи (n=10) или сарком (n=8) пациентов в аналитической системе xCELLigence®. Секрецию цитокинов и цитолитических белков изучали методом мультиплексного анализа, субпопуляционный состав эффекторных Т-лимфоцитов определяли методом проточной цитометрии. Результаты. В работе показано, что зрелые ДК (CD83+CD1a-) отличаются высокой экспрессией молекул, презентирующих антиген (HLA-DR) и обеспечивающих миграцию ДК в лимфатические узлы (CCR7), а также костимулирующих молекул CD80 и CD86, по сравнению с незрелыми ДК (CD83-CD1a+). Установлено, что индукция зрелыми ДК стимулирует рост относительного содержания пролиферирующих Т-клеток по сравнению со стимуляцией незрелыми ДК (р function show_abstract() { $('#abstract1').hide(); $('#abstract2').show(); $('#abstract_expand').hide(); }
Бесплатно
Рак желудка в регионе Сибири и Дальнего Востока (1991-2005 гг.)
Статья научная
Проведен эпидемиологический анализ распространения злокачественных новообразований желудка у населения региона Сибири и Дальнего Востока за 1991-2005 гг. В среднем по региону уровни заболеваемости существенно не отличаются от РФ. Имеются различия в заболеваемости мужского и женского населения. У мужчин рак желудка встречается в 2,4 раза чаще, чем у женщин. Выделены территории повышенного риска по раку желудка: Томская, Иркутская, Сахалинская обла- сти, республики Бурятия и Тыва. Группу территорий пониженного риска составили Алтайский край, Республика Хакасия, Камчатская и Магаданская области. За исследуемый период отмечено снижение заболеваемости раком желудка в регионе, что особенно ярко проявилось у мужского населения. При условии сохранения выявленных тенденций к 2012 г. онкологи- ческая ситуация в регионе Сибири и Дальнего Востока может существенно измениться.
Бесплатно
Статья научная
Раково-эмбриональный антиген (РЭА) используется для оценки эффективности проведенного лечения у больных раком прямой кишки. цель исследования - оценить возможность предсказания полного морфологического ответа после неоадъювантной химиолучевой терапии (нХЛТ) у больных местнораспространенным раком прямой кишки по уровню РЭА до и после лечения. материал и методы. В исследование включено 179 больных местнораспространенным раком прямой кишки (РПК), получавших нХЛТ с последующим хирургическим лечением. Исследовали уровень РЭА в сыворотке крови до начала и через 6-10 нед после завершения нХЛТ. Результаты РЭА до и после нХЛТ сопоставлены со степенью патоморфоза, определяемого после операции. Проведен анализ факторов, влияющих на достижение полного морфологического ответа (ПМО). Результаты. ПМО после нХЛТ получен у 12 % (22/179) больных. Частота ПМО была выше у больных с исходно нормальным (5 нг/мл) РЭА в случае его нормализации после лечения и без нормализации (р=0,08). Максимальная вероятность ПМО, определенная по ROC кривой, при исходном РЭА function show_abstract() { $('#abstract1').hide(); $('#abstract2').show(); $('#abstract_expand').hide(); }
Бесплатно
Реакция эритроидного ростка кроветворения на опухолевый рост у больных раком легкого
Статья научная
введение. Эритроциты, помимо транспорта кислорода в ткани, участвуют в поддержании гомеостаза, поэтому их качественная и количественная перестройка может отражать ряд изменений, происходящих в организме. Целью исследования явилось изучение состояния эритрона в целом и реакции красного ростка кроветворения у больных раком легкого с оценкой возможности использования таких реакций в качестве предиктивных признаков агрессивности опухолевого процесса. результаты. Получен клинический материал, свидетельствующий о наличии реакции эритроидного ростка кроветворения и ферментативного звена антиоксидантной системы на опухолевый процесс у больных раком легкого. Регистрируемые сдвиги в состоянии эритрона: концентрация гипоксией индуцированного фактора 1α, количественные и морфологические характеристики эритроцитов и ретикулоцитов, концентрация гемоглобина и активность супероксиддисмутазы периферической крови коррелируют с агрессивностью опухоли и тяжестью клинического состояния больных. Заключение. Комплексная оценка состояния красного ростка кроветворения может быть использована в выборе предиктивных критериев при составлении прогноза эффективности лечения и продолжительности жизни больных.
Бесплатно
Регуляторные Т-лимфоциты у больных с новообразованиями желудочно-кишечного тракта
Статья научная
Проведена оценка субпопуляций регуляторных Т-клеток (Трег) в периферической крови и лимфатических узлах больных раком желудка (РЖ, n=13) и колоректальным раком (КРР, n=10) на различных стадиях заболевания. Установлено, что при РЖ увеличение CD4+CD25+ и CD4+CD25high клеток наблюдалось только в периферической крови. Напротив, пациенты с КРР характеризовались увеличением CD4+CD25+/CD4+CD25high клеток в лимфатических узлах и снижением их в кровотоке. Выявленные изменения были наиболее выражены при поздних стадиях заболевания. Как у больных РЖ, так и у пациентов с КРР наблюдалось увеличение CD4+FOXP3+ клеток в периферической крови и еще в большей степени - в региональных лимфоузлах. Количество CD4+FOXP3+ клеток обратно коррелировало с функциональной (пролиферативной) активностью Т-клеток. Таким образом, при раке желудка и колоректальном раке наблюдаются разнонаправленные изменения субпо- пуляций Трег на системном и локорегиональном уровне, при этом угнетение функциональной активности Т-лимфоцитов ассоциировано только с CD4+FOXP3+ субпопуляцией клеток
Бесплатно
Роль n-ацетилцистеина в регуляции апоптоза опухолевых клеток линии Р19 при гипоксии
Статья научная
Введение. Гипоксия при опухолевом росте способствует формированию дисфункции митохондрий и выступает дополнительным фактором, усугубляющим окислительный стресс в иммортализированной клетке. Цель исследования - изучение молекулярных механизмов воздействия N-ацетилцистеина на редокс-регуляцию апоптоза опухолевых клеток при гипоксии. Материал и методы. Материалом для исследования служили культивированные в условиях гипоксии опухолевые клетки линии Р19 (тератокарцинома мыши). Редокс-статус модулировали N-ацетилцистеином (конечная концентрация 5 мМ). Методом проточной цитофлуориметрии определяли содержание активных форм кислорода, концентрацию ионов кальция, трансмембранный потенциал митохондрий, количество CD95-, CD120- и аннексин V-положительных клеток. Концентрацию компонентов системы глутатиона, SH-групп протеинов и карбонильных производных белков измеряли методом спектрофотометрии. Результаты. Применение N-ацетилцистеина в условиях гипоксии сопровождалось значимым увеличением концентрации общего глутатиона и SH-групп белков, снижением содержания ионов Са2+, белковосвязанного глутатиона и карбонильных производных протеинов, а также продукции активных форм кислорода и более адекватным функционированием митохондрий клеток линии Р19. N-ацетилцистеин способствовал формированию дополнительной устойчивости опухолевых клеток линии Р19 к апоптозу в условиях гипоксии. Заключение. В условиях гипоксии изменение состояния системы глутатиона влияет на изменение метаболизма опухолевой клетки в целом и способствует формированию дополнительных механизмов ускользания от клеточной гибели.
Бесплатно
Роль макрофагов в регуляции биосинтеза белка в клетках асцитной карциномы Эрлиха
Статья научная
Изучена роль перитонеальных макрофагов мышей с асцитной карциномой Эрлиха в поглощении и метаболической деградации белкового компонента липопротеинов высокой плотности. Обнаружено стимулирующее влияние кортизола на эти процессы. Показаны различия в спектрах внутриклеточных белков опухоль-ассоциированных макрофагов и перито- неальных макрофагов здоровых мышей, в частности, по содержанию аполипопротеина Е. Показано участие макрофагов в регуляции скорости биосинтеза белка в опухолевых клетках под влиянием липопротеинов высокой плотности и кортизола. Аполипопротеин Е может играть роль отрицательной обратной связи в данном механизме повышения скорости биосинтеза белка в опухолевых клетках.
Бесплатно
Роль матриксных металлопротеиназ в развитии и прогнозе плоскоклеточных карцином головы и шеи
Статья научная
Исследована прогностическая значимость определения ММП-2 и ММП-9 в сыворотке крови у 142 больных опухолями головы и шеи с распространенностью Т1-3N0-3M0 с помощью метода ИФА. Уровень содержания ММП-9 в сыворотке крови больных значительно превосходит уровень содержания маркера в сыворотке здоровых лиц. Установлена отрицательная корреляционная связь между уровнем ММП-2 в сыворотке крови и размером опухолевого узла, причем уровень маркера при Т1 стадии значительно выше, чем у здоровых лиц. Высокий уровень содержания ММП-9 в сыворотке крови является признаком плохого прогноза 2-летней общей, безрецидивной и безметастатической выживаемости больных ПКГШ. Высо- кая вероятность возникновения метастазов у больных опухолями головы и шеи связана с высокими уровнями как ММП-2, так и ММП-9 в сыворотке крови, исследованной до начала лечения.
Бесплатно
Статья научная
Основным системным компонентом лечения люминального рака молочной железы является гормонотерапия, базисным препаратом которой является тамоксифен. Гормонотерапия оказывается неэффективной в 20-40 %, при этом в качестве возможных причин рассматриваются особенности распределения и строения рецепторов эстрогенов альфа (ERα) в ткани опухоли. Реализация терапевтического действия тамоксифена осуществляется посредством блокирования активационного центра AF-2 рецептора, изменение функционального состояния которого в результате однонуклеотидных полиморфизмов кодирующего его участка rs2228480 (G/A) в 8 экзоне гена ERα рассматривается в качестве возможной причины неэффективности терапии тамоксифеном Цель исследования: изучение взаимосвязи экспрессии рецепторов эстрогенов альфа и полиморфных вариантов 8 экзона гена ERα с эффективностью антиэстрогенной терапии тамоксифеном у больных люминальным раком молочной железы. Материал и методы: в исследование были включены 97 пациенток с люминальным раком молочной железы T N M ста1-2 0-1 0 дии, получавшие адъювантную терапию тамоксифеном, сроки наблюдения составили от 24 до 130 мес. Отдаленные результаты лечения оценивались по факту прогрессирования заболевания в виде появления отдаленных метастазов. В образцах опухолевой ткани изучалась экспрессия к ERα иммуногистохимическим методом (антитела «Dako», клон 1D5, RTU, мышиные). Оценивались показатели степени и интенсивности экспрессии, а также характер распределения ERα. Изучались полиморфные варианты 8 экзона гена рецептора с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени. Результаты: при гомогенном распределении рецепторов степень и интенсивность экспрессии оказалась значимо выше. У пациенток с прогрессированием заболевания гетерогенное распределение наблюдалось в 86,5 %, при благоприятном исходе - в 58,3 % случаев (р=0,0072; χ 2=7,22). Мутация rs2228480 (G/A) в 8 экзоне гена Erα выявлена в 19,4 %, при этом в клетках опухоли с гомогенным распределением рецепторов случаев мутации не отмечено, при гетерогенном распределении мутации выявлены в 25,7 % (р=0,014; χ 2=6,09). Показано, что мутация в 8 экзоне гена ERα значимо чаще встречается у пациенток с прогрессированием заболевания (р=0,01; χ 2=6,52). Выводы: характер распределения рецепторов эстрогенов альфа и наличие мутации в 8 экзоне гена ERα в ткани опухоли можно рассматривать наряду со стандартными параметрами в качестве дополнительных предсказательных критериев эффективности антиэстрогенной терапии тамоксифеном у пациенток с люминальным типом рака молочной железы.
Бесплатно
Статья научная
Цель исследования - анализ и выявление наиболее значимых прогностических факторов, влияющих на безрецидивную выживаемость при лечении больных с глиомами головного мозга низкой степени злокачественности. Материал и методы. В исследование включены 107 пациентов с морфологически верифицированной астроцитомой (53,3 %), олигодендроглиомой (13,1 %) и олигоастроцитомой (33,6 %) WHO Grade II головного мозга. результаты. Возраст ≥40 лет, диффузная астроцитома, размер опухоли ≥6 см, смещение срединных структур головного мозга, умеренный или выраженный неврологический дефицит являются неблагоприятными факторами прогноза. Объем хирургического вмешательства, дебют опухолевого заболевания значимо не влияют на результат лечения. Наиболее высокие показатели БРВ отмечены для стадии Т, наиболее низкие - для стадии Т. Заключение. Необходимо учитывать 1 3 значимые прогностические факторы при планировании адъювантного лечения супратенториальных инфильтративных глиом головного мозга низкой степени злокачественности.
Бесплатно
Статья научная
Цель исследования - анализ и выявление наиболее значимых прогностических факторов, влияющих на безрецидивную выживаемость при лечении больных с глиомами головного мозга низкой степени злокачественности. Материал и методы. В исследование включены 107 пациентов с морфологически верифицированной астроцитомой (53,3 %), олигодендроглиомой (13,1 %) и олигоастроцитомой (33,6 %) WHO Grade II головного мозга. результаты. Возраст ≥40 лет, диффузная астроцитома, размер опухоли ≥6 см, смещение срединных структур головного мозга, умеренный или выраженный неврологический дефицит являются неблагоприятными факторами прогноза. Объем хирургического вмешательства, дебют опухолевого заболевания значимо не влияют на результат лечения. Наиболее высокие показатели БРВ отмечены для стадии Т, наиболее низкие - для стадии Т. Заключение. Необходимо учитывать 1 3 значимые прогностические факторы при планировании адъювантного лечения супратенториальных инфильтративных глиом головного мозга низкой степени злокачественности.
Бесплатно
Статья научная
Введение. Перекрестные связи между сигнальными путями эстрогеновых рецепторов и рецепторов факторов роста могут играть важную роль в возможном снижении устойчивости опухолей молочной железы к эндокринной терапии. Целью исследования явилось изучение взаимосвязи белковой и генной экспрессии рецептора трансформирующего фактора роста βI типа (TGF-βRI) и его полиморфных вариантов с эффективностью адъювантной терапии тамоксифеном при люминальном раке молочной железы (РМЖ). Материал и методы. В исследование включено 105 пациенток с люминальным подтипом РМЖ (T1-3N0-3M0), получавших тамоксифен в адъювантном режиме в стандартной дозировке 20 мг/сут. При оценке отдаленных результатов лечения пациентки, имевшие прогрессирование заболевания на фоне приема тамоксифена, составили тамоксифен-резистентную группу (ТАМ-Р), больные без признаков прогрессирования - тамоксифен-чувствительную группу (ТАМ-Ч). Уровень экспрессии гена TGF-BRI и полиморфизм TGF-BR1 (rs334354) были изучены с помощью ПЦР в режиме реального времени. Белковая экспрессия TGF-βRI в опухоли была оценена иммуногистохимическим методом. Результаты. Выявлен высокий уровень экспрессии мРНК TGF-BRI в опухоли у больных люминальным А подтипом по сравнению с люминальным B РМЖ (р=0,050). Показано, что носители мутантных генотипов и аллелей гена TGF-BRI (rs334354) чаще встречались у пациенток с люминальным А раком молочной железы (p=0,019 и p=0,007 соответственно). Уровень экспрессии белка TGF-βRI был значимо выше в тамоксифен-чувствительной группе по сравнению с тамоксифен-резистентными пациентками без учета подтипа опухоли (p=0,043). При разделении больных по молекулярному подтипу выявлена тенденция к взаимосвязи высокого уровня белковой экспрессии TGF-βRI с чувствительностью к терапии тамоксифеном среди больных люминальным В раком молочной железы (p=0,090). Заключение. Уровень экспрессии TGF-βRI в опухолевой ткани может рассматриваться в качестве потенциального молекулярно-генетического маркера эффективности эндокринной терапии тамоксифеном у больных люминальным раком молочной железы.
Бесплатно
Роль сиртуина 1 в регуляции клеток меланомы
Статья научная
Меланома кожи остается одним из самых опасных злокачественных новообразований среди населения со светлым типом кожи. Поиск новых эффективных способов лечения, включая терапию, основанную на выборе молекулярных мишеней, - одна из основных и сложных задач в изучении меланомы. Среди направлений экспериментальной онкологии выделяется исследование роли микроРНК, которые участвуют во многих физиологических и патологических процессах на эпигенетическом уровне. Ранее было выявлено, что уровень miR-204-5p снижается в злокачественных новообразованиях, в частности при меланоме кожи. Основной целью данной работы было определение функциональной роли гена-мишени miR-204-5p SIRT1 в патогенезе меланомы кожи. По итогам бионформатического анализа были идентифицированы гены-мишени данной микроРНК, влияющие на апоптоз, пролиферацию и жизнеспособность клеток. Оценка уровня пролиферации клеток меланомы под воздействием малых интерферирующих РНК осуществлялась при помощи MTT-теста и флуоресцентной микроскопии. Определение относительной активности люциферазы проводилось с использованием нуклеотидной последовательности ДНК 3'-некодирующей области гена SIRT1 и синтетического аналога miR-204-5p in vitro. Результаты двойного люциферазного теста показали, что miR-204-5p подавляет экспрессию SIRT1 посредством связывания с его 3'-некодирующей областью. Пролиферативная активность клеток меланомы снижалась через 48 ч в клетках меланомы после осуществления селективного нокдауна SIRT1. Результаты флуоресцентной микроскопии показали однонаправленную тенденцию с результатами МТТ-теста. МикроРНК miR-204-5p может регулировать пролиферацию клеток меланомы посредством воздействия на SIRT 1, который, в свою очередь, воздействует на активность процессов внутриклеточной сигнализации, имеющих отношение к динамике клеточного цикла.
Бесплатно
Статья научная
Введение. Возникновение резистентности и дальнейшая опухолевая прогрессия остаются актуальной проблемой в лечении меланомы кожи. Процесс аутофагии и эпителиально-мезенхимальный переход (ЭМП) тесно связаны между собой и играют ключевую роль в опухолевой прогрессии. Таргетное ко-ингибирование МЕК и mTOR киназ является потенциальной мишенью для терапии меланомы, нацеленной на блокирование ЭМП. Цель работы - изучение влияния ко-ингибирования МЕК и mTOR киназ на выживаемость, возможность формирования 30-сфероидов и миграционные способности клеточных линий меланомы, а также взаимосвязь этих изменений с маркерами ЭМП и аутофагии. Материал и методы. Работа проведена на клеточных линиях меланомы Mel Z и Mel MTP, полученных от пациентов, проходивших лечение в НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина. Оценку антипролиферативной активности биниметиниба и/или рапамицина исследовали МТТ-тестом. 30-сфероиды получали на основе RG0-пептидов, миграционную способность и инвазивность оценивали к камере Бойдена и базальном матриксе. Изменения экспрессии маркеров аутофагии и ЭМП исследованы иммуноцитохимически или иммуноблоттингом. Результаты. Рапамицин усиливал цитотоксичность биниметиниба как в 20-, так и в 30-культурах клеточных линий меланомы. При этом биниметиниб и рапамицин снижали инвазию, но не миграцию клеток меланомы in vitro. Эффективность комбинации связана со снижением маркеров ЭМП N-кадхерина и р-катенина и аутофагии в клетках меланомы - Беклин 1, р62/SQSTM1 и LC3BII. Заключение. Инактивация аутофагии и ЭМП позволяет преодолевать резистентность к существующей терапии и может быть рассмотрена как перспективная мишень для терапии меланомы.
Бесплатно
