Лабораторные и экспериментальные исследования. Рубрика в журнале - Сибирский онкологический журнал

Синергизм противоопухолевого действия диоксадэта и цисплатина на модели асцитной опухоли яичника

Беспалов В.Г., Жабин А.А., Стуков А.Н., Беляева О.А., Муразов Я.Г., Семенов А.Л., Коньков С.А., Крылова И.М.

Статья научная

Проведено сравнительное изучение противоопухолевой активности цитостатиков диоксадэта, цисплатина и их комбинации на модели асцитной опухоли яичника (ОЯ) у 38 крыс-самок Вистар. Асцитная ОЯ перевивалась внутрибрюшинно в количестве 5 × 10 6 клеток на крысу. Диоксадэт и цисплатин вводили внутрибрюшинно однократно через 48 ч после перевивки ОЯ в максимально переносимых дозах (МПД): 1,5 и 4,0 мг/кг массы тела соответственно. В комбинации диоксадэт и цисплатин вводили по той же схеме, но в дозах, составляющих половину от МПД. Противоопухолевые эффекты препаратов оценивали по увеличению продолжительности жизни животных. В контрольной группе крыс, не получавших лечения, средняя продолжительность жизни (СПЖ) составила 16 ± 6,3 дня. Диоксадэт и цисплатин проявили сравнимую противоопухолевую активность, увеличив СПЖ на 63,1 % и 48,1% соответственно. СПЖ при введении комбинации препаратов значимо увеличилась – на 107,5 %, что равно сумме эффектов каждого препарата в отдельности и позволяет говорить о синергическом противоопухолевом действии данных препаратов. Кроме того, комбинация диоксадэт + цисплатин характеризуется меньшей токсичностью и лучшей переносимостью по сравнению с цисплатином, введенным в МПД.

Бесплатно

Система тиоредоксина в регуляции пролиферации клеток линии MCF-7 при модуляции редокс-статуса

Степовая Елена Алексеевна, Шахристова Евгения Викторовна, Рязанцева Наталья Владимировна, Носарева Ольга Леонидовна, Чильчигашев Роман Игоревич, Егорова Мария Юрьевна

Статья научная

Введение. Несмотря на имеющиеся данные о функционировании опухолевых клеток в условиях свободнорадикального окисления, остается открытым вопрос о механизмах редокс-регуляции, управления пролиферацией клеток и «ускользания» от апоптотической гибели. Цель исследования - выявить участие системы тиоредоксина в регуляции пролиферации клеток аденокарциномы молочной железы линии МСF-7 при модуляции редокс-статуса блокатором SH-групп белков и пептидов N-этилмалеимидом и протектором тиоловых групп - 1,4-дитиоэритритолом. Материал и методы. Исследования были выполнены с использованием опухолевой клеточной линии МСF-7, культивируемой адгезионным методом. Редокс-статус клеток модулировали с помощью 5 мМ N-этилмалеимида, блокатора SH-групп белков и пептидов, и 5 мМ 1,4-дитиоэритритола, протектора тиоловых групп. Оценку содержания активных форм кислорода и клеточного цикла проводили методом проточной цитофлуориметрии. Концентрацию восстановленного окисленного глутатиона и активность тиоредоксинредуктазы определяли спектрофотометрическим методом. Внутриклеточное содержание тиоредоксина, циклина Е и циклинзависимой киназы 2 определяли методом вестерн-блоттинга. результаты. Показана важная роль системы тиоредоксина в регуляции пролиферации клеток линии МСF-7. Остановка клеточного цикла в S фазе при действии N-этилмалеимида и в G0/G1 фазе при действии 1,4-дитиоэритритола связана с изменениями активности редокс-чувствительных белковых комплексов, регулирующих пролиферацию (циклинов и циклинзависимых киназ). Заключение. Редокс-зависимая модуляция функционирования внутриклеточных белков, регулирующих пролиферацию, осуществляется при участии системы тиоредоксина. Данное направление исследований представляется перспективным для поиска молекулярных мишеней опухолевой трансформации клеток молочной железы.

Бесплатно

Система тиоредоксина в регуляции пролиферации клеток линии MCF-7 при модуляции редокс-статуса

Степовая Елена Алексеевна, Шахристова Евгения Викторовна, Рязанцева Наталья Владимировна, Носарева Ольга Леонидовна, Чильчигашев Роман Игоревич, Егорова Мария Юрьевна

Статья научная

Введение. Несмотря на имеющиеся данные о функционировании опухолевых клеток в условиях свободнорадикального окисления, остается открытым вопрос о механизмах редокс-регуляции, управления пролиферацией клеток и «ускользания» от апоптотической гибели. Цель исследования - выявить участие системы тиоредоксина в регуляции пролиферации клеток аденокарциномы молочной железы линии МСF-7 при модуляции редокс-статуса блокатором SH-групп белков и пептидов N-этилмалеимидом и протектором тиоловых групп - 1,4-дитиоэритритолом. Материал и методы. Исследования были выполнены с использованием опухолевой клеточной линии МСF-7, культивируемой адгезионным методом. Редокс-статус клеток модулировали с помощью 5 мМ N-этилмалеимида, блокатора SH-групп белков и пептидов, и 5 мМ 1,4-дитиоэритритола, протектора тиоловых групп. Оценку содержания активных форм кислорода и клеточного цикла проводили методом проточной цитофлуориметрии. Концентрацию восстановленного окисленного глутатиона и активность тиоредоксинредуктазы определяли спектрофотометрическим методом. Внутриклеточное содержание тиоредоксина, циклина Е и циклинзависимой киназы 2 определяли методом вестерн-блоттинга. результаты. Показана важная роль системы тиоредоксина в регуляции пролиферации клеток линии МСF-7. Остановка клеточного цикла в S фазе при действии N-этилмалеимида и в G0/G1 фазе при действии 1,4-дитиоэритритола связана с изменениями активности редокс-чувствительных белковых комплексов, регулирующих пролиферацию (циклинов и циклинзависимых киназ). Заключение. Редокс-зависимая модуляция функционирования внутриклеточных белков, регулирующих пролиферацию, осуществляется при участии системы тиоредоксина. Данное направление исследований представляется перспективным для поиска молекулярных мишеней опухолевой трансформации клеток молочной железы.

Бесплатно

Скрининг эффективности и антипролиферативного действия потенциальных ингибиторов DDIT4 на моделях рака молочной железы

Жидкова Е.М., Григорьева Д.Д., Лылова Е.С., Максимова В.П., Сагитова Г.Р., Хайриева Г.И., Трапезникова Е.С., Кирсанов К.И., Якубовская М.Г., Лесовая Е.А.

Статья научная

Цель исследования - скрининг отобранных нами ранее ингибиторов ddit4 по способности подавлять базальную и глюкокортикоид-индуцированную экспрессию данного гена в клетках рака молочной железы (РМЖ), а также оценка антипролиферативных и цитотоксических эффектов исследуемых комбинаций препаратов. Материал и методы. В исследовании использованы клетки РМЖ люминального, HeR2-положительного и тройного негативного подтипов. Методами количественной ПЦР и Вестерн-блоттинга было оценено влияние препаратов (рапамицина, вортманнина, lY-294002, апигенина, ресвератрола, куркумина, cgp-60474 и эметина) на базальный и индуцированный глюкокортикоидами уровень экспрессии гена DDIT4 и его белкового продукта. Результаты. Наиболее эффективными ингибиторами ddit4 оказались рвотное средство эметин, ингибитор протеинкиназы С cgp-60474 и модуляторы сигнального пути pi3K/akt/mtoR рапамицин, вортманнин и lY-294002. В отношении клеточных линий РМЖ были продемонстрированы цитотоксические эффекты и антипролиферативная активность комбинаций глюкокортикоида дексаметазона с противорвотным соединением эметином, ингибитором протеинкиназы С cgp-60474, а также фитонутриентами ресвератролом и куркумином. Заключение. Выявлены новые ингибиторы как базального, так и глюкокортикоид-индуцированного уровня белка и мРНК гена DDIT4 в клеточных моделях РМЖ in vitro . По итогам работы эметин и cgp-60474 являются наиболее перспективными препаратами для дальнейших исследований.

Бесплатно

Снижение токсического эффекта паклитаксела на систему крови водорастворимыми полисахаридами мать-и-мачехи обыкновенной и аира болотного

Сафонова Е.А., Разина Т.Г., Лопатина К.А., Федорова Е.П., Зуева Е.П., Гурьев А.М.

Статья научная

Водорастворимые полисахариды мать-и-мачехи обыкновенной и аира болотного снижают гематотоксический эффект паклитаксела у мышей-самок линии С57В1/6 с карциномой легких Льюис. Растительные полисахариды повышают уровень нейтрофильных гранулоцитов в периферической крови, увеличивают количество незрелых и зрелых нейтрофилов в кост- ном мозге, а также количество эритроидных клеток, при этом их гемостимулирующий эффект на гранулоциты сравним с таковым у препарата рекомбинантного колониестимулирующего фактора нейпогена

Бесплатно

Содержание производных оксида азота в крови онкологических больных с церебральными метастазами с различной степенью эндогенной интоксикации

Горошинская И.А., Сурикова Е.И., Айрапетов К.Г., Нескубина И.В., Шалашная Е.В., Немашкалова Л.А., Качесова П.С.

Статья научная

Исследовано содержание NO-производных (NO-гемоглобина, NO-глутатиона, NO-тирозина, пероксинитрита) и показате- ли эндогенной интоксикации в плазме крови больных с церебральными метастазами. Выявлено нарушение детоксикацион- ной функции альбумина, повышение концентрации NO-производных в плазме крови в зависимости от распространенности метастатического поражения головного мозга при нарастании эндогенной интоксикации вследствие значительного снижения связывающей способности альбумина. Полученные результаты позволяют судить о роли NO-производных в диссеминации опухоли и участии их в развитии эндотоксикоза.

Бесплатно

Создание ортотопических опухолей в молочной железе мышей BALB/C NUDE клетками рака молочной железы человека MCF-7 и ее VDAC-дефицитными производными

Мндлян Е.Ю., Семушина С.Г., Ржевский Д.И., Новикова Н.И., Калабина Е.А., Комков Д.С., Масленникова А.Ю., Мурашев А.Н., Холмухамедов Э.Л.

Статья научная

Цель исследования - изучить опухолеобразующую активность «диких» клеток mcF-7, несущих полный набор поринов (Vdac1, Vdac2, Vdac3), а также их генетически модифицированных клеток, из которых удалена одна из изоформ (mcF-7 Vdac1 Ko, mcF-7 Vdac2 Ko, mcF-7 Vdac3 Ko). Материал и методы. Исследование направлено на создание животной модели ортотопических опухолей в молочной железе иммунодефицитных мышей BalB/c Nude путем имплантации суспензии клеток рака молочной железы человека (mcF-7) и производных этих клеток, полученных нокаутом одной из выбранных изоформ митохондриальных поринов (Vdac1, Vdac2 или Vdac3). Опухоли создавались путем инъекции в жировую ткань молочной железы мышей BalB/c Nude суспензии клеточных линий либо диких mcF-7 (содержащих все три изоформы поринов, Vdac1, Vdac2 и Vdac3) либо ее Vdac-дефицитных производных «mcF-7 Vdac1 Ko», «mcF-7 Vdac2 Ko» и «mcF-7 Vdac3 Ko» в дозе 4х106 клеток на одну инъекцию. Проведён патоморфологический анализ места имплантации опухолевых клеток, самой опухоли, а также органов брюшной и грудной полости. результаты. Показана возможность успешного создания ортотопических опухолей в жировой ткани иммунодефицитных голых мышей BalB/c Nude эпителиальными клетками рака молочной железы человека «mcF-7 Wt», содержащими полный набор изоформ митохондриальных поринов и ее Vdac-дефицитными производными. Опухолеобразующая активность имплантированных клеток коррелирует с их цитотоксическим действием на внутренние органы животного. По результатам патоморфологического анализа можно сделать вывод о том, что за исключением клеток типа «mcF-7 Vdac1 Ko», которые не образовали опухолей, все остальные имплантированные клеточные культуры «mcF-7 Wt», «mcF-7 Vdac2 Ko» и «mcF-7 Vdac3 Ko» вызывали патологические изменения состояния легких, печени и селезенки, а также наличие других опухолевидных новообразований. заключение. Полученные данные будут использованы для оптимизации объема инъекции и количества клеток, а также для уточнения динамики роста опухолей, пригодного для изучения действия противоопухолевых препаратов на опухолях, образованных клетками рака молочной железы человека (mcF-7) и ее генетически модифицированными Vdac-дефицитными производными.

Бесплатно

Создание ортотопической модели рака эндометрия

Франциянц Е.М., Шихлярова А.И., Каплиева И.В., Бандовкина В.А., Погорелова Ю.А., Нескубина И.В., Трепитаки Л.К., Сурикова Е.И., Моисеенко Т.И., Черярина Н.Д., Котиева В.М., Верескунова А.А., Меньшенина А.П., Рогозин М.А., Ишонина О.Г., Ушакова Н.Д.

Статья научная

Цель исследования - создание модели карциномы матки у самок белых беспородных крыс путем трансплантации опухоли Герена непосредственно в рог матки. Материал и методы. Эксперимент был проведен на нелинейных белых крысах (n=15), массой 250 ± 25 гр. Белым беспородным крысам-самкам в условиях ксилазин-золетилового наркоза в асептических условиях скальпелем проводилась срединная лапаротомия. Длина разреза 2 см. В просвет правого маточного рога с помощью внутривенного катетера с инъекционным портом 22G (0,9 × 25 mm) вводили 0,5 мл опухолевой взвеси, содержащей 2,5-3,5×106 клеток. Подсчет опухолевых клеток производился на клеточном анализаторе ADAMII LS (Nano Entek, Korea). Длительность эксперимента - 21 сут. После декапитации животных производилась морфологическая оценка препаратов опухолевого узла, окрашенных гематоксилин-эозином и по Ван-Гизон.

Бесплатно

Создание пациентоподобной модели рака пищевода на иммунодефицитных мышах

Кит Сергей Олегович, Максимов Роман Алексеевич, Гончарова Анна Сергеевна, Лукбанова Екатерина Алексеевна, Карнаухов Николай Сергеевич, Непомнящая Евгения Марковна, Миндарь Мария Вадимовна, Ткачев Сергей Юрьевич, Колесников Евгений Николаевич

Статья научная

Введение. Для изучения противоопухолевого действия веществ in vivo требуется создание модели, отражающей основные характеристики заболевания человека. Такому требованию могут отвечать пациентоподобные ксенографты (Patient Derived Xenograft - PDX) на иммунодефицитных мышах. Пациентоподобные модели опухолей считаются наиболее прогрессивными по причине их способности сохранять после имплантации свои первоначальные свойства, характеризующиеся разнообразием на гистологическом и молекулярном уровне. Целью исследования явилось создание PDX-модели рака пищевода человека в шейном отделе пищевода иммунодефицитных мышей. Материал и методы. Для создания PDX-модели рака пищевода человека было использовано 11 самцов иммунодефицитных мышей линии Balb/c Nude массой 19-22 г. Фрагмент опухоли был взят от пациента с диагнозом инфильтративно-язвенного рака - умереннодифференцированной плоскоклеточной карциномы без ороговения. Результаты. В результате имплантации донорского фрагмента опухоли наблюдалось полное приживление материала у 6 (54,5 %) из 11 животных, что согласуется с литературными данными. По результатам морфологических исследований, пациентоподобный ксенографт является плоскоклеточной карциномой, что гистологически соответствует опухоли пациента.

Бесплатно

Сопряженность цитокинового профиля супернатанта инвазивной карциномы молочной железы с ее молекулярными и гистопатологическими характеристиками

Аутеншлюс А.И., Архипов С.А., Михайлова Е.С., Архипова В.В., Вараксин Н.А.

Статья научная

Цель исследования - изучение сопряженности между показателями цитокинового профиля супернатантов образцов инвазивной карциномы молочной железы неспецифического типа (ИКНТ), ее молекулярными и гистопатологическими параметрами, экспрессией CD34 как маркера ангиогенеза и метастазированием в регионарные лимфатические узлы (РЛУ). Материал и методы. в биоптатах ИКНТ от 28 пациенток в возрасте 37-60 лет исследовали продукцию 14 цитокинов. Концентрацию цитокинов в супернатантах биоптатов (КЦСБ) определяли (в пг/мл) с помощью иммуноферментного анализа (ИФА). Экспрессию CD34 и маркеров молекулярных подтипов ИКНТ (HER2/neu, ER, PR, Ki67) в биоптатах ИКНТ оценивали иммуногистохимическим методом. Относительное содержание опухолевых клеток различной степени дифференцировки в образцах ИКНТ оценивали гистопатологическим анализом.

Бесплатно

Состояние парных лимфатических узлов при спонтанных опухолях системы крови у мышей

Манских В.Н.

Статья научная

Обнаружена асимметрия поражения ренальных лимфатических узлов у лабораторных мышей (BALB/c) со спонтанными опухолями системы крови (лимфомами и лейкозами): левый орган вовлекался значительно чаще и его поражение (увеличение) было более выраженным по сравнению с правым. Различия не зависели от гистологической формы опухоли и пола. Mикроскопическая картина в пораженных лимфатических узлах также не различалась. Вовлечение других лимфатических узлов не проявляло закономерной асимметрии. Вероятно, обнаруженные различия связаны с описанным в литературе феноменом более интенсивного синтеза правым надпочечником глюкокортикоидов по сравнению с левым и, соответственно, большим количеством этих гормонов, оказывающих антипролиферативное действие на клетки лимфом в лимфе, оттекающей в ипсилатеральные лимфатические узлы.

Бесплатно

Состояние про- и антиоксидантной активности сыворотки крови у крыс с карциносаркомой Walker-256

Ефремов А.В., Овсянко Е.В., Цырендоржиев Д.Д., Мичурина С.В., Пахомова Ю.В.

Статья научная

Исследована динамика про- и антиоксидантной активности, а также состояние перекисного окисления липидов в сыворотке крови крыс-самцов линии Вистар с перевиваемой карциносаркомой Walker-256. Суспензию клеток переви- ваемой карциносаркомой Walker-256 вводили в мышцу бедра в дозе 106 клеток. Для получения сыворотки крови крыс декапитировали под эфирным наркозом, спустя пять суток с момента перевивки опухоли, на 3, 7 и 14-е сут эксперимента. Для оценки баланса в системе «оксиданты-антиоксиданты» были произведены расчеты коэффициента соотношения между показателями про- и антиоксидантной активности сыворотки крови крыс. На всех сроках развития карциносаркомы Walker-256 наблюдалось повышение коэффициента соотношения про- и антиоксидантной активности сыворотки крови крыс, свидетельствующее о смещении баланса в системе «оксиданты-антиоксиданты» в сторону оксидантов, что говорит о развитии окислительного стресса

Бесплатно

Состояние секреторной и регенераторной функций желудка при канцерогенезе

Матвеева Л.В., Мосина Л.М.

Статья научная

Проведено комплексное обследование 32 больных раком желудка, проходивших лечение в Мордовском республиканском онкологическом диспансере в 2010–2011 гг. Для дифференциации в исследование включены пациенты с обострением хронического гастрита и язвенной болезни желудка. Методом твердофазного иммуноферментного анализа в сыворотке крови обследуемых определяли концентрации пепсиногена-1, -2 и их соотношение. Выявлены изменения маркеров секреции слизистой оболочки желудка, обратно взаимосвязанные со стадией опухолевого процесса. Низкие значения соотношения пепсиногенов у большинства больных раком желудка свидетельствуют о роли атрофических изменений слизистой оболочки в канцерогенезе.

Бесплатно

Спектр высших жирных кислот опухолевой ткани при раке шейки матки с различной степенью дифференцировки

Хышиктуев Б.С., Каюкова Е.В., Каюков В.А., Терешков П.П.

Статья научная

С помощью метода газожидкостной хроматографии изучен спектр высших жирных кислот опухолевой ткани при раке шейки матки (РШМ) с различной дифференцировкой. Независимо от степени дифференцировки РШМ наблюдается высокий уровень насыщенных жирных кислот по сравнению с контролем, главным образом, за счет увеличение количества С14:0 и появления нехарактерной для организма человека С19:0. Наблюдается повышенное содержание моноеновых ЖК в опухолевой ткани по сравнению с контрольными образцами. Дефицит полиеновых ЖК ω-6 серии отмечается во всех участках тканей. Выявлены особенности жирнокислотного состав РШМ с различной степенью дифференцировки.

Бесплатно

Спектр генетических вариантов, ассоциированных с наследственным раком молочной железы и яичника, у пациенток из Республики Дагестан

Ибрагимбекова М.М., Мурачуев М.А., Янус Г.А., Буттаева Б.Н., Романько А.А., Ломакова А.Е., Белогубова Е.В., Преображенская Е.В., Семина М.В., Суспицын Е.Н., Соколенко А.П., Имянитов Е.Н.

Статья научная

Введение. Существенная доля пациенток с раком молочной железы (РМЖ) и раком яичников (РЯ) являются носителями мутаций в генах наследственных опухолевых синдромов. Наиболее часто наследственные формы РМЖ и РЯ связаны с дефектами генов BRCA1 и BRCA2. При этом спектр мутаций различается у представителей различных народов, отражая особенности генетического груза. Население Дагестана обладает уникальными генетическими характеристиками вследствие исторических и демографических факторов. Республика является одним из наиболее многонациональных регионов РФ, где живут представители многочисленных этнолингвистических групп (аварская, лезгинская, даргинская, лакская и др.), что позволяет предположить существование повторяющихся патогенных генетических вариантов, т.е. наличие «эффекта основателя», у представителей дагестанских народов. Цель исследовании – изучение молекулярной эпидемиологии семейного РМЖ/РЯ в Республике Дагестан. Материал и методы. В исследование включено 610 пациенток – представительниц различных народностей Республики Дагестан. Кодирующие последовательности генов BRCA1, BRCA2, PALB2, ATM, TP53, CHEK2, NBN, BRIP1, BARD1, RAD51, RAD51B, RAD51C, RAD51D, RAD54L были проанализированы методом таргетного высокопроизводительного секвенирования. Результаты. В исследованной группе наиболее частыми патогенными вариантами были BRCA1 c.66dup, c.115T>C [p.Cys39Arg], c.4709del, BRCA2 p.Gln3299Ter и c.5621_5624del. Среди других генов повторяющимся был только один патогенный аллель – CHEK2 c.817_818del [rs1474786480]. Идентифицировано несколько этноспецифических вариантов генов BRCA1 и BRCA2, доминирующих в тех или иных этнических группах Республики Дагестан: у пациенток лезгинского происхождения преобладал аллель BRCA1 с.66dup (7/12 (58 %) всех вариантов BRCA1/2 в данной этнической группе), у даргинок – BRCA1 c.4709del (4/12 (33 %)). У пациенток аварской группы выявлено несколько частых вариантов, все из которых относились к гену BRCA2: p.Gln3299Ter (8/21 (38 %) всех вариантов BRCA1/2 у аварцев), c.5621_5624del (5/21 (24 %)), p.Arg2659Lys (3/21 (14 %)). У лакцев также наблюдался founder-эффект в отношении гена BRCA2: все случаи мутаций BRCA1/2 представлены одним аллелем BRCA2 c.429del. Вариант BRCA1 p.Cys39Arg встречался у представительниц нескольких народностей: кумыков, аварцев, даргинцев. У пациенток табасаранского происхождения патогенные варианты не выявлены. Заключение. Разнообразие выявленных мутаций отражает длительные миграционные процессы и этническую уникальность дагестанских популяций.

Бесплатно

Спектр мутаций BRCA1/2 у пациенток армянского происхождения с раком молочной железы и яичника

Белышева Я.В., Бакаева Э.Х., Венина А.Р., Романько А.А., Раскин Г.А., Соколенко А.П., Суспицын Е.Н., Аветисян А.А., Орлов С.В., Имянитов Е.Н.

Статья научная

Цель исследования - сравнить спектры патогенных вариантов BRCA1 и BRCA2 у пациенток с наследственными формами рака молочной железы (РМЖ) и рака яичников (РЯ) - представительниц двух групп этнических армян: из Еревана и городов юга России. Материал и методы. В исследование включено 106 больных РМЖ из Национального центра онкологии им. В.А. Фанарджяна (Ереван, Республика Армения) и 117 пациенток с РМЖ и РЯ армянского происхождения, которые были направлены в НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова (Санкт-Петербург) из нескольких онкологических диспансеров России (Краснодар, Сочи, Пятигорск). Анализ кодирующих последовательностей генов BRCA1 и BRCA2 выполнялся методом таргетного высокопроизводительного секвенирования.

Бесплатно

Способность искусственных антигенных конструкций, содержащих эпитопы белков, ассоциированных с меланомой, стимулировать цитотоксическую активность мононуклеарных клеток периферической крови в отношении клеток меланомы

Боробова Елена Александровна, Антонец Денис Викторович, Старостина Екатерина Владимировна, Карпенко Лариса Ивановна, Жеравин Александр Александрович, Ильичев Александр Алексеевич, Бажан Сергей Иванович

Статья научная

Цель исследования - оценить способность ДНК-конструкций pMEL-TCI и pMEL-A0201, кодирующих искусственные полиэпитопные антигены меланомы, стимулировать противоопухолевый ответ в системе индукции Т-клеточного ответа ex vivo. материал и методы. Изучение цитотоксической активности проводилось в системе индукции Т-клеточного ответа ex vivo с использованием мононуклеарных клеток (МНК) периферической крови HLA-A*02:01 позитивных доноров. Цитотоксическую активность оценивали двумя методами: 1) по способности МНК, стимули-рованных дендритными клетками, трансфицированными плазмидами pMEL-TCI и pMEL-A0201, вызывать лизис клеток меланомы человека линии Mel Is, а также 2) по уровню их гранзим-продуцирующей активности. В качестве положительного контроля использовалась рекомбинантная плазмида, кодирующая полноразмерный антиген клеток меланомы MART-1. Результаты. Полученные результаты показали, что дендритные клетки HLA-A*02:01+ доноров, трансфицированные плазмидными конструкциями pMel-A0201 и pMel-TCI, стимулировали цитотоксическую актив-ность аутологичных МНК в отношении клеток меланомы Mel Is. Как по эффективности индукции цитотоксического ответа, так и по уровню стимуляции продукции гранзима B аллелеспецифическая конструкция достоверно пре-взошла конструкцию, кодирующую полноразмерный белок MART1. заключение. ДНК-вакцинные конструкции, кодирующие искусственные полипептиды, составленные из эпитопов опухолевых антигенов, способны стимулиро-вать противоопухолевый цитотоксический ответ. Данный подход может послужить основой для разработки новых способов иммунотерапии онкологических заболеваний.

Бесплатно

Способность модифицированных витаминов Е и C модулировать терапевтическое действие циклофосфана

Иванова А.А., Иванов В.В., Чердынцева Н.В., Шепилова В.А., Кагия Т.В.

Статья научная

На мышах линии C57Bl/6 с карциномой легких Льюис проведено экспериментальное исследование способности новых модифицированных витаминов с антиоксидантными свойствами - гликозидов витамина Е (TMG) и витамина С (AAG) - модулировать терапевтическую активность циклофосфана. Было показано, что применение циклофосфана в дозе 60 мг/кг совместно с TMG и AAG дает в результате выраженный антиметастатический эффект, который сопоставим с эффектом действия одного циклофосфана в максимальной терапевтической дозе 120 мг/кг.

Бесплатно

Способы определения относительной биологической эффективности нейтронов в дистанционной нейтронной терапии

Лисин В.А.

Статья научная

Важным фактором, влияющим на качество нейтронной терапии, является относительная биологическая эффективность (ОБЭ) нейтронов, поэтому количественной оценке этой величины уделяют значительное внимание. Для получения необходимой информации применяют экспериментальные и клинические исследования, различные математические и радиобиологические модели. Исследования проводят для различных источников нейтронов, отличающихся способом получения частиц, энергией и энергетическим спектром. Цель исследования - проанализировать зависимости ОБЭ нейтронов от дозы в дистанционной нейтронной терапии на циклотроне У-120 и генераторе НГ-12И. Материал и методы. Рассмотрены известные способы оценки относительной биологической эффективности нейтронов для нейтронной терапии и выбран оптимальный способ решения данной задачи. Для получения зависимости ОБЭ нейтронов от дозы применена многомишенная модель клеточной выживаемости. Результаты. Получены зависимости ОБЭ нейтронов циклотрона У-120 и генератора НГ-12И от дозы для однократного облучения биологических объектов. Показано, что характер функций в области доз, интересующих нейтронную терапию, находится в согласии с характером аналогичных зависимостей, найденных другими авторами в экспериментальных и клинических исследованиях.

Бесплатно

Сравнительный анализ миграционной активности и инвазивного потенциала культивируемых клеток солидных опухолей человека

Данилова Анна Борисовна, Нехаева Татьяна Леонидовна, Мисюрин Всеволод Андреевич, Авдонкина Наталья Александровна, Емельянова Наталья Викторовна, Балдуева Ирина Александровна

Статья научная

Введение. Понимание последовательности событий, обеспечивающих инвазивность малигнизированных клеток, имеет важное прогностическое значение. Изучение клеточных и молекулярных основ метастатического процесса закладывает основу для дальнейшего прогресса в лечении онкологических больных. Цель исследования - провести сравнительный анализ in vitro процессов миграции и инвазии культивируемых клеток солидных опухолей человека, выделенных из первичных и метастатических очагов. Материал и методы. Исследование проведено на клеточных культурах меланомы кожи (МК, n=29), рака почки (РП, n=2), колоректального рака (КРР, n=1), сарком мягких тканей (СМТ) и остеогенных сарком (ОС, n=39), выделенных из операционного материала пациентов, получавших лечение в НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова. Миграцию и инвазию оценивали в режиме реального времени на приборе xCelligence (ACEA Bioscience inc., США). Осуществляли корреляционный анализ экспрессии раковых тестикулярных антигенов и продукции опухолевыми клетками спектра иммуносупрессивных факторов с параметрами миграции и инвазии. Результаты. Все исследованные культуры клеток солидных опухолей (n=65) демонстрировали in vitro инвазивный потенциал (iP), который составил для клеток РП 73,79 %; МК - 53,16 %; СМТ и ОС - 43,96 %; КРР - 5,16 %. Скорость миграции (MS) и инвазии (Slopeinv) была выше у клеток СМТ и ОС по сравнению с МК - 39,33 и 25,3 мкм/ч (p-3 соответственно (p function show_abstract() { $('#abstract1').hide(); $('#abstract2').show(); $('#abstract_expand').hide(); }

Бесплатно