Молекулярная медицина. Рубрика в журнале - Вестник Российского научного центра рентгенорадиологии Минздрава России
CHEK2-ассоциированный рак молочной железы
Статья научная
Рак молочной железы (РМЖ) продолжает сохранять свою лидирующую позицию в структуре заболеваемости злокачественными новообразованиями среди женского населения. По данным мировой статистики частота встречаемости наследственных форм РМЖ, обусловленного наличием мутаций в генах BRCA1, BRCA2, TP53, PTEN, ATM, BRIP, PALB2, CHEK2, составляет от 5 до 10%. Среди этих генов встречаются, как высоко-, так и умеренно- 40 инизкопенетрантные. Зависимость возникновения РМЖ от наличия какой-либо мутации в настоящий момент является актуальным и активно изучаемым направлением в онкологии. Довольно много отечественных и зарубежных исследований посвящено заболеваниям, возникших у пациенток с мутациями в генах BRCA1/BRCA2. В настоящий момент выработана лекарственная и хирургическая тактика лечения и ведения этой категории пациенток с учетом всех факторов риска. Однако CHEK2-ассоциированный РМЖ представляет не меньший интерес. Достаточное количество современных исследований наследственного РМЖ касается именно мутации в гене CHEK2, что, безусловно, заслуживает нашего внимания. Определенного алгоритма в тактике ведения таких пациенток в настоящий момент нет.
Бесплатно
Статья научная
Повышенная рентгенологическая плотность (РП) ткани молочной железы на маммаграфическом снимке является фактором риска развития рака молочной железы. С другой стороны плотный фон может маскировать опухоль, приводя к выявлению рака молочной железы на более поздних стадиях. Предметом настоящего исследования является оценка взаимосвязи между РП и молекулярным фенотипом опухоли.
Бесплатно
Анализ экспрессии генов в фиброаденоме молочной железы
Статья научная
Введение: Фиброаденома (ФА) является одним из самых распространенных доброкачественных заболеваний молочной железы у молодых женщин, факторы риска, а также механизмы развития которого остаются малоизученными. Понимание механизмов контроля пролиферации, апоптоза и межклеточных взаимодействий в доброкачественных образованиях может позволить более дифференцированно анализировать процессы малигнизации. Материалы и методы: В 36 образцах ткани молочной железы (18 ФА и 18 образцов морфологически неизмененной ткани (МНТ) молочной железы) методом ПЦР в реальном времени (RT-ПЦР) был проведен сравнительный анализ экспрессии мРНК KI67, BIRC5, ESR1, PRG и MMP11. Результаты: В ткани ФА по сравнению с МНТ был статистически значимо выше уровень экспрессии KI67 (p=0,0112), BIRC5 (p=0,0018), MMP11 (p=0,007), а также тенденция в отношении PGR (р=0,077). Уровень экспрессии ESR1 не отличался (р=0,32). Кроме того, для ФА обнаружена положительная корреляция экспрессии PGR и MMP11 (r=0,47; p=0,042), чего не наблюдалось в МНТ (r=0,11; p=0,65). Заключение : Отличие уровней экспрессии генов в ФА и МНТ может свидетельствовать о существовании различных механизмов контроля метаболической активности. Анализ механизмов взаимодействия PGR и матриксных металлопротеиназ требует дальнейшего изучения.
Бесплатно
Статья научная
Активность апоптоза и пролиферации контролируется внешними и внутриклеточными сигналами, в частности, поступающими в клетку через рецепторы. Для молочной железы такими рецепторами являются рецепторы эстрогена, прогестерона, С- erbB 2. Нами показано, что экспрессия маркеров апоптоза отличается в образцах рака молочной железы в зависимости от статуса рецепторов стероидных гормонов. Результаты корреляционного анализа свидетельствуют об изменении роли рецепторов в контроле пролиферативной активности злокачественной клетки.
Бесплатно
Статья научная
Цель исследования: метастатическое поражение (МТС) регионарных лимфатических узлов (ЛУ) при раке молочной железы (РМЖ) является одним из важнейших прогностических признаков. Целью исследования было повышение чувствительности и специфичности обнаружения МТС при РМЖ на основе использования молекулярных маркеров, в частности анализа экспрессии мРНК цитокератина-19 (CK-19) в ткани ЛУ. Материалы и методы: проведен анализ уровня экспрессии CK-19 в 130 лимфоузлах, полученных от больных РМЖ I-III стадии. В 48% (n=62) лимфатических узлов метастазы были морфологически подтверждены (N+). Для анализа уровня экспрессии мРНК CK-19 использовалась РВ-ПЦР. Результаты: уровень экспрессии CK-19 в метастатических лимфоузлах значительно превышал таковой в образцах лимфоузлов без метастазов (р=0,00001). Чувствительность и специфичность метода составила 97% и 92%, соответственно. Заключение: Метод обнаружения мРНК с помощью РВ-ПЦР CK-19 обладает достаточной чувствительностью и специфичностью для верификации метастазов в ЛУ при РМЖ.
Бесплатно
Статья научная
С целью изучения роли вариабельности генов эксцизионной репарации оснований в развитии невынашивания беременности (НБ) в первом триместре, включая привычное невынашивание беременности (ПНБ), нами были исследованы полиморфные варианты rs1052536 гена LIG3, rs4462560 гена NEIL1, rs174538 гена FEN1, rs1052133 гена OGG1 и rs2516739 гена NTHL1. В исследовании приняли участие 528 женщин, из которых 331 с НБ в анамнезе и 197 женщин с реализованной репродуктивной функцией и отсутствием НБ. В ходе исследования были выявлены рисковые аллели rs1052133-G (OGG1) и rs4462560-G (NEIL1) в группе женщин с ПНБ, а также rs1052133-G (OGG1) и ге2516739-Т (NTHL1) в группе со сроком гестации на момент прерывания беременности > 8.5 недель. OGG1, NTHL1 и NEIL1 относятся к семейству ДНК-гликозилаз, катализирующих гидролиз связи между повреждённым основанием и дезоксирибозным фрагментом.
Бесплатно
Статья научная
Цель: Ретроспективно оценить морфологические и генетические особенности рака молочной железы в группах с прогрессированием при различных видах хирургического лечения. Материалы и методы: Исследовано 458 образцов опухолевой ткани, из них 144 образца пациенток с локорегиональными и отдаленными рецидивами. Проведен анализ экспрессии 21 гена методом ПЦР в реальном времени. Результаты: Обнаружены достоверные отличия молекулярных профилей экспрессии генов при сравнении групп рецидивирования при мастэктомии и радикальной резекции молочной железы. Для радикальных мастэктомий прогностически значимыми является экспрессия генов: Ki67, MYC,P16INK4a,PTEN, а для групп радикальных резекций - P16INK4a и BCL2. Заключение: Исследование генетического профиля опухолей позволяет выявить новые, эффективные маркеры неблагоприятного прогноза.
Бесплатно
Диагностические возможности молекулярного ПАП-теста у женщин репродуктивного возраста
Статья научная
В работе проанализированы перспективы дифференциальной диагностики предраковых процессов и рака шейки матки у женщин репродуктивного возраста. Показана возможность точной классификации клинически важных групп: доброкачественные изменения и LSIL (низкая степень плоскоклеточного интраэпителиального поражения), не менее, чем HSIL (высокая степень плоскоклеточного интраэпителиального поражения), основываясь на анализе экспрессии мРНК 21 гена по материалу консервирующего раствора Пап-теста CellPrep в 84,44% случаев. Дискриминантный анализ выявил 5 генов, оказывающих наибольшее влияние на правильность классификации. Анализ экспрессии мРНК исследованных генов может претендовать на роль теста медицинской сортировки как этап молекулярного Пап-теста.
Бесплатно
Статья научная
Цель исследования Доклиническое изучение влияния новой фармацевтической композиции «Инфемин» на основе 3,3’-дииндолилметана на репродуктивную функцию и иммунную систему. Материалы и методы Исследование выполнено на лабораторных животных, обладающих высокой скоростью репродукции (крысах, мышах). Проведена оценка выживаемости плодов животных после воздействия препарата «Инфемин». Изучено влияние препарата на гаметогенез экспериментальных животных, а также на гуморальный и клеточный иммунный ответ у интактных и стрессированных животных. Результаты Установлено, что вводимая доза формуляции «Инфемин» 1000 мг/кг в пересчете на 3,3’- дииндолилметан не оказывает отрицательного влияния на гаметогенез и тератогенез у экспериментальных животных. Препарат оказывает стимулирующее воздействие на гуморальный и клеточный иммунитет при эмоциональном стрессе. Выводы Доказано, что новая фармацевтическая композиция на основе 3,3’-дииндолилметана не обладает репродуктивной токсичностью и стимулирует гуморальный и клеточный иммунитет.
Бесплатно
Изучение подострой токсичности лекарственного средства "Карплазмин"
Статья научная
Проведено доклиническое исследование подострой токсичности препарата«Карплазмин», являющегося представителем группы CAR-T препаратов (T-лимфоцитов с химерными антигенными рецепторами). «Карплазмин» обладает тропностью к раково- эмбриональному антигену (РЭА) и способен лизировать РЭА-позитивные опухолевые клетки. Подострая токсичность исследовалась при внутривенном введении на группах беспородных крыс и на кроликах породы Шиншила. Для получения CAR-T «Карплазмин» использовался препарат плазмиды в лекарственной форме «лиофилизат для приготовления раствора для внутривенного введения 1,2 мг» производства ООО «ХЕМА» (Россия). Одна доза препарата «Карплазмин» (эффективная доза, ЭД) представляла собой 1 млн CAR-T лимфоцитов.В ходе исследования было показано, что многократное внутривенное введение препарата «Карплазмин» в дозе 10 ЭД не оказывает токсического действия на белых беспородных крыс за исключением незначительных кратковременных внешних признаков интоксикации после инъекции. Также не наблюдалось токсических проявлений в дозе до 4 ЭД у кроликов породы Шиншилла. Наблюдалось небольшое повышение общего содержания лейкоцитов и изменение лейкоцитарной формулы у крыс и кроликов, получавших максимальную дозу препарата.
Бесплатно
Статья научная
Цель: исследование противоопухолевой активности пептидной конструкции, включающей ингибитор Ras-ГТФазы и интернализуемый вектор, обеспечивающий эффективное внутриклеточное проникновение. Материалы и методы. С помощью методов математического моделирования разработана пептидная конструкция (К26К), являющаяся ингибитором связывания комплекса Ras-Raf ивключающая также последовательность, обеспечивающую эффективную интернализацию пептида в клетки. Исследование проведено в условиях in vitro с использованием в качестве моделей злокачественных заболеваний культуры клеток линий опухолей человека: НТ29 (аденокарцинома толстой кишки человека), OAW-42 (карцинома яичника, человек), OVCAR- 3 (аденокарцинома яичника человека).Исследование проведено путем оценки цитотоксического и цитостатического эффектов последовательности с помощью следующих методов: МТТ-тест; проточная цитофлуориметрия; оценка пролиферации в реальном времени (система iCELLigence).Результаты. Показано, что исследуемая последовательность (К26К) обладает выраженными противоопухолевыми свойствами в отношении клеток колоректального рака и рака яичника, способна индуцировать апоптоз и тормозить процессы пролиферации в культурах клеток опухолей данных локализаций. Заключение. На основании проведенных исследований было показано, что разработанный пептидный ингибитор Ras-ГТФазы обладает выраженными противоопухолевыми свойствами в отношении культур клеток рака толстой кишки и рака яичника человека.
Бесплатно
Статья научная
Рак легкого (РЛ) является одним из наиболее распространенных злокачественных новообразований у населения земного шара. С начала ХХ века заболеваемость РЛ возросла в несколько десятков раз, причем ее рост особенно выражен в промышленно развитых странах. Заболеваемость подтипом рака легкого - аденокарциономой легкого - в России составляет 22 случая на 100 тыс. населения. Рост заболеваемости совпадает с ростом смертности. Поиск новых эффективных методов лечения рака легкого является актуальной клинической задачей.В представленной статье показаны результаты исследования эффективности последовательности пептидного ингибитора Ras-ГТФaзы (K26K) на клеточных линиях аденокарциномы легкого и немелкоклеточного рака легкого, проведённые in vitro. В ходе проделанной работы было показано, что исследуемое лекарственное средство обладает выраженной цитотоксической активностью, что определяется увеличением количества мертвых клеток и снижением количества живых клеток в культурах используемых линий, и является потенциальным противоопухолевым препаратом.
Бесплатно
Статья научная
Ранее мы продемонстрировали прогностическое значение некоторых рутинных лабораторных показателей для предсказания скорости проявления карциномы молочной железы и эффективность интерлейкина-2 (ИЛ-2) у мышей-реципиентов с рано проявляющимся перевиваемым раком молочных желез (РМЖ). Было проанализировано изменение 17 гематологических показателей у интактных стареющих самцов мышей линии BLRB до перевивки им сингенных клеток РМЖ самки и лечении их 2х10 5 МЕ ИЛ-2 (13 и 22 день после перевивки опухоли). В среднем, лечение привело к статистически значимому замедлению скорости прироста опухоли у пролеченных мышей, однако динамика выживания не была улучшена. Было показано, что успешность иммунотерапии ИЛ-2 зависела от изначального физического состояния стареющих мышей до перевивки им рака молочных желез, о чем свидетельствовали значения пяти рутинных гематологических параметров у интактных самцов.
Бесплатно
Иммунофенотипическая характеристика уортин-подобного варианта папиллярного рака щитовидной железы
Статья научная
Одна из редких форм папиллярного рака - Уортин-подобный вариант (УПВПР) остаётся малоизученным.Цель исследования: выявление патоморфологических и прогностических особенностей УПВПР щитовидной железы (иммуногистохимический аспект). Материалы и методы: Из 2380 случаев прооперированного папиллярного рака щитовидной железы у 34 пациентов был диагностирован УПВПР (1,43%); женщин - 32, мужчин - 2; средний возраст - 45 лет. Полученный материал был изучен с помощью методов световой микроскопии и иммуногистохимии (антитела к СК19, СD15, CD138, TG). Результаты: В 20-и случаях отмечали положительную реакцию с антителами на CD15 (96,2± 0,1%); в 14 случаях из 34 (41,2%) обнаружили умеренное маркирование на CD138 (48,3 ± 0,1%); во всех случаях (n=34) выявили окрашивание на TG: у пациентов без метастазов в регионарные лимфатические узлы - 78,0 ± 0,3%, а у больных с метастазами - 89,9 ± 0,1%. Заключение: Данные клинико-морфологического и иммуногистохимического анализа на изучаемые маркеры указывают, что УПВПР относится к опухолям эпителиального генеза (СК19 - 86,2 ± 0,1%); CD15 можно считать одним из маркеров метастазирования при данном варианте раке щитовидной железы (у мужчин - 98,4 ± 0,2%, у женщин - 59,4 ± 0,1%); раковые клетки обладают низкой степенью дифференцировки (CD138 - 48,3 ± 0,1%); высокий уровень маркирования на TG (78,0 ± 0,3%) говорит о более благоприятном прогнозе.
Бесплатно
Статья научная
Разработка и внедрение новых методов диагностики, основанных на молекулярно- биологическом подходе, позволяют с высокой эффективностью проводить дифференциальную диагностику заболеваний и определять прогноз заболевания.Целью данного исследования являлась разработка технологии молекулярно-биологического тестирования образцов тканей молочной железы, повышающей эффективность дифференциальной диагностики образований молочной железы.Проведены исследования молекулярно-генетического профиля тканей молочной железы ипредложен алгоритм дообследования женщин при заболеваниях молочной железы, включающий определение уровня экспрессии 9 генов и позволяющий повысить общую эффективность диагностики.
Бесплатно
Статья научная
Оральный мукозит - одно из самых распространенных и тяжелых осложнений проводимого противоопухолевого лечения. Среди этиологических факторов развития орального мукозита выделяют особенности противоопухолевого лечения злокачественных новообразований ротовой полости, состояние санированности полости рта, возраст пациента и другие. Определены основные механизмы патогенеза развития мукозитов. Но среди существующих теорий развития мукозита ни одна в полной мере не объясняет причины различий в степени тяжести клинических проявлений орального мукозита у различных пациентов. Таким образом, поиск новых факторов, определяющих развитие орального мукозита, является актуальной исследовательской проблемой. К таким факторам могут относиться генетические особенности пациентов. С 2016 по 2017 год на базе Российского научного центра рентгенорадиологии (ФГБУ "РНЦРР" Минздрава России) нами проведено пилотное исследование по определению частот полиморфных вариантов в генах детоксикации ксенобитиков и генах иммунного ответа у 23 пациентов с плоскоклеточным раком орофарингеальной области, имеющих различные степени тяжести проявления орального мукозита. Выявлена ассоциация аллеля rs2070874-T гена IL4 с развитием мукозита тяжелой степени. Полученные результаты указывают на перспективность данного направления исследований и свидетельствуют о необходимости проведения подобных работ на больших по объему выборках.
Бесплатно
Статья научная
Белок р16INK4a является одним из ингибиторов циклин-зависимых киназ D-типа и нарушение его функций характерно для многих злокачественных новообразований, включая колоректальный рак (КРР). Ранее мы показали, что пептид MM-D37K, включающий последовательность 83-103 из р16INK4a обладает цитостатическим и апоптоз активирующим действием в отношении опухолей различного генеза. Целью данного исследования являлось изучение особенностей проапоптотического эффекта интернализуемого пептида MM-D37K на клеточную линию КРР НТ29. Материалы и методы: эксперименты проводились на линии клеток НТ-29 (аденокарцинома толстой кишки); для анализа показателей апоптоза и клеточного цикла был использован метод проточной цитофлуориметрии. Результаты: пептид MM-D37K вызывает задержку перехода G1 - S и активирует апоптоз в клетках КРР НТ29. Активация апоптоза имеет фазозависимый характер и происходит во время перехода клеток из G1 в S клеточного цикла через 4-8 часов после снятия блока пролиферации. Это совпадает по времени с задержкой клеток в G1, вызываемой пептидом-ингибитором циклиновых киназ MM-D37K. Обнаруженный эффект можно объяснить мутацией гена р16INК4а в исследуемой линии клеток.
Бесплатно
Статья научная
Целью исследования являлось определение параметров безопасности в исследованиях острой токсичности нового сомато-клеточного противоопухолевого препарата для CAR-T терапии солидных опухолей, экспрессирующих раково-эмбриональный антиген (РЭА) - Карплазмин-ova. Исследуемый сомато-клеточный лекарственный препарат представляет собой аутологичные Т-лимфоциты, генетически модифицированные рекомбинантной плазмидной ДНК, несущей ген РЭА. Исследование острой токсичности лекарственного препарата проведено на 168 белых беспородных мышах (84 самца и 84 самки), 168 белых беспородных крысах (84 самца и 84 самки) и 30 кроликах породы Шиншилла (15 самцов и 15 самок). Исследование острой токсичности препарата предполагает однократное введение фармакологического вещества и дальнейшее наблюдение за экспериментальными животными в течение 14 суток. На основании проведенных исследований, показано, что препарат не оказывает выраженного токсического действия на экспериментальных животных.
Бесплатно
Исследование острой токсичности пептидного соединения ММ-D37К на мышах и крысах
Статья научная
Оценка острой токсичности является необходимым этапом доклинических исследований лекарственных препаратов. Цель настоящей работы - изучение острой токсичности иопределение максимальной толерантной дозы пептидного препарата MM-D37K при разных способах введения у самцов и самок мышей линии CD-1 и крыс линии SD.Методы. MM-D37K вводили однократно; были исследованы внутрибрюшинное, внутривенное, подкожное и пероральное (per os) введение. Дозы при пероральном введении составили от 5 до 1500 мг/кг, при внутрибрюшинном, внутривенном и, подкожном способах введения на мышах дозы составляли от 5 до 350 мг/кг, на крысах от 5 до 500 мг/кг. Животным контрольных групп вводили по 1 мл 1% раствора крахмала. Оценивали клиническую картину, признаки интоксикации и гибель животных. Эвтаназию и патологоанатомическое вскрытие проводили через 14 суток после введения пептидного препарата.Результаты. Показано, что пептидный препарат MM-D37K у половозрелых мышей и крыс обоих полов при разных способах введения и однократном применении не влияет на потребление воды и корма, не оказывает влияния на гематологические, биохимические параметры крови. Различий между самками и самцами в действии исследуемого препарата не зарегистрировано. Зарегистрировано местно-раздражающее действие при внутрибрюшинном и подкожном введении. Проведенное исследование позволило установить токсические концентрации MM-D37K, которые существенно выше действующих терапевтических доз разрабатываемого ЛС, что позволяет планирование дальнейших исследований и выход на клинические исследования предлагаемого нового противоопухолевого препарата.
Бесплатно
Статья научная
В последние годы в терапии онкологических заболеваний все большее внимание уделяется проблеме лечения злокачественных новообразований, возникающих из-за активации онкогена RAS . Высокая доля мутаций в гене RAS характерна для опухолей различных локализаций, что делает его привлекательной терапевтической мишенью. Современные препараты, селективно ингибирующие мутантный KRAS , на фоне значительных преимуществ, в сравнении с традиционными методами лечения, имеют и ряд недостатков, в частности, высокую частоту побочных эффектов. Поэтому разработка новых препаратов ингибиторов Ras-ГТФаз, имеющих улучшенные фармакодинамические характеристики является актуальной задачей. Целью данной работы являлось исследование in vivo специфической фармакологической активности нового, пептидного ингибитора Ras- ГТФазы (Инг-Рас) на ксенографтной модели немелкоклеточного рака легкого человека. Были получены статистически достоверные данные увеличения продолжительности жизни у мышей на 16% в сравнении с контрольной группой при введении препарата в дозе 5 мг/кг и 36,3% при введении 10 мг/кг. Также наблюдалось дозозависимое торможение роста опухоли на 30,5% и 57,3% соответственно. Высокая специфичность, обусловленная механизмом действия пептидной конструкции, позволяет ожидать минимизацию побочных эффектов потенциального лекарственного средства Инг-Рас.
Бесплатно
