Лабораторные и экспериментальные исследования. Рубрика в журнале - Сибирский онкологический журнал
Статья научная
Цель исследования - оптимизация метода оценки образования маммосфер после индуцированной интерлейкином 6 (IL6) стволовой пластичности у дифференцированных (CD44-) опухолевых клеток линии рака молочной железы человека T47D. Материал и методы. Проведена оценка жизнеспособности, цитофлуориметрического профиля клеток и их способности к маммосферообразованию при различной исходной конфлюентности (40-50 % и 70-80 %) и методах снятия с поверхности пластика (использование TrypLE, аккутазы, скребка для клеток). Жизнеспособность клеток оценивали методом проточной цитометрии с использованием флуоресцентно-меченного АннексинV и йодистого пропидия. Динамику изменения экспрессии поверхностных маркеров клеток оценивали методом проточной цитометрии с флуоресцентно-меченными антителами к CD24 и CD44. Результаты. Применение скребка для снятия клеток приводило к существенному повышению количества клеток с цитофлуо-риметрическими признаками раннего и позднего апоптоза по сравнению с использованием TrypLE и аккутазы. Использование TrypLE приводило к снижению количества CD44+ клеток, тогда как аккутаза не влияла на представленность данного маркера. Количество маммосфер и их средний диаметр не отличались между исследуемыми группами. Стимуляция дифференцированных (CD44-CD24+) клеток линии T47D IL6 уже через 24 ч приводила к появлению популяций CD44+CD24+ прогениторных и CD44+CD24-/low опухолевых стволовых клеток. Дифференцированные клетки после стимуляции IL6 в течение 24 ч образовывали в 3 раза больше маммосфер по сравнению с контролем. Заключение. Для оценки маммосферообразования целесообразно использовать клетки с конфлюентностью до 80 % и применять аккутазу для снятия с поверхности пластика. Для стимуляции стволовой пластичности у дифференцированных клеток линии T47D достаточной является их инкубация с IL6 в течение 24 ч.
Бесплатно
Статья научная
Цель исследования - сравнить морфофункциональные свойства мезенхимных стволовых клеток из тканей молочной железы и ткани химически-индуцированной опухоли молочной железы. материал и методы. У 20 крыс-самок Wistar после синхронизации эструса хорионическим гонадотропином, интрамаммарным введением N-метил-N-нитрозомочевины индуцирована аденокарцинома молочной железы, контрольную группу составили 5 крыс. Верификацию опухоли проводили гистологически и иммуногистохимически. Принадлежность выделенных клеток из ткани молочной железы и опухоли молочной железы к мезенхимным стволовым клеткам верифицировали на основании морфологии и фенотипирования на проточном цитофлуориметре FACS Canto II. Функциональные свойства мезен-химных стволовых клеток оценивали в МТТ-тесте и по уровню продукции оксида азота в норме и при индукции перекисью водорода окислительного стресса. Уровни пролактина, лютеинизирующего гормо-на и эстрадиола Е2 в моче исследовали твердофазным иммуноферментным анализом. Результаты. Химически индуцированная опухоль молочной железы по данным гистологического и иммуногистохи-мического исследования соответствовала люминальному В1 типу рака молочной железы у человека. Уровни пролактина в моче после синхронизации эструса у животных с развившейся опухолью были повышены, а у животных с неразвившейся опухолью молочной железы снижены уровни пролактина и лютеинизирующего гормона, но повышены уровни эстрадиола Е2. Из ткани опухоли молочной железы получено большее количество мезенхимных стволовых клеток с фенотипом CD45-/CD90+. Мезен-химные стволовые клетки из ткани опухоли проявляли повышенный пролиферативный потенциал и были более устойчивы к окислительному стрессу. заключение. Из ткани химически индуцированной опухоли молочной железы получены опухоль-ассоциированные мезенхимные стволовые клетки, кото-рые имеют высокий пролиферативный потенциал и устойчивы к окислительному стрессу. Выявленные морфофункциональные различия мезенхимных стволовых клеток из тканей молочных желез и ткани опухоли молочной железы требуют дальнейшего исследования.
Бесплатно
Опыт диагностики редких опухолей пищеварительной системы у лабораторных мышей
Статья научная
Описаны три случая редко встречающихся опухолей у лабораторных мышей - миоэпителиальная карцинома слюнной железы, злокачественная нейроэндокринная опухоль (карциноид) слепой кишки, инсулярная карцинома поджелудочной железы. Карциноид слепой кишки впервые диагностирован как спонтанное новообразование у мышей без генетических модификаций. Представлен анализ диагностических признаков этих неоплазм и их особенностей в сравнении со случаями, описанными в литературе.
Бесплатно
Опыт диагностики редких опухолей системы крови у лабораторных мышей
Статья научная
Представлены четыре случая редко встречающихся опухолей у лабораторных мышей: мастоцитомы нижнечелюстного лимфатического узла, мегакариоцитарного лейкоза, эритробластомы селезёнки (недиссеминированного эритролейкоза), лимфомы маргинальной зоны селезёнки, причём три последние неоплазмы были впервые диагностированы как спонтанные новообразования у животных без генетических модификаций. Особое внимание было обращено на диагностические признаки и особенности таких опухолей в сравнении со случаями, описанными в литературе.
Бесплатно
Статья научная
Исследованы особенности воспалительного инфильтрата СОЖ у больных с предопухолевыми изменениями (n=56) и раком желудка (n=50) с различным уровнем гуморального иммунитета к вирусу Эпштейна - Барр (ВЭБ) и вирусной нагрузки ВЭБ. У больных с диспластическими изменениями СОЖ при увеличении титра антител к IgG к ВКА происходят изменения клеточного состава инфильтрата, выражающиеся в существенном снижении количества лимфоцитов, нейтрофилов и макрофагов и увеличении количества эозинофилов и плазмоцитов. При увеличении титра IgA к ВКА и IgG к РА ВЭБ в составе клеточного инфильтрата достоверно падает количество нейтрофилов. Состав клеточного инфильтрата опухоли у больных раком желудка с различным уровнем гуморального иммунитета к ВЭБ имел другие особенности: при увеличении титра IgG к ВКА и IgA к ВКА в воспалительном инфильтрате опухоли снижается количество плазмоцитов и эозинофилов. При высоких титрах IgA к ВКА снижается и количество нейтрофилов в опухоли и несколько возрастает доля макрофагов. Полученные данные могут служить дополнительными критериями для выявления маркеров вирусного поражения слизистой оболочки желудка
Бесплатно
Особенности воспалительной реакции в микроокружении плоскоклеточных карцином головы и шеи
Статья научная
Цель исследования - анализ ассоциации характера воспалительной инфильтрации в плоскоклеточных карциномах головы и шеи с наличием 5 типов опухолевых структур и лимфогенным метастазированием. материал и методы. У 44 пациентов проводилась оценка морфологической гетерогенности опухоли, уровня воспалительной инфильтрации стромы, подсчет CD4+ и CD8+ T-лимфоцитов, B-лимфоцитов и макрофагов в инфильтрате и клеток Лангерганса в опухолевых структурах. Клеточные элементы воспалительного инфильтрата определяли при помощи иммуногистохимического исследования. Результаты. Количество клеток Лангерганса в структурах 1-го типа, представляющих собой высокодифференцированные клетки с ороговением в центре, коррелирует с наличием CD3+ и CD4+ T-лимфоцитов в воспалительном инфильтрате. У пациентов с метастатическим поражением лимфоузлов наблюдается снижение уровня воспалительной инфильтрации и количества CD3+ T-клеток по сравнению с пациентами с интактными лимфоузлами. У пациентов с метастатическим поражением лимфоузлов, в отличие от случаев с отсутствием лимфогенного метастазирования, выявлена связь между степенью дифференцировки клеток в опухолевых структурах и наличием в воспалительном инфильтрате тех или иных субпопуляций лимфоцитов. При наличии высокодифференцированных структур в инфильтрате увеличена доля CD4+ и/или CD8+ и/или CD20+ лимфоцитов. В опухолях с низкодифференцированными структурами 3-5-го типа зависимость обратная: уменьшена доля CD3+ и/или CD8+ и/или CD20+ лимфоцитов. заключение. Проведенное исследование свидетельствует о снижении уровня воспалительной реакции, включая Т-клеточный ответ, у пациентов с реализованным лимфогенным метастазированием, а также демонстрирует в этой группе наблюдения ассоциацию наличия опухолевых структур разной степени дифференцировки с выраженностью и характером воспалительного инфильтрата. Показана связь клеток Лангерганса со стромальной воспалительной реакцией.
Бесплатно
Статья научная
Исследование вошли 63 больных, прооперированных по поводу плоскоклеточного рака легкого. Материалом для морфологического исследования явились находящиеся на расстоянии 4–5 см от опухоли фрагменты ткани удаленного легкого с бронхом. Для оценки особенностей характера воспалительной реакции при различных вариантах дисрегенерации исследовали наличие клеток, экспрессирующих Ki67, p53, bcl-2, CD138, CD117, CD68 и CD79α, в инфильтрате каждого из вариантов дисрегенераторных изменений. Воспалительный инфильтрат при плоскоклеточной метаплазии характеризовался наличием большого количества пролиферирующих клеток и клеток, экспрессирующих p53 и bcl-2. Выраженность инфильтрации стромы плазматическими, тучными клетками и макрофагами в этом случае снижалась. Базальноклеточная гиперплазия в присутствии плоскоклеточной метаплазии характеризовалась большим числом пролиферирующих клеток и лейкоцитов, экспрессирующих p53 и bcl-2, большим количеством плазматических клеток и уменьшением числа макрофагов. Характер воспалительной реакции при плоскоклеточной метаплазии был одинаков и не зависел от того, сочетается или нет плоскоклеточная метаплазия с базальноклеточной гиперплазией и неоплазией. Исключение составляла только более выраженная инфильтрация в участках плоскоклеточной метаплазии CD68+ макрофагами в случаях ее сочетания с неоплазией.
Бесплатно
Статья научная
Высокая распространенность, поздняя выявляемость рака желудка и широкая инфицированность населения вирусом Эпштейна - Барр (ВЭБ) ставят оценку роли вируса в опухолевой прогрессии и прогнозе заболевания на ведущие позиции. В статье представлены результаты определения концентрации специфических противовирусных иммуноглобулинов в сыворотке крови у пациентов с диспластическими процессами слизистой оболочки желудка (СОЖ) (n=56) и больных раком желудка (n=54), а также частоты встречаемости их титров в зависимости от локализации и гистотипа опухоли. Показано, что у больных с предопухолевыми изменениями в СОЖ нарастание титра IgG к вирусному капсидному антигену (ВКА) ВЭБ и IgG к ранним антигенам (РА) ВЭБ в сыворотке крови связано с усилением активности воспаления. У пациентов с раком желудка значительно чаще, чем при дисплазиях, встречались высокие титры IgG к ВКА и IgG к РА, а снижение степени дифференцировки опухоли сопровождалось повышением концентрации IgG к ВКА ВЭБ. При локализации опухоли в теле и кардиальном отделе отмечались высокие титры (≥1:320) IgG к ВКА и более высокие концентрации IgА к ВКА. Выявлена явная ассоциация высоких титров IgG к ВКА ВЭБ с наличием экзофитной и экзофитно-изъязвленной форм роста опухоли.
Бесплатно
Особенности заболеваемости раком шейки матки населения Читинской области
Статья научная
Представлены результаты эпидемиологического анализа распространения рака шейки матки в регионе Сибири и Даль- него Востока в целом и отдельно взятой территории - Читинской области - за 1994-2008 гг. В среднем по региону уровни заболеваемости на 20-30 % выше, чем по РФ. Читинская область относится к территориям самого высокого риска по раку шейки матки; заболеваемость была в 2 раза выше средней по региону. В структуре онкологической заболеваемости эта локализация занимает 2-е ранговое место после рака молочной железы. Наиболее уязвимым в отношении этого заболе- вания является возраст 25-44 года, когда раку шейки матки принадлежит более половины случаев всех злокачественных новообразований. Отмечен рост заболеваемости раком шейки матки в Сибири и на Дальнем Востоке, который особенно отчетливо проявился в Читинской области.
Бесплатно
Статья научная
Рак молочной железы занимает ведущую позицию в структуре заболеваемости и смертности от злокачественных новообразований у женщин репродуктивного возраста. Прогрессия опухоли зависит от характера стромально-паренхиматозных отношений. Микроокружение опухоли во многом определяет вариант и степень выраженности прогрессии. Существенным элементом микроокружения является «опухолевая ниша», которая, по существующим представлениям, включает, кроме клеточных элементов иммунной системы, костномозговые клетки-предшественники. В нашем исследовании охарактеризованы параметры опухолевой ниши инвазивной протоковой карциномы молочной железы неспецифического типа (ИПКНТ), ассоциированные с лимфогенным метастазированием. Цель исследования - изучение особенностей клеточного состава опухолевой ниши ИПКНТ. Материал и методы. В исследование включено 128 больных с диагнозом ИПКНТ T1-3N0-3M0 стадии, в возрасте от 29 до 90 лет, прооперированных в объеме радикальной мастэктомии или секторальной резекции молочной железы с аксиллярной лимфодиссекцией. Морфологическое исследование операционного материала выполнялось по стандартным методикам. Для выявления костномозговых клеток-предшественников готовили суспензии из образцов свежезамороженного операционного опухолевого материала. Применяли антитела против CD34, CD133, CD90, CD11b, CD45, CD202. Результаты. Наличие совокупности гемопоэтических клеток-предшественников и клеток-предшественников макрофагов в количестве, превышающем 1,24 клетки на 100 опухолевых клеток, ассоциировано с риском развития лимфогенных метастазов и большим размером опухоли. Заключение. Результаты проведенного исследования могут быть полезны для понимания сущности опухолевой ниши и ее роли в росте опухоли и лимфогенной прогрессии ИПКНТ.
Бесплатно
Статья научная
Цель исследования - изучить связи морфологического разнообразия немелкоклеточного рака легкого с частотой лимфогенного метастазирования в группах больных с разным состоянием эпителия в смежных с опухолью бронхах. Материал и методы. Исследовали операционный материал от 90 больных немелкоклеточным раком легкого, проходивших лечение в торакоабдоминальном отделении НИИ онкологии Томского НИМЦ в период с 2009 по 2017 г. Гистологический тип рака определяли согласно классификации WHO (2020). В паренхиматозном компоненте аденокарциномы выделяли структуры типа lepidic, ацинарные, папиллярные, микропапиллярные, солидные и одиночные опухолевые клетки. В паренхиматозном компоненте плоскоклеточной карциномы выделяли 5 типов структур: (1) с ороговением, (2) состоящий из атипичных клеток шиповатого типа без ороговения, (3) состоящий из атипичных клеток базалоидного типа, (4) построенный из атипичных клеток с резко выраженным полиморфизмом, (5) одиночные опухолевые клетки. Результаты. В группе больных с изолированной базальноклеточной гиперплазией в случаях с метастатическим поражением регионарных лимфоузлов реже был обнаружен ацинарный (37 %), папиллярный (29 %) и солидный (27 %) паттерны по сравнению с наблюдениями, когда лимфогенных метастазов не было (63 %; р=0,05; 71 %; р=0,05; 73 %; р=0,01 соответственно). У пациентов с изолированной базальноклеточной гиперплазией бронхиального эпителия в случаях с наличием лимфогенного метастазирования в паренхиматозном компоненте плоскоклеточной карциномы реже выявлялись структуры 1-го (с ороговением) (17 %), 2-го (шиповатый паттерн) (33 %) и 4-го (полиморфный паттерн) (29 %) типов по сравнению со случаями, когда метастазов в регионарных лимфоузлах не было (83 %; р=0,01; 67 %; р=0,02 и 71 %; р=0,01 соответственно). В группе больных с сочетанием базальноклеточной гиперплазии и плоскоклеточной метаплазии в случаях с метастатическим поражением лимфоузлов чаще были обнаружены шиповатый паттерн (65 %), базалоидный паттерн (100 %), полиморфный паттерн (82 %) и одиночные опухолевые клетки (89 %) по сравнению с наблюдениями, когда лимфогенных метастазов не было (35 %; р=0,04; 0 %; р=0,01; 18 %; р=0,01; 11 %; р=0,01 соответственно). Заключение. Полученные данные уточняют имеющиеся сведения о значении морфологической гетерогенности опухоли для прогноза течения аденокарциномы и плоскоклеточного рака легкого.
Бесплатно
Особенности метастазирования перевиваемой меланомы В16 после ингибирования активности ММП-9
Статья научная
В эксперименте проведена оценка метастазирования меланомы кожи in vivo при селективном ингибировании ММП-9. Работа выполнена на 20 мышах линии С57Bl/6 с использованием культуры клеток меланомы В16. В опытной группе отмечалось умень- шение доли животных, имеющих метастазы в печень (p
Бесплатно
Особенности морфологического строения люминального А типа рака молочной железы
Статья научная
Показано, что люминальный А тип рака молочной железы характеризуется выраженной морфологической гетерогенностью. Это проявляется разнообразием строения инфильтративного компонента первичного опухолевого узла, в котором широко варьирует представительство разных типов структур. С разнообразием инфильтративного компонента опухоли и наличием в нем микроальвеолярных структур оказалась сопряженной частота метастатического поражения лимфатических узлов. При этом ни морфологические особенности новообразования, ни параметры лимфогенного метастазирования не были сопряжены с гематогенной диссеминацией, что не позволяет рассматривать их в качестве прогностических критериев.
Бесплатно
Статья научная
Проведено сравнительное морфологическое и морфометрическое исследование биоптатов шейки матки с диспластическими изменениями у женщин двух возрастных групп: 1-я группа - 69 женщин репродуктивного возраста до 35 лет; 2-я группа - 57 женщин пострепродуктивного возраста, старше 49 лет. Показано, что в 1-й группе чаще встречались CIN2 и CIN3. При этом у данных пациенток в многослойном плоском эпителии (МПЭ) шейки матки (ШМ) имеют место более активные процессы пролиферации, что выражается в утолщении пласта МПЭ в целом, утолщении базального слоя, более часто встречающемся акантозе, по сравнению с изменениями МПЭ у женщин более старшего возраста. Оценка проявлений местного иммунитета в подэпителиальной строме ШМ показала, что более выраженная воспалительная реакция отмечена у молодых пациенток, причем при CIN3 - в виде максимально активного перифокального воспалительного процесса.
Бесплатно
Особенности протеома сыворотки крови больных плоскоклеточными карциномами головы и шеи
Статья научная
Представлены результаты сравнительной оценки протеома сыворотки крови в группах больных ПКГШ с метастазами, без метастазов и здоровых волонтеров с помощью комбинации методов 1D-SDS PAGE градиентного гель-электрофореза и массспектрометрического анализа. Предложенный дизайн исследования показал, что протеом сыворотки крови в группах здоровых волонтеров и больных ПКГШ с метастазами и без клинического проявления прогрессирования заболевания различен. В сывороточном протеоме больных ПКГШ представлены белки, участвующие в различных клеточных процессах, которые могут быть предложены для дальнейшего изучения в качестве потенциальных маркеров опухолевой прогрессии.
Бесплатно
Статья научная
С целью определения уровня показателей окислительной модификации белков в эритроцитах больных немелкокле- точным раком легкого на различных стадиях заболевания обследовано 108 человек. В эритроцитах больных оценивалось содержание карбонильных производных белков, среднемолекулярных пептидов, SH-групп белков. Наиболее выраженное возрастание интенсивности процессов редокс-зависимой модификации белков в эритроцитах происходит у больных раком легкого II и IV стадий. Окислительная модификация белков в составе эритроцитов играет роль в нарушении их функций, что может приводить к различным гематологическим нарушениям, выраженность которых изменяется в зависимости от стадии заболевания.
Бесплатно
Особенности состояния иммунного статуса у больных раком желудка в зависимости от стадии заболевания
Статья научная
Представлены результаты исследования состояния иммунного статуса у больных раком желудка в зависимости от ста- дии заболевания. Популяционный и субпопуляционный состав лимфоцитов крови оценивали с помощью метода непрямой иммунофлуоресценции. Концентрацию иммуноглобулинов определяли методом иммунодиффузии по Манчини. Содержание ЦИК определяли турбидиметрическим методом. Установлено, что у больных раком желудка II, III и IV стадий заболевания выявляется снижение относительного уровня общих Т-лимфоцитов и CD4+-клеток, при повышении содержания NK-клеток на всех наблюдаемых стадиях заболевания и увеличение количества цитотоксических Т-лимфоцитов при раке желудка III и IV стадий. Реакция гуморального иммунитета характеризуется только снижением концентрации Ig G в сыворотке крови больных на всех исследуемых стадиях заболевания. Повышенный уровень ЦИК может определяться пониженной реактивностью фагоцитирующих клеток.
Бесплатно
Статья научная
В практической иммунологии клеточный иммунитет принято оценивать по дифференцировочным антигенам или CD-маркерам. Обычно для оценки состава клеточного звена иммунитета используется панель маркеров из 6-8 показателей. В данном исследовании оценивали не только субпопуляционный состав Т-, В-, NK-, NKT-лимфоцитов, но и маркеры активации (HLA-DR, CD25, CD38, CD69, CD314) методом проточной цитофлуориметрии. Показано, что для 20 пациентов с диссеминированным раком толстой кишки характерно повышение относительного и абсолютного содержания Тreg-лимфоцитов и NK-клеток, а также альфа-цепи рецептора IL-2 (CD25) на лимфоцитах. У 30 больных метастатической меланомой кожи также выявлено повышенное содержание CD25 +клеток и Тreg-лимфоцитов. При сравнительном анализе экспрессии маркеров активации на лимфоцитах было отмечено, что у больных раком толстой кишки повышено содержание активированных CD314 +, CD69 +NK-клеток, а у пациентов с меланомой наблюдалось увеличение количества активированных CD95 + иCD38 +Т-лимфоцитов. Данную панель маркеров можно использовать для мониторинга иммунного статуса онкологических больных на этапах лечения.
Бесплатно
Статья научная
Проведено исследование функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов методом люминол-зависимой хемилюминесценции цельной крови детей с острым лимфобластным лейкозом. Выявлено, что при миелотоксических осложнениях повышена генерация активных форм кислорода при спонтанной хемилюминесцентной реакции, чего не на- блюдалось при исследовании зимозан-индуцированной хемилюминесценции
Бесплатно
Статья научная
Проведена сравнительная оценка цитотоксической и фагоцитарной активности лейкоцитов крови онкологических больных с сепсисом, без признаков системного гнойно-воспалительного процесса и здоровых доноров. Функциональная реактивность эффекторов врожденного иммунитета оценивалась по уровню активности натуральных киллеров крови, поглотительной активности (стимуляция гранулами латекса), спонтанного и стимулированного НСТ-теста. Не выявлено достоверных отличий между уровнем функциональной активности лейкоцитов здоровых доноров и больных со злокаче- ственными новообразованиями без признаков гнойно-септических осложнений. Однако при сепсисе у онкологических больных наблюдается гиперактивация клеток-эффекторов врожденного иммунитета, что можно рассматривать как важное звено в патогенезе органной и полиорганной недостаточности.
Бесплатно
